第一章 核酸体外扩增技术的发展 1
第二章 PCR基本技术 5
第一节 PCR的原理与操作 5
第二节 PCR条件的优化 7
第三节 PCR引物的设计 15
第四节 耐热DNA聚合酶 23
第五节 PCR污染的对策 28
第六节 PCR标本的制备 31
第七节 PCR扩增产物的分析法 39
第八节 引物的5＇端修饰法 50
第九节 探针的PCR标记法 56
第十节 碱基替代PCR 59
第十一节 基因组DNA的扩增 61
第十二节 RNA的扩增 63
第十三节 古DNA的扩增 65
第十四节 未知序列的扩增 68
第十五节 简并引物与应用 79
第十六节 用不对称PCR产生单链DNA 83
第十七节 PCR相关技术 86
第三章 其他核酸体外扩增技术 91
第一节 转录依赖的扩增系统 91
第二节 自主序列复制系统 94
第三节 链替代扩增反应 95
第四节 连接酶链反应 98
第五节 Qβ复制酶系统 100
第六节 循环探针反应 103
第四章 PCR技术在分子生物学研究中的应用 106
第一节 PCR克隆技术 106
第二节 PCR直接测序技术 113
第三节 定量PCR 125
第四节 PCR体外定点突变技术 134
第五节 突变的分子水平分析 139
第六节 cDNA文库的构建与筛选 143
第七节 用PCR构建载体 146
第八节 用源重组子检测与PCR赝物 147
第九节 DNasel足迹分析 151
第十节 PCR模板的体外转录 153
第十一节 PCR在染色体区带特异性克隆中的应用 155
第十二节 PCR-SSCP在基因分析中的应用 160
第五章 PCR在医学细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和寄生虫检测中的应用 163
第一节 用PCR直接检测标本中的大肠杆菌 163
第二节 用PCR检测痢疾和侵袭性大肠杆菌 167
第三节 用PCR检测沙门菌属杆菌 171
第四节 小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌的PCR检测法 172
第五节 用PCR检测霍乱弧菌CT操纵子 173
第六节 创伤弧菌的PCR扩增检测法 174
第七节 用PCR法检测荧光素酶基因和制备发光菌种特异性杂交探针 176
第八节 用PCR检测嗜水气单胞菌的aer基因 178
第九节 用PCR结合DNA探针检测杀鲑气单胞菌 180
第十节 用PCR快速诊断脑膜炎双球菌 181
第十一节 PCR在不同血清型脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白1的比较研究中的应用 182
第十二节 淋球菌的PCR检测 185
第十三节 PCR在金黄色葡萄球菌各种毒素检测中的应用 190
第十四节 用PCR检测凝固酶阴性耐甲氧西林葡萄球菌 193
第十五节 用PCR检测绿脓杆菌 195
第十六节 用PCR检测肺炎杆菌 196
第十七节 用PCR检测水中存活的嗜肺军团杆菌 198
第十八节 用PCR直接检测支气管灌洗液中的军团菌 201
第十九节 布鲁菌的PCR检测方法 203
第二十节 单核增生李斯特菌的PCR检测 206
第二十一节 结核杆菌的PCR检测 211
第二十二节 麻风杆菌的PCR检测 215
第二十三节 用PCR检测副结核杆菌 217
第二十四节 用PCR检测炭疽杆菌芽胞 220
第二十五节 用PCR预测苏云金杆菌杀虫因子活性 221
第二十六节 用PCR检测幽门螺杆菌 224
第二十七节 PCR在区别不同莫拉菌纤毛基因倒位区序列中的应用 226
第二十八节 PCR在艰难梭菌研究中的应用 229
第二十九节 据16S rDNA PCR产物的限制性酶切位点差异对梭状芽孢杆菌分类 231
第三十节 用PCR特异检测B型肉毒杆菌 232
第三十一节 PCR在拟杆菌研究中的应用 233
第三十二节 用PCR结合特异的DNA探针鉴定嗜常温乳酸细菌 235
第三十三节 用PCR-RFLP鉴定乳腺链球菌与副乳腺链球菌 236
第三十四节 用PCR检测胸膜肺炎放线杆菌 237
第三十五节 PCR在莱姆病研究中的应用 238
第三十六节 用PCR检测临床标本中的钩端螺旋体 242
第三十七节 用PCR检测梅毒螺旋体 244
第三十八节 肺炎支原体的PCR检测 249
第三十九节 用PCR鉴定肺炎支原体和生殖器支原体 252
第四十节 用PCR从脓毒性关节炎病人的标本中检测解脲脲原体 254
第四十一节 用PCR检测发酵支原体 255
第四十二节 用PCR检测衣原体DNA 256
第四十三节 两步PCR检测和鉴别鹦鹉热衣原体菌株 258
第四十四节 用PCR直接检测印度客蚤体内的莫氏立克次体 261
第四十五节 用PCR诊断流行性斑疹伤寒 264
第四十六节 用PCR检测恙虫病立克次体 266
第四十七节 用PCR检测洛矶山斑点热临床标本 267
第四十八节 PCR在Q热立克次体检测及鉴定中的应用 269
第四十九节 用PCR检测感染马标本中的埃里希体 273
第五十节 用PCR检测人埃氏菌病的致病因子 274
第五十一节 PCR在弗兰克菌遗传种系亲缘关系研究中的应用 276
第五十二节 用PCR检测临床标本中的疟原虫 278
第五十三节 用PCR检测致病性阿米巴 280
第五十四节 用PCR检测鼠弓形虫 282
第五十五节 卡氏肺孢子虫肺炎的PCR诊断 284
第五十六节 用PCR检测利什曼原虫 286
第五十七节 用PCR检测锥虫 288
第六章 病毒学 291
第一节 应用通用引物PCR方法检测生殖道人乳头瘤病毒 291
第二节 人类巨细胞病毒的PCR检测 296
第三节 用PCR分型检测单纯疱疹病毒 300
第四节 用套式PCR检测单纯疱疹病毒 304
第五节 用PCR-EC分型检测疱疹病毒 306
第六节 用RAN-PCR检测单纯疱疹病毒 308
第七节 EB病毒基因组的PCR检测 310
第八节 水痘-带状疱疹病毒的PCR检测 314
第九节 用PCR检测人B19病毒 316
第十节 PCR在婴幼儿腺病毒性腹泻检测中的应用 319
第十一节 乙型肝炎病毒的PCR检测 322
第十二节 丙型肝炎病毒的PCR检测 327
第十三节 丙型肝炎病毒的RT/PCR诊断 334
第十四节 人粪便标本中戊型肝炎病毒的RT/PCR直接检测 336
第十五节 PCR在人类免疫缺陷病毒中的应用 339
第十六节 用PCR检测人血标本中HTLV前病毒序列 352
第十七节 PCR在黄病毒检测和研究中的应用 355
第十八节 风疹病毒的PCR检测 360
第十九节 人细小RNA病毒基因组的PCR扩增 362
第二十节 PCR在流行性出血热研究中的应用 367
第二十一节 PCR应用于粪便标本中轮状病毒的检测 368
第二十二节 用PCR检测蓝舌病毒 370
第二十三节 PCR在新病毒鉴定中的应用 373
第七章 PCR技术在遗传病基因分析及诊断中的应用 378
第一节 地中海贫血的基因诊断 378
第二节 苯丙酮尿症 381
第三节 杜氏/贝氏进行性肌营养不良 385
第四节 血友病 392
第五节 性别发育异常 397
第六节 脆-X综合征 401
第七节 α1抗胰蛋白酶缺陷症 403
第八节 马凡综合征 406
第九节 PCR技术在线粒体病诊断中的应用 407
第八章 PCR在白血病检测中的应用 417
第一节 用PCR检测白血病时T细胞受体β链基因重排 417
第二节 用PCR检测白血病时TCRγ链基因重排 419
第三节 用PCR检测白血病时TCRδ链基因重排 422
第四节 用PCR检测白血病时免疫球蛋白重链基因CDR-Ⅲ序列重排 424
第五节 用PCR检测白血病时免疫球蛋白重链基因重排 426
第六节 用PCR检测白血病时t(1;19)(q23;p13)染色体易位产生的E2A/PBX 1融合mRNA 427
第七节 用PCR检测白血病时t(10;14)(q24;q11)染色体易位 429
第八节 用PCR检测B细胞肿瘤时t(14;18)染色体易位 430
第九节 用PCR检测白血病时bcr-abl融合基因的mRNA序列 432
第十节 用PCR检测白血病时ras癌基因突变 433
第十一节 用PCR检测人类T淋巴细胞白血病病毒 438
第十二节 用PCR检测AML和MDS人FMS基因突变 440
第十三节 用PCR检测急性早幼粒细胞白血病RARα/myl融合基因的mRNA序列 442
第十四节 用PCR-RFLP法测定ras突变 443
第十五节 用PCR检测急性白血病p53基因突变 444
第一节 骨髓移植与HLA 446
第九章 PCR在骨髓移植HLA-D位点配型中的应用 446
第二节 用PCR/SSOPH法进行骨髓移植HLA-D位点配型 447
第三节 PCR/SSOPH反向杂交在骨髓移植配型中的应用 450
第四节 用PCR-指纹图法进行骨髓移植HLA-DRβ快速配型 453
第十章 PCR技术在法庭科学中的应用 454
第一节 法医学生物样品中DNA的制备 454
第二节 PCR在HLA-DQα分型中的应用 458
第三节 载脂蛋白B(Apo B)基因高变区的扩增及其在法庭科学中的应用 461
第四节 随机引物在DNA扩增及多态性分析中的应用 462
第五节 基因组中简单重复DNA序列多态性在法医学斑迹检验中的应用 464
第六节 小卫星重组编码序列在DNA多态性分析中的应用 467
第七节 等位基因特异的DNA扩增技术在性交混合分泌物分析中的应用 472
第八节 人类SRY基因的检测及其在法庭科学性别鉴定中的应用 475
第九节 用PCR技术扩增DYZ1 DNA进行性别鉴定 476
第十一章 PCR在组织与群体生物学研究中的应用 479
第一节 PCR在生物分类学中的应用 479
第二节 PCR在群体生物学中的应用 482
第三节 PCR在动物保护中的应用 483
第四节 PCR在生态学研究中的应用 484
第十二章 PCR在植物学中的应用 486
第一节 PCR在大麦黄矮病毒外壳蛋白基因克隆中的应用 486
第二节 PCR在大麦黄矮病毒基因序列分析中的应用 488
第三节 用PCR检测蚜虫中的大麦黄矮病毒 491
第四节 用PCR检测大麦黄矮病毒组中的病毒 493
第五节 用PCR检测甜菜西方黄化病毒 495
第六节 用PCR检测菜豆黄色花叶病毒 497
第七节 用PCR检测李痘病毒 499
第八节 用简并引物PCR法鉴定马铃薯Y组病毒 501
第九节 用PCR检测和鉴定玉米条斑及相关双联病毒 503
第十节 RCR用于黄瓜花叶病毒RNA体外转录的侵染性研究 506
第十一节 PCR在类病毒检测中的应用 509
第十二节 PCR在土传真菌病害检测中的应用 513
第十三节 用PCR构建cDNA基因文库研究线虫侵染的植物根基因的表达 515
第十四节 用PCR和含有脱氧肌苷简并引物研究蕃茄中抗根节线虫的分子标记酸性磷酸酶 518
第十五节 用反向PCR快速估计转基因植物在转化早期的T-DNA复制数 521
第十六节 用PCR鉴定玉米叶绿体tRNA的加工中间产物和剪接位点 523