第一章 DNA的化学合成方法 1
第一节 DNA合成的化学原理 2
第二节 保护脱氧核糖核苷的制备 30
第二章 DNA合成仪的原理及使用 44
第一节 硬件系统概述 44
第二节 自动DNA合成仪的操作要点 58
第三节 ABI 3948 DNA合成与纯化系统 70
第三章 合成寡核苷酸的分离和评价 110
第一节 粗产品的分析 112
第二节 DNA的PAGE分析及纯化 124
第三节 高效液相色谱法(HPLC)分析和纯化寡核苷酸 145
第四节 寡核苷酸纯化柱芯 163
第五节 微量凝胶毛细管电泳分析寡核苷酸 172
第六节 DNA纯化与分析的其他常用方法 191
第四章 非放射性核酸探针分析方法基础 202
第一节 从植物中分离DNA 203
第二节 从动物细胞中分离高分子量DNA 209
第三节 限制酶消化、凝胶电泳及DNA的真空印迹 216
第四节 植物RNA的分离 227
第五节 从动物细胞中分离总的和Po?yA+RNA 231
第六节 凝胶印迹 237
第七节 RNA点印迹 242
第五章 核酸探针的制备 246
第一节 分离质粒制备探针 246
第二节 用地高辛修饰的核苷酸通过PCR制备杂交探针 253
第三节 随机六核苷酸引发地高辛修饰的核苷酸制备DNA杂交探针 257
第四节 多位点和单位点DNA小卫星探针RNA转录物的地高辛标记 260
第五节 用生物素标记双链DNA探针 264
第六节 辣根过氧化物酶标记探针的制备 270
第七节 用荧光素-11-dUTP随机引发标记DNA探针 273
第八节 用荧光素标记寡核苷酸 280
第六章 核酸探针的杂交及检测 284
第一节 地高辛标记探针的Southern印迹杂交及化学发光检测 284
第二节 地高辛标记的RNA小卫星探针的Southern印迹杂交及染色测定 289
第三节 RNA印迹上地高辛探针的杂交和检测 296
第四节 辣根过氧化物酶标记探针的杂交及增强化学发光检测 301
第五节 荧光素标记的DNA探针的杂交及其增强的化学发光检测 307
第六节 荧光素标记寡核苷酸探针的杂交及其增强的化学发光检测 313
第七章 核酸探针的应用 320
第一节 根尖分生组织切段染色体扩展物的制备及其与生物素标记探针的原位杂交 320
第二节 植物材料酶处理扩展染色体的原位杂交 322
第三节 生物素标记的探针在植物染色体上的应用 329
第四节 荧光色素标记的DNA探针与染色体的直接荧光原位杂交 334
第五节 与植物染色体原位杂交的地高辛标记DNA探针的检测 343
第六节 mRNA杂交的组织切片及玻片的制备 350
第七节 地高辛标记探针检测组织切片中的mRNA 355
第八节 用地高辛核糖探针检测整体鼠胚胎的mRNA 362
第九节 用DNA探针和探测杆检测食物中的病原体 369
第八章 核酸探针的新进展 377
第一节 PACE(探针检测-增强化学发光技术) 377
第二节 反转点印迹法 385
第三节 RAPD分析——一种新的基因诊断技术 396
第四节 非放射性寡核苷酸探针检测连接酶链反应产物 401
附录1 本书中应用的缩写及中英文对照 419
附录2 常用度量单位 422