第一章 多胺及其代谢酶类 1
一、多胺的生物合成与代谢 1
(一)多胺的生物合成 1
(二)多胺的分解代谢 3
二、酶在控制多胺合成中的作用 3
三、多胺的生物作用 5
(一)促进细胞生长发育 5
(二)影响核酸、蛋白质的合成 5
(三)人体组织和体液中的多胺水平 6
四、多胺作为肿瘤诊断和治疗的标志 7
(一)癌症病人体液的多胺水平 7
(二)多胺测定作为判定疗效和预后的标志 13
五、鸟氨酸脱羧酶与肿瘤 15
(一)鸟氨酸脱羧酶活性的诱导作用 16
(二)鸟氨酸脱羧酶促使肿瘤生成的作用机制 18
(三)鸟氨酸脱羧酶作为肝癌标记物 21
(四)鸟氨酸脱羧酶作为大肠肿瘤的标记物 23
六、5’-甲基硫代腺苷磷酸酶代谢的重要性 25
七、多胺生物合成抑制剂 28
(一)鸟氨酸脱羧酶抑制剂 28
(二)S-腺苷蛋氨酸脱羧酶抑制剂 33
(三)丙胺转移酶抑制剂 35
八、抗多胺合成抑制剂(抗酶抑制剂) 36
(一)鸟氨酸氨基甲酰转移酶测定法 37
九、多胺及其代谢酶的测定方法 37
(二)鸟氨酸脱羧酶活性测定法 39
(三)尿多胺层析-常压电泳测定法 42
(四)尿多胺的测定——试纸法 44
(五)尿多胺的高效液相色谱测定法 46
(六)血中多胺的高效液相色谱分析 48
(七)癌瘤组织多胺的测定法 49
(八)人血清精胺的放射免疫测定法 51
(九)血清精脒放射免疫测定法 53
第二章 活性氧及抗氧化酶 70
一、自由基的产生及其清除体系 70
(一)自由基产生途径 70
(二)机体的抗氧化防御体系 74
二、自由基代谢失衡与肿瘤发生 76
(一)肿瘤组织细胞中自由基存在的状况 76
(二)脂质过氧化与肿瘤 77
(三)化学致癌的自由基机制 80
三、超氧化物歧化酶与肿瘤 81
(一)超氧化物歧化酶 81
(二)异常转化细胞及实验动物肿瘤组织细胞的超氧化物歧化酶状态 83
(三)人体肿瘤组织细胞及肿瘤宿主血中的超氧化物歧化酶状态 84
四、过氧化氢酶与肿瘤 86
五、谷胱甘肽过氧化物酶及其他抗氧化酶与肿瘤 89
六、部分抗氧化酶活性及过氧化脂质测定方法 92
(一)超氧化物歧化酶活性测定法 92
(二)全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性测定法 93
(三)过氧化氢酶(CAT)活性测定法 97
(四)丙二醛(MDA)含量测定法 98
第三章 谷胱甘肽S-转移酶 109
一、理化性质 109
二、生理功能和分布 110
三、谷胱甘肽S-转移酶与肿瘤 112
(一)谷胱甘肽S-转移酶与肿瘤的发生及预防 112
(二)人类肿瘤组织中的谷胱甘肽S-转移酶表达 115
(三)谷胱甘肽S-转移酶与肿瘤多药耐药性 117
四、谷胱甘肽S-转移酶检测方法 123
(一)人胎盘谷胱甘肽S-转移酶的纯化 124
(二)抗血清的制备 124
(五)双抗体夹心型酶联免疫吸附测定血清/血浆GST-π含量 126
(三)抗体的纯化 126
(四)抗GST-π- IgG与辣根地氧化物酶(HRP)交联制备酶标抗体 126
(六)GST-π免疫组织化学染色法 128
第四章 酪氨酸蛋白激酶和酪氨酸蛋白磷酸酶 140
一、酪氨酸蛋白激酶 140
(一)酪氨酸蛋白激酶基本特性 141
(二)酪氨酸蛋白激酶与肿瘤 142
二、酪氨酸蛋白磷酸酶 149
(一)酪氨酸蛋白磷酸酶结构及生物学特性 150
(二)酪氨酸蛋白磷酸酶与肿瘤 152
三、检测方法 153
(三)抗体的纯化和标记 154
(一)原理 154
(二)抗血清的制备 154
(四)ELISA测定 156
第五章 O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶 168
一、O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶的生物学特性 168
(一)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶的功能及理化特性 168
(二)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶的结构和基因 170
(三)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶在正常组织中的分布 172
二、O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶与肿瘤 173
(一)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶在肿瘤细胞中的表达 173
(二)Mer+ 与肿瘤化疗的关系 174
(三)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶功能的去除 176
(四)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶与肿瘤易感性 178
三、检测方法 179
(一)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶蛋白溶液的制备 179
(二)O6-[3H]MeG DNA底物的制备 180
(三)O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶定量测定 180
(四)蛋白质定量测定(Lowry法,又名Folin-酚测定法) 181
第六章 烯醇化酶及其同工酶 196
一、烯醇化酶的分布及化学结构 196
二、神经元特异性烯醇化酶的生物学性质 197
三、神经元特异性烯醇化酶与肿瘤 198
(一)健康人血清和脑脊液的神经元特异性烯醇化酶水平 200
(二)原发性肺癌 201
(三)神经母细胞瘤 205
(四)神经内分泌肿瘤 206
(五)精原细胞瘤 207
(六)胺前体摄取脱羧细胞瘤 208
四、烯醇化酶及其同工酶测定方法 208
(一)直接分光光度法 209
(二)PK-LDH酶偶联速率法 210
(三)PK-HK-G6PD酶偶联速率法 212
(四)生物发光法 213
(五)琼脂糖凝胶电泳法 215
第七章 丙酮酸激酶 221
一、丙酮酸激酶的分布 221
二、理化特性 221
三、丙酮酸激酶与肿瘤 222
(一)丙酮酸激酶在化学诱癌过程中的变化 223
(二)丙酮酸激酶活性在肿瘤中的改变 223
(三)丙酮酸激酶同工酶谱改变的意义 226
四、检测方法 228
(一)丙酮酸激酶活性测定 228
(二)丙酮酸激酶同工酶测定 229
第八章 DNA聚合酶 235
一、概述 235
二、a-DNA聚合酶的分布及理化性质 237
三、a-DNA聚合酶的活性与肿瘤 239
四、血清DNA聚合酶活性测定的RIA法 241
一、α-L-岩藻糖苷酶的分布、理化性质及功能 246
第九章 α-L-岩藻糖苷酶 246
二、α-L-岩藻糖苷酶与原发性肝癌的相关性研究 247
三、原发性肝癌宿主血清α-L-岩藻糖苷酶升高的可能机制 249
四、血清α-L-岩藻糖苷酶活性测定方法 251
第十章 γ-谷氨酰转肽酶 254
一、γ-谷氨酰转肽酶的生理功能 255
二、γ-谷氨酰转肽酶的临床应用 257
三、γ-谷氨酰转肽酶与肿瘤 259
四、γ-谷氨酰转肽酶与肝癌的关系 260
(一)肝癌癌组织的γ-谷氨酰转肽酶实验研究 260
(二)血清γ-谷氨酰转肽酶的临床应用 261
(三)γ-谷氨酰转肽酶的变异体 264
(四)γ-谷氨酰转肽酶Ⅱ对肝癌的诊断价值 266
五、血清γ-谷氨酰转肽酶的测定方法 268
(一)国际临床化学学会推荐的测定法 268
(二)对氨基苯磺酸法 270
(三)γ-GT同工酶的聚丙烯酰胺阶段梯度凝胶电泳测定法 272
第十一章 醛缩酶 279
一、醛缩酶及其同工酶的分布 280
二、醛缩酶的化学组成和性质 283
三、醛缩酶的作用机理和生理功能 285
四、血清醛缩酶及其同工酶测定的临床意义 286
五、醛缩酶与肝癌关系的研究 291
六、醛缩酶及其同工酶的检测方法 293
(一)醛缩酶总活性测定 293
(二)醛缩酶同工酶的测定 297
第十二章 乳酸脱氢酶 302
一、乳酸脱氢酶同工酶的化学组成 302
二、乳酸脱氢酶同工酶在机体组织中的分布 304
三、乳酸脱氢酶同工酶的生理意义 307
四、乳酸脱氢酶同工酶与肿瘤 310
(一)正常细胞癌变时乳酸脱氢酶同工酶谱的返祖现象 310
(二)乳酸脱氢酶同工酶变化与糖代谢异常 311
五、乳酸脱氢酶同工酶的临床应用 312
(一)胃癌 313
(二)食管癌及贲门癌 318
(三)卵巢癌 321
(四)宫颈癌 322
(五)白血病 323
(六)肝癌 326
(七)脑瘤 328
(八)睾丸癌 330
(九)前列腺癌 330
(十)肺癌 331
(十一)其他恶性肿瘤 331
六、乳酸脱氢酶同工酶的测定方法 333
(一)聚丙烯酰胺凝胶电泳测定乳酸脱氢酶同工酶 335
(二)小柱层析法分离测定乳酸脱氢酶同工酶 337
(三)血清乳酸脱氢酶总活性测定 340
七、影响乳酸脱氢酶同工酶谱的因素 342
一、蛋白激酶C的组成与分布 351
第十三章 肿瘤化学防治的新靶点——蛋白激酶C 351
二、蛋白激酶C的结构特征 352
三、蛋白激酶C的活化机制 354
四、蛋白激酶C的抑制作用 356
五、蛋白激酶C的生理意义 357
六、蛋白激酶C与肿瘤发生 360
七、蛋白激酶C与抗肿瘤药物研究 363
(一)蛋白激酶C抑制剂的抗肿瘤作用 364
(二)蛋白激酶C与多药耐药性 365
八、蛋白激酶C的提取和活性测定方法 366
(一)蛋白激酶C的提取及部分纯化 367
(二)蛋白激酶C活性测定——同位素标记法 367
(三)蛋白激酶C活性测定——非同位素酶解测定法 369
第十四章 DNA拓扑异构酶与抗肿瘤药物研究 373
一、DNA拓扑异构酶的生化特性 373
(一)DNA拓扑异构酶Ⅰ 373
(二)DNA拓扑异构酶Ⅱ 375
二、DNA拓扑异构酶的生理意义 378
三、DNA拓扑异构酶与抗肿瘤药物 379
(一)DNA拓扑异构酶抑制剂 379
(二)DNA拓扑异构酶与抗药性的关系 383
(三)DNA拓扑异构酶与抗癌新药的研制展望 385
四、DNA拓扑异构酶及其抑制剂的有关实验研究方法 385
(一)DNA拓扑异构酶提取纯化方法 385
(二)DNA拓扑异构酶活性检测及其药物效应测试方法 386