第一章 放射性核素示踪技术 1
第一节 放射性示踪剂标记技术 1
一、生物医学常用放射性核素 1
二、示踪剂 2
三、放射性核素标记基本技术 3
四、蛋白质、多肽的放射性碘标记技术 9
五、核苷和核苷酸标记技术 14
第二节 放射性核素示踪测量技术 18
一、放射性样品测量类型 19
二、γ闪烁测量技术 20
三、液体闪烁测量技术 23
四、契伦科夫辐射测量 27
五、双标记及多标记测量方法 28
第三节 放射性核素示踪方法 29
一、概述 29
二、核素稀释法 33
三、物质转化的示踪方法 35
四、细胞学中的示踪方法 37
第四节 药物动力学示踪技术 42
一、药物动力学的基本理论 42
二、药物动力学示踪技术的基本类型与要求 46
三、药物动力学示踪分析举例 48
第五节 放射自显影术 61
一、放射自显影术的原理 61
二、放射自显影的方法 62
三、放射自显影的特点 66
四、放射自显影的分类 67
第六节 放射免疫分析技术 69
一、基本原理 69
二、基本技术及其进展 71
第七节 免疫放射分析技术 75
一、基本原理 75
二、IRMA法分类 76
三、IRMA法基本技术及其进展 78
第八节 受体的放射配体结合分析技术 81
一、基本原理 81
二、基本技术 82
三、数据处理 88
四、受体的判据 91
第九节 酶法放射分析和放射酶促分析法 93
一、基本原理 94
二、基本技术 96
第一节 免疫酶示踪技术的实验基础 99
一、示踪酶 99
第二章 免疫酶示踪技术 99
二、示踪酶的免疫标记 101
三、免疫酶制剂的质量鉴定 103
四、固相载体与固相化处理 104
五、免疫酶最适浓度的选择 105
六、底物及显色反应 105
七、检测结果的判断与分析 106
第二节 免疫酶显微示踪技术 107
一、基础方法的原理与流程 107
二、实际操作中的有关问题 109
三、光镜水平的应用与发展 111
四、电镜水平的应用与发展 112
第三节 免疫酶微量分析技术 116
一、技术原理与类型 116
二、固相酶标免疫测定 117
三、非固相酶标免疫测定 125
第四节 免疫酶标原位杂交技术 128
第五节 酶标免疫传感技术 129
第三章 生物素-亲合素系统示踪技术 131
第一节 生物素-亲合素系统及其特点 131
一、生物素研究趋势与进展 131
二、亲合素及其衍生物 131
一、生物素的活化及活性生物素结合物的制备 133
三、生物素-亲合素系统的特点 133
第二节 生物素、亲合素的制备纯化与标记技术 133
二、亲合素的提取、纯化与标记技术 136
第三节 生物素-亲合素系统的检测方法与原理 140
一、BAB法(或BRAB法) 140
二、LBA法(或BA法) 141
三、ABC法 142
四、影响生物素-亲合素系统检测敏感性的因素 146
第四节 生物素-亲合素系统的实际应用 147
一、抗体形成细胞的BA-Spot-ELISA检测法 147
二、BA微量ELISA法测定人血清IgE 149
三、放大生物素-亲合素免疫荧光技术(BA-IF)检测细胞表面标志 151
四、BAS双染双标记方法确定组织内酶定位的超微结构研究 152
五、亲合素-生物素乳凝试验检测病毒抗体 153
六、亲合素-葡萄球菌A蛋白ELISA法检测血清中日本脑炎病毒抗体 154
七、生物素-亲合素增强免疫斑点法检测甲型肝炎IgM 155
八、生物素标记Oligo探针-亲合素磁性球珠分离mRNA(Poly AT tractR mRNA分离系统) 156
九、人外周血单个核细胞IL-2Ra的检测 157
第四章 免疫荧光示踪技术 159
第一节 原理 159
第二节 常用荧光物质 159
一、异硫氰酸荧光黄 159
三、四甲基异硫氰基罗丹明 160
四、其他荧光物质 160
二、四乙基罗丹明 160
第三节 常用检测仪器 161
一、荧光显微镜 161
二、荧光显微镜附件的研究进展 162
三、流式细胞分析仪 163
四、荧光分光光度计 164
五、荧光偏振光分析仪(Abbott TDX 系统) 164
第四节 传统免疫荧光技术及其应用 164
一、免疫荧光抗体的制备 164
二、传统的免疫荧光技术 167
三、传统免疫荧光技术的应用 169
一、免疫荧光分析技术 171
第五节 现代免疫荧光技术及其应用 171
二、免疫荧光数学图像处理系统的应用 173
三、微球浓缩免疫荧光分析技术的应用-血清白色念珠菌抗体的检测 174
四、荧光测定酶免疫分析 175
五、荧光偏振免疫分析技术-检测体内药物浓度 176
六、底物标记荧光免疫分析-检测血清中的药物浓度 176
七、荧光素标记技术检测免疫细胞活性 177
八、免疫荧光分析技术检测细胞DNA 179
九、荧光原位杂交技术-快速诊断Down氏综合征 180
二、探针制备方法 182
一、原理 182
第一节 铁蛋白标记抗体法 182
第五章 重金属标记技术 182
三、免疫铁蛋白标记的染色法 183
第二节 胶体金标记技术 184
一、原理和优点 184
二、金探针的制备 185
三、胶体金探针的应用和前景 187
第六章 核酸标记与分子杂交技术 192
第一节 核酸探针制备 193
一、载体 194
二、重组DAN 200
三、核酸的纯化和分离 203
第二节 核酸标记 209
一、核酸标记示踪剂—放射性核素 210
二、缺口平移 211
三、随机引物标记 211
四、末端标记 212
五、多聚酶链反应(PCR)DNA标记法 213
六、36SdCTP 标记DNA-DNA测序 216
七、3H dNTP标记探针与染色体原位杂交 221
八、实验室中几种简便核酸标记检测法 222
九、核酸标记的注意事项 224
第三节 核酸分子杂交 224
一、核酸杂交原理和参数 225
二、液相杂交 226
三、固相杂交 231
第四节 人体基因探针及筛选 240
一、基因组探针及筛选 240
二、cDNA文库及探针筛选 243
三、显微切割探针库 249
四、限制性片段长度多态(RFLP)探针的筛选 251
第七章 稳定核素示踪技术 254
第一节 概述 254
一、生物医学中常用的稳定核素 254
二、稳定同位素标记物质的命名 255
三、同位素示踪技术常用的计算符号 256
第二节 稳定核素的富集和分离 257
一、基本理论 257
二、分离稳定核素的方法 260
第三节 稳定同位素标记化合物的制备 266
一、化学合成法 266
二、同位素交换法 268
三、中间体标记法 268
四、生物合成法 269
第四节 稳定核素及其标记化合物的分析测定 270
一、气相色谱—质谱联用法 270
二、核磁共振光谱法 281
三、红处分光光度法 287
第五节 稳定同位素在生物医学中的应用 289
一、概述 289
四、发射光谱分析法 294
二、稳定同位素稀释法 299
三、13CO2呼气试验 303
四、1?N尿试验 309
五、物质代谢转变的研究 312
六、稳定同位素体内示踪动力学研究 316
七、酶的活力测定 328
一、核酸分子的地高辛标记示踪技术 334
第一节 半抗原标记示踪技术 334
第八章 其他标记示踪技术 334
二、蛋白质分子的二硝基苯半抗原标记示踪技术 340
第二节 稀土元素示踪技术 342
一、基本原理 342
二、基本技术 344
三、TRFIA分析系统 346
四、分析中的注意事项 347
第三节 化学发光免疫法测定技术 347
一、基本原理 347
二、基本技术 350
三、化学发光免疫分析质量控制 356