目录 3
第一篇 细胞神经科学 3
第一章 神经细胞和脑片培养 3
第一节 神经元和神经胶质的基本特征 3
第二节 细胞培养的设备与材料 5
第三节 原代海马神经元的培养 7
第四节 基底前脑胆碱能神经元的培养 9
第五节 小脑颗粒细胞的培养 10
第六节 大鼠纹状体神经元的培养 11
第七节 神经细胞的无血清培养 12
第八节 新生小鼠背根神经节施万细胞的纯化和培养 14
第九节 原代星形胶质细胞的培养 15
第十节 神经元和神经胶质共培养 15
第十一节 原代少突胶质细胞前体的分离和纯化 17
第十二节 鸡胚脊髓运动神经元的分离和培养 19
第十三节 神经细胞株的传代与培养 22
第十四节 脑片的分离、制备与培养 23
第十五节 细胞的定量分析方法 25
第十六节 细胞存活力的评估方法 28
第二章 细胞器的分离和制备 33
第一节 线粒体的制备及功能测定 33
第二节 差速及密度梯度离心制备过氧化物体 41
第三节 差速及密度梯度离心制备溶酶体 47
第四节 差速及密度梯度离心制备高尔基膜 50
第五节 细胞核及核膜的制备 55
第六节 突触体的分离和制备 60
第一节 胚胎干细胞的神经分化 63
第三章 神经干细胞的研究方法 63
第二节 非胚胎组织干细胞的培养 65
第三节 神经胶质干细胞的培养 68
第四节 胚胎组织干细胞和前驱细胞的分离 68
第五节 成年啮齿类动物脊髓干细胞的分离和特点 72
第六节 骨髓和脐带血神经前驱（NRP）细胞的制备 74
第四章 神经细胞凋亡 78
第一节 概述 78
第二节 形态学检测 79
第三节 染色质分解的检测 86
第四节 单链DNA抗体检测细胞凋亡 99
第五节 神经细胞凋亡的研究模型与应用 101
第五章 神经细胞信号分子的检测 108
第一节 概述 108
第二节 细胞内钙离子浓度的测定 110
第三节 一氧化氮及一氧化氮合酶的测定 122
第四节 环腺苷酸（cAMP）和三磷酸肌醇（IP3）的测定 126
第五节 腺苷酸环化酶和鸟苷酸环化酶的测定 130
第六节 环腺苷酸依赖的蛋白激酶（PKA）活性的测定 134
第七节 钙／钙调蛋白-依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）自主磷酸化活性的测定 136
第八节 超氧化物歧化酶活性的测定 137
第九节 脂质过氧化产物的测定 141
第十节 维生素E的高压液相色谱分析 145
第十一节 谷胱甘肽的高压液相分析 146
第十二节 微注射法检测G蛋白信号 148
第十三节 MAP激酶信号传导的检测 151
第十四节 Akt/PKB信号通路的测定 155
第一节 蛋白激酶C的结构分析 160
第六章 蛋白激酶C 160
第二节 蛋白激酶C的表达与纯化 164
第三节 蛋白激酶C酶活性的测定 167
第四节 蛋白激酶C的亚细胞再分布 169
第五节 荧光成像法检测蛋白激酶C的膜转位 171
第六节 蛋白激酶C的磷酸化与去磷酸化 173
第七节 蛋白激酶C底物——神经颗粒素的研究进展 182
第八节 蛋白激酶C的药理学分析 185
第一节 概述 195
第二节 神经营养因子及其受体 195
第七章 神经营养因子 195
第二篇 神经化学和神经药理学 195
第三节 神经生长因子的纯化 200
第四节 体外神经营养因子的活性测定 201
第五节 神经营养物质的提取和定量 203
第六节 神经营养物质mRNA的定量 205
第七节 免疫组织化学法检测神经营养物质在中枢神经系统的表达 207
第八节 过度表达神经营养物质的转基因动物的构建和分析 209
第九节 神经营养因子在神经退行性疾病中的研究进展和应用前景 217
第一节 概论 219
第八章 微透析 219
第二节 透析样本中神经递质的测定 224
第九章 受体 230
第一节 受体的概念 230
第二节 受体与配体相互作用的学说 233
第三节 受体的分类和结构以及受体亚型 234
第四节 受体的信号转导 236
第六节 受体的变构 238
第五节 受体的调节 238
第七节 受体的克隆 242
第十章 放射性配体-受体结合分析技术 246
第一节 概述 246
第二节 放射性配体-受体结合的基本理论 247
第三节 受体结合实验的技术要点 249
第四节 受体饱和结合实验 256
第五节 竞争结合实验 257
第六节 速率常数的测定 259
第七节 受体的定位研究 261
第十一章 中枢神经系统受体放射分析个例 264
第一节 阿片受体 264
第二节 大麻碱受体 267
第三节 神经烟碱样（N-Ach）受体 268
第四节 肾上腺素能受体 271
第五节 多巴胺（DA）受体 275
第六节 五羟色胺（5-HT）受体 279
第七节 野生型兴奋氨基酸（EAA）离子通道受体 288
第八节 NMDA受体甘氨酸结合位点和药物结合活性分析 291
第九节 γ-氨基丁酸（GABA）受体 295
第十节 GABAA受体的苯二氮？（BZ）位点 301
第十一节 GABAA受体的木防己苦毒素位点 304
第十二节 组胺（H）受体 307
第十三节 腺嘌呤核苷（ADO）受体 313
第十四节 钙离子通道受体 318
第十五节 钾离子通道受体 322
第十六节 血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）受体 328
第十七节 促皮质激素释放因子（CRF）受体 333
第十八节 神经肽Y（NPY）受体 337
第十九节 速激肽（TK）受体 340
第二十节 缩胆囊素（CCK）受体 344
第二十一节 趋化因子受体 348
第二十二节 神经组织胰岛素样生长因子（IGF）受体的放射自显影定位 351
第二十三节 G蛋白偶联受体变构调节的定量分析 354
第十二章 核酸的研究方法与技术 371
第一节 概述 371
第三篇 分子神经科学 371
第二节 大肠杆菌，质粒和噬菌体 372
第三节 DNA的制备和分析 378
第四节 神经基因克隆和表达 393
第五节 RNA的制备和分析 404
第六节 从单细胞构建重组的cDNA文库 421
第七节 DNA的序列测定 428
第八节 哺乳动物细胞中DNA的转导 435
第九节 核酸芯片 444
第十节 克隆DNA的诱变 452
第十一节 同源重组的基因定向打靶综述 457
第十二节 RNA干涉 460
第十三章 生物信息学 470
第一节 概述 470
第二节 生物学数据库的使用 470
第三节 识别功能域 475
第四节 类似物和同源搜索 479
第五节 分子生物学常用的网址和参考资料 482
第一节 蛋白质定量方法 484
第十四章 蛋白质分析技术 484
第二节 蛋白质电泳和蛋白质印迹技术 486
第三节 质谱技术在蛋白质研究中的应用 500
第十五章 蛋白质磷酸化研究技术 507
第一节 概述 507
第二节 完整细胞内蛋白磷酸化的研究方法 507
第三节 磷酸化多肽图谱的绘制 516
第四节 分析体内和体外的磷酸化位点 528
第十六章 蛋白质分子间相互作用的研究方法 540
第一节 酵母双杂交 540
第二节 GST沉淀确定酵母双杂交系统中筛选出蛋白间的相互作用 546
第三节 免疫沉淀确定蛋白间的相互作用 550
第十七章 神经免疫系统的研究方法与技术 554
第一节 概述 554
第二节 神经免疫组织化学 555
第三节 神经免疫学方法与技术 556
第四节 显微镜的种类、结构与应用 562
第十八章 遗传工程修饰小鼠 566
第一节 概述 566
第二节 转基因小鼠制作的原理、方法和应用 566
第三节 基因敲除小鼠制作的原理、方法和应用 572
第四篇 神经电生理学 583
第十九章 生物电信号及电生理实验室的建立 583
第一节 生物电信号 583
第二节 生物电记录的微电极 586
第三节 生物电的记录 589
第四节 电生理实验室的建立 592
第一节 细胞外单元记录概论 595
第二十章 细胞外电生理记录 595
第二节 麻醉动物的细胞外记录 598
第三节 头位钳制动物的细胞外记录 603
第四节 行为动物的多神经元细胞外记录 606
第二十一章 细胞内电生理记录 610
第一节 电压钳位技术 610
第二节 双电极电压钳位技术 611
第三节 单电极的电压钳位记录 613
第四节 资料分析 615
第五节 细胞内染色标记法 616
第二十二章 膜片钳技术 620
第一节 膜片钳基础 620
第二节 全细胞记录 622
第三节 单通道记录 626
第四节 脑片的膜片钳记录 630
第五节 单细胞聚合酶链反应的膜片钳记录 636
第二十三章 突触可塑性研究 642
第一节 突触可塑性的基础理论 642
第二节 学习记忆的电生理研究 651
第三节 突触可塑性的诱导技术 653
第四节 突触可塑性的记录技术 656
第二十四章 临床电生理学 666
第一节 脑电图 666
第二节 诱发电位 672
第三节 视觉电生理 682
第二十五章 学习和记忆的行为学研究方法 695
第一节 概述 695
第五篇 行为神经科学 695
第二节 迷宫 696
第三节 暗示与关联条件恐惧 703
第四节 主动回避与被动回避 705
第五节 认知实验 708
第六节 小脑依赖的运动记忆：眨眼条件反应 712
第七节 纹状体依赖的记忆模型：赢-留放射臂迷宫 714
第二十六章 运动功能的行为学评价及癫痫模型 718
第一节 概述 718
第二节 运动行为实验 719
第三节 旋转杆平衡实验 720
第四节 平衡木实验 722
第五节 足印分析实验 723
第六节 电休克和药物诱导惊厥的癫痫模型 725
第七节 杏仁核电点燃 726
第二十七章 疼痛的研究与疼痛模型 728
第一节 疼痛的概念 728
第二节 疼痛的传导通路 731
第三节 疼痛的机制 734
第四节 疼痛模型的建立 737
第五节 疼痛的电生理学研究 743
第二十八章 睡眠的研究 747
第一节 睡眠的分期 747
第二节 生物钟的节律 750
第三节 睡眠与学习记忆的关系 752
第四节 睡眠的分子生物学研究 754
第五节 发作性睡眠病 756
第一节 概述 763
第二节 细胞的老化和死亡 763
第六篇 常见神经、精神系统疾病的体内、外模型及研究方法 763
第二十九章 衰老的研究方法与技术 763
第三节 与衰老有关的药物代谢酶系统的改变 773
第四节 老龄化后抵抗生物分子损伤的防御系统的改变 775
第五节 老年相关的细胞生物分子的改变 781
第六节 老年后线粒体功能改变和突变分析 793
第七节 饮食节制和寿命 801
第八节 老化研究中基因工程鼠的应用 802
第一节 概述 809
第三十章 脑缺血的研究方法与技术 809
第二节 脑缺血动物实验模型 810
第三节 脑缺血体外模型 818
第四节 动物模型中缺血性脑损伤的影响因素 820
第五节 缺血预适应 821
第六节 缺血性脑损伤的评价方法 824
第七节 脑缺血性损伤后线粒体功能的评价 829
第八节 脑缺血性损伤后自由基的变化及氧化损伤 837
第九节 半胱氨酸蛋白酶活性分析 839
第十节 脑缺血性损伤后炎性细胞因子的测定 847
第十一节 脑缺血性损伤后蛋白激酶B活性的变化 854
第十二节 血脑屏障通透性的测定 861
第三十一章 阿尔茨海默病 870
第一节 概述 870
第二节 阿尔茨海默病的发病机制 870
第三节 阿尔茨海默病的动物模型 872
第四节 APP转基因模型 872
第五节 痴呆症模型：老年大鼠的延缓交替作业 874
第六节 中隔核损伤大鼠的空间分辨水迷宫实验 875
第七节 环境富集的动物模型 877
第八节 β-淀粉样蛋白的ELISA定量分析 878
第九节 β-淀粉样蛋白的Western blot检测及刚果红染色 880
第十节 体外培养神经细胞Aβ损伤模型 883
第十一节 胆碱酯酶活性的测定 884
第十二节 组织培养细胞中序列特异性、抑制剂及备选β-分泌酶的研究 886
第十三节 早老素的蛋白水解研究 888
第十四节 Tau蛋白磷酸化的测定 891
第十五节 在体细胞的BrdU标记 896
第十六节 阿尔茨海默病的治疗进展 897
第三十二章 帕金森病 902
第一节 基因学研究——α-synuclein基因的点突变 902
第二节 分子病理学研究 905
第三节 基底核功能的分子学研究 923
第四节 帕金森病的病理模型 938
第五节 帕金森病的分子治疗 943
第三十三章 焦虑症的动物实验方法 952
第一节 概述 952
第二节 冲突实验 954
第三节 探究实验 957
第四节 群体实验 960
第五节 抗天敌实验——防御行为 962
第六节 小鼠期待性焦虑实验 969
第三十四章 抑郁症的研究方法 972
第一节 概述 972
第二节 强迫游泳实验 973
第三节 小鼠悬尾实验 975
第四节 差式低速率强化程序 976
第五节 获得性无助实验 978
第六节 嗅球切除 980
第七节 慢性温和应激 982
第七篇 神经内分泌学 987
第三十五章 肥胖与减肥的神经科学研究方法 987
第一节 概述 987
第二节 肥胖的现代研究 987
第三节 能量平衡的研究 989
第四节 肥胖研究中常用的啮齿类动物模型 990
第五节 测量动物摄食量的基本方法 994
第六节 大分子营养物质选择实验 996
第三十六章 松果腺与生物节律 1002
第一节 大鼠松果腺的组织培养和细胞培养 1002
第二节 生物样品中褪黑素含量的测定 1005
第三节 松果腺中褪黑素合成酶的活性与表达水平的检测 1015
第四节 大鼠松果腺中14-3-3蛋白各亚型的mRNA水平及蛋白相对含量的测定 1020
第五节 褪黑素受体的表达水平和动力学参数测定 1030
第六节 参与调控生物节律的有关基因及其蛋白在松果腺中的细胞定位 1038
第七节 基因敲除小鼠的基因型判定 1043
附录 英汉神经科学名词 1049