第一部分 生物工程下游技术实验基础理论 3
1 生物工程下游技术概述 3
1.1 生物工程下游技术操作的对象 3
1.2 物质分离纯化的基本策略 4
1.3 生物工程下游分离基本过程 6
2 细胞破碎与固液分离技术 12
2.1 细胞破碎技术 12
2.2 固液分离技术 15
2.3 离心分离技术 16
3 膜分离技术 23
3.1 透析 23
3.2 超滤技术 25
3.3 微孔膜过滤技术 26
4 层析技术 28
4.1 层析的基本概念 28
4.2 层析法的分类 31
4.3 柱层析的基本操作 32
4.4 凝胶层析 34
4.5 离子交换层析 42
4.6 亲和层析 48
5 电泳分离技术 55
5.1 电泳基本原理 55
5.2 电泳的分类 58
第二部分 生物工程下游技术学生实验 63
第一章 生物工程下游技术常见仪器设备的使用 63
实验一 管式离心机在发酵菌液分离中的应用 63
实验二 连续流超高压冷冻细胞破碎机在生物工程中的应用 64
实验三 板框压滤机在发酵菌液分离中的应用 67
实验四 陶瓷微滤膜在发酵菌液浓缩中的应用 69
实验五 超滤膜在蛋白质浓缩中的应用 71
实验六 蛋白质的真空浓缩 72
实验七 真空冷冻干燥机在生物制品生产中的应用 74
实验八 蛋白质的冷冻干燥 76
实验九 喷雾干燥机在生物制品中的应用 78
第二章 细胞破碎与粗分离实验 81
实验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定 81
实验二 机械剪切法细胞破碎实验 82
实验三 硫酸铵分级盐析分离血清中的主要蛋白质 84
实验四 蔗糖密度梯度离心分离实验 87
实验五 青霉素的萃取与萃取率的计算 88
实验六 蛋白质的透析 90
实验七 胰凝乳蛋白酶的制备 91
实验八 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备 93
第三章 层析和电泳分离分析技术实验 95
实验一 凝胶层析法测定蛋白质分子质量 95
实验二 亲和层析纯化胰蛋白酶 98
实验三 离子交换色谱分离氨基酸 106
实验四 SDS-PAGE测定蛋白质分子质量 108
实验五 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 111
第四章 综合性设计性实验 114
实验一 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 114
实验二 溶菌酶的制备及其性质 118
实验三 超氧化物歧化酶SOD的分离纯化技术 122
实验四 糖化酶的固定化及其在葡萄糖生产中的应用工艺 129
第三部分 附录 137
附录一 生物工程下游技术实验室的安全及环保知识 137
附录二 常用消毒剂使用方法 146
附录三 常见的消毒剂配制表 148
附录四 常用pH缓冲溶液 149
附录五 一些常用酸碱指示剂 158
附录六 常用固态化合物当量浓度配制参考表 159
附录七 化学试剂纯度分级表 160
附录八 调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃) 161
附录九 调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃) 162
附录十 不同温度下饱和硫酸铵溶液的数据 163
附录十一 常见蛋白质分子质量参考表 164