实验1基因组DNA的提取 1
实验1.1植物基因组DNA的提取 2
实验1.2动物基因组DNA的提取 3
实验1.3细菌基因组DNA的提取 4
实验1.4酵母菌基因组DNA的提取 5
实验2总RNA和mRNA的提取 8
实验2.1 Trizol法提取总RNA 9
实验2.2异硫氰酸胍/酚一步法提取总RNA 10
实验2.3总RNA提取试剂盒 11
实验2.4 mRNA的分离纯化 12
实验3质粒DNA的提取 15
实验3.1碱裂解法少量提取质粒DNA 17
实验3.2少量质粒提取试剂盒 19
实验4目的基因的获得 21
实验4.1 PCR扩增 26
实验4.2反转录PCR 27
实验5限制性内切酶的酶切反应 30
实验5.1 pUC18/19质粒DNA的EcoRI单酶解 32
实验5.2 Hind ⅢⅢ和Sal I对pUC18/19质粒DNA的双酶切 33
实验6凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化 35
实验7 DNA片段的体外连接 37
实验8大肠杆菌感受态细胞的制备 40
实验9重组子的转化 42
实验10菌落PCR筛选阳性重组子 45
实验11重组质粒的酶切鉴定 47
实验12外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 49
实验13基因表达产物的检测分析：SDS-PAGE 53
实验14 Western Blotting（蛋白免疫印记）实验 59
实验15 Southern印迹实验 63
实验16全长cDNA文库的构建 68
实验17凝胶阻滞实验 78
实验18染色质免疫共沉淀技术 82
参考文献 87
附录一 基因工程实验中的常用数据和换算关系 89
附录二 基因工程实验常用试剂、溶液和缓冲液 92
附录三PCR实验引物设计原则 95