第一部分 生物化学实验基本要求与常用仪器使用方法 1
第一章 生物化学实验基本操作 1
第二章 生物活性成分的制备 5
第三章 分光光度技术 13
第四章 荧光光谱技术 17
第五章 层析技术 21
第六章 电泳技术 34
第七章 离心技术 52
第二部分 实验 57
第八章 糖 57
实验一 总糖和还原糖测定(3,5-二硝基水杨酸法) 57
实验二 蒽酮比色定糖法 59
实验三 血液葡萄糖含量的测定(Folin-Wu法) 60
第九章 蛋白质 63
实验四 蛋白质含量的测定 63
Ⅰ.凯氏定氮法测定蛋白质含量 63
Ⅱ.紫外吸收法测定蛋白质含量 67
Ⅲ.双缩脲(Biuret)法测定蛋白质含量 68
Ⅳ.Folin-酚法测定蛋白质含量 70
Ⅴ.考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量 72
实验五 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质 73
实验六 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分离预染的血清脂蛋白 76
实验七SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量 79
实验八 凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量 82
实验九 植物组织中游离氨基酸的分离鉴定 86
实验十 蛋白质两性解离及等电点的测定 88
第十章 酶 91
实验十一 影响酶作用的因素 91
实验十二 过氧化氢酶活力的测定 93
实验十三 淀粉酶活力的测定 95
实验十四 植酸酶活性的测定 97
实验十五 蛋白酶活性的测定 100
实验十六 血清碱性磷酸酶活性的测定 103
第十一章 维生素 105
实验十七 维生素C的定量测定 105
实验十八 维生素B1的定量测定 107
第十二章 核酸 110
实验十九 植物组织中DNA的提取和纯度鉴定 110
实验二十 肝脏DNA的提取及纯度鉴定 111
实验二十一 质粒DNA的小量提取(碱裂解法) 114
实验二十二 纳米磁性粒子法小量提取细菌质粒DNA 118
实验二十三 植物叶片总RNA小量制备(Trizol法) 120
实验二十四 紫外吸收法测定核酸含量 122
实验二十五 二苯胺法测定DNA含量 123
实验二十六 定磷法测定RNA含量 125
实验二十七 琼脂糖凝胶电泳分离鉴定DNA 126
第十三章 体内代谢 129
实验二十八 酶促转氨基作用及其鉴定 129
实验二十九 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 131
实验三十 血清谷丙转氨酶(SGPT)活力测定 132
实验三十一 植物总黄酮的提取与测定 135
第十四章 生物化学综合实验 138
实验三十二SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹 138
实验三十三 猪血超氧化物歧化酶的分离纯化、活性测定及同工酶鉴定 141
实验三十四 目的基因的PCR扩增 145
附录一 常用缓冲溶液的配制方法 147
附录二 硫酸铵饱和度的常用表 153
附录三 常用指示剂的配制 155
参考文献 156