第一篇 神经干细胞基础 3
第一章 概述 3
一、神经干细胞基础研究进展 4
二、神经干细胞基础研究展望 8
第二章 神经干细胞特性 11
第一节 神经干细胞的生物学特性 11
一、神经干细胞的基本特性 11
二、两种分裂方式 13
三、神经干细胞的标志 13
四、对损伤和疾病的反应能力 14
五、迁移功能和良好的组织融合性 14
六、低免疫原性 15
第二节 神经干细胞的识别与鉴定 15
一、神经干细胞的识别 15
二、神经干细胞的鉴定 15
第三章 神经干细胞来源和定位 18
第一节 神经干细胞的来源 18
一、胚胎组织来源 18
二、成体组织来源 19
三、神经嵴细胞 19
四、其他来源 20
第二节 神经干细胞的定位 21
一、侧脑室周围组织中的神经干细胞 21
二、海马组织中的神经干细胞 23
三、其他脑组织中的神经干细胞 23
第四章 神经干细胞的发育及分化 25
第一节 神经干细胞增殖与迁移 25
一、神经发生过程中的神经干细胞 25
二、神经干细胞的增殖 25
三、神经干细胞的迁移 26
第二节 神经干细胞分化及分化特性 28
一、神经干细胞的可塑性 28
二、神经干细胞的定向分化 28
三、神经干细胞的横向分化 29
四、神经干细胞的逆分化 30
五、体外培养体系中神经干细胞的分化 30
六、在体神经干细胞的分化 31
第三节 神经干细胞分化影响因素 33
一、影响神经干细胞分化的内在因素 33
二、影响神经干细胞分化的外在因素 33
三、神经干细胞分化研究中存在的问题 40
第五章 神经干细胞的信号转导 42
第一节 基本概念 42
一、细胞信号分子 42
二、信号转导系统的基本组成 43
第二节 膜表面受体介导的信号转导 46
一、离子通道型受体 46
二、G蛋白偶联型受体 46
三、Ras-Raf-MAPK信号途径 49
四、转化生长因子β(TGF-β)通路 52
五、细胞因子受体超家族 54
六、可控性蛋白降解与信号转导 56
七、bHLH基因 65
八、同源盒基因 66
第六章 神经干细胞培养 69
第一节 神经干细胞培养的实验室条件与培养用液 69
一、实验室设置及主要设备 69
二、培养器皿 72
三、培养用品的清洗与消毒灭菌 73
四、培养用液 78
五、特殊添加剂 82
第二节 神经干细胞培养方法及建系 83
一、原代培养及传代 83
二、神经干细胞纯化与建系 85
第三节 培养神经干细胞的观察与鉴定 88
一、培养神经干细胞的观察 88
二、培养神经干细胞的鉴定 92
第四节 培养神经干细胞的冻存、运输与复苏 92
一、冻存 92
二、运输 94
三、复苏 94
第五节 特殊类型神经干细胞的培养 95
一、大鼠神经嵴细胞培养 95
二、大鼠大脑皮质神经干细胞培养 96
三、大鼠海马神经干细胞培养 96
四、大鼠纹状体神经干细胞培养 97
五、大鼠脊髓神经干细胞培养 98
六、大鼠中脑神经干细胞培养 98
七、大鼠视网膜神经干细胞培养 99
八、人胚大脑皮质神经干细胞培养 99
九、人胚海马神经干细胞培养 100
十、人胚室管膜神经干细胞培养 100
十一、成人嗅球神经干细胞培养 101
十二、神经干细胞培养的应用 101
第二篇 神经干细胞应用 107
第七章 概述 107
一、神经干细胞的特性与应用 107
二、神经干细胞应用基础研究进展 109
三、神经干细胞应用基础研究中的问题与展望 112
第八章 神经干细胞移植 117
第一节 用于神经系统疾病治疗的细胞来源 117
一、肾上腺髓质移植物 117
二、自体颈上交感神经节移植物 117
三、胎儿黑质移植物 118
四、胚胎小脑移植物 118
五、胚胎垂体移植物 118
六、胚胎大脑组织移植物 119
七、神经干细胞 119
八、骨髓基质细胞源性神经干细胞 121
九、胚胎干细胞 121
十、基因修饰细胞 122
第二节 成功移植神经干细胞的影响因素 123
一、供体年龄和受体年龄 123
二、细胞活力和数量 124
三、移植部位 124
四、移植方法 125
五、移植部位血供 126
六、病灶微环境 126
七、损伤 127
八、免疫因素 127
九、体外预分化 128
第九章 骨髓、脐血及其他来源的神经前体细胞 130
第一节 骨髓和脐血中神经前体细胞的分离培养 130
一、骨髓中神经前体细胞的分离培养 131
二、脐血中神经前体细胞的分离培养 133
第二节 骨髓和脐血中神经前体细胞的分化 134
一、横向分化 134
二、骨髓神经前体细胞分化 135
三、人脐血神经前体细胞分化 141
第三节 骨髓和脐血中神经前体细胞治疗神经系统疾病的实验研究 142
一、骨髓神经前体细胞在神经系统疾病动物模型中的应用 142
二、人脐血神经前体细胞在神经系统疾病动物模型中的应用 145
三、血管途径细胞移植 146
四、基因治疗 149
第四节 其他来源的神经前体细胞 149
一、脂肪干细胞 149
二、胎盘来源的干细胞 151
三、羊膜上皮来源的干细胞 151
第十章 神经干细胞在体内的转归和整合 153
第一节 神经干细胞在体内整合的基础 153
一、脑内存在促进神经干细胞存活、分化的微环境 153
二、神经干细胞的低免疫原性 153
三、可以分化为成熟的神经细胞 154
第二节 神经干细胞在体内转归和整合的过程 155
一、神经干细胞在未成熟中枢神经系统中的转归和整合 155
二、神经干细胞在成熟中枢神经系统中的转归和整合 155
三、神经干细胞在体内分化为成熟的神经元 156
四、神经干细胞在病变动物脑中的转归和整合 157
五、神经干细胞在神经系统肿瘤组织中的转归和整合 157
第三节 影响神经干细胞在体内转归和整合的因素 158
一、神经干细胞的来源不同 158
二、移植物的存活 159
三、细胞的微环境 159
四、血管再生对神经干细胞的影响 160
第十一章 神经干细胞的临床应用 163
第一节 神经干细胞在阿尔茨海默病治疗中的应用 164
一、概述 164
二、阿尔茨海默病神经干细胞移植治疗的可行性和途径 165
第二节 神经干细胞在帕金森病治疗中的应用 167
一、概述 167
二、帕金森病神经干细胞移植治疗的可行性 169
三、问题与展望 173
第三节 神经干细胞在癫癎治疗中的应用 174
一、概述 174
二、癫癎治疗中的神经干细胞移植 175
三、以神经干细胞为载体的基因治疗 178
第四节 神经干细胞在脑血管病治疗中的应用 181
一、概述 181
二、神经干细胞治疗脑血管病的可行性 182
三、神经干细胞治疗脑血管病的方法与途径 183
第五节 神经干细胞在脊髓损伤治疗中的应用 187
一、概述 187
二、脊髓损伤细胞移植治疗现状 188
三、神经干细胞移植在脊髓损伤治疗中的应用 190
四、存在问题 191
第六节 神经干细胞在脑外伤治疗中的应用 192
一、概述 192
二、神经干细胞移植治疗脑外伤的可行性 193
三、神经干细胞移植治疗脑外伤现状 194
第三篇 神经干细胞研究工作中相关的实验方法 207
第十二章 神经干细胞研究中相关的实验技术 207
第一节 电镜技术 207
一、电镜简介 207
二、电镜的结构与功能 207
三、电镜标本制作技术 208
四、神经干细胞的超微结构 213
第二节 免疫细胞化学法 213
一、免疫荧光法 213
二、酶标记抗体法 215
三、非标记抗体过氧化物酶-抗过氧化物酶法(PAP法) 217
四、抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合体法(ABC法) 220
第三节 培养细胞的转染技术 223
一、磷酸钙介导法 224
二、脂质介导法 227
三、电穿孔转染法 229
四、显微注射法 230
五、病毒转染法 231
第四节 膜片钳技术 234
一、膜片钳技术的原理 234
二、膜片钳法的各种模式 234
三、膜片钳技术的基本操作步骤 236
第五节 激光共聚焦显微镜技术 240
一、激光共聚焦显微镜的工作原理、基本结构及功能 240
二、激光共聚焦显微镜在生物医学及神经干细胞研究中的应用 243
第六节 流式细胞仪技术 244
一、流式细胞仪的结构和工作原理 244
二、流式细胞仪的调试和使用 245
三、样品制备 246
四、流式细胞仪在神经干细胞研究中的应用 247
第七节 RNA干扰技术 248
一、RNAi的技术特点 249
二、RNAi的分子机制 250
三、RNAi试验基本过程 251
四、RNAi的应用前景 253
第十三章 神经干细胞研究中常用的动物模型 258
第一节 脑缺血动物模型 258
一、大鼠全脑缺血模型的建立 258
二、大鼠局灶性脑缺血模型的建立 258
第二节 癫癎动物模型 260
一、点燃模型 260
二、海人酸模型 261
三、匹罗卡品模型 262
四、遗传性癫癎动物模型 262
五、其他的癫癎动物模型 262
第三节 Alzheimer病动物模型 263
一、毁损模型 263
二、转基因动物模型 264
三、衰老动物模型 265
四、自身免疫性痴呆模型 265
五、铝诱导痴呆模型 266
第四节 帕金森病动物模型 266
一、6-羟基多巴胺(6-OHDA)模型 266
二、MPTP模型 267
附录 信号转导中常用缩略词和英文全称 270