第一章 绪论 1
1.1 酶与酶工程研究概况 1
1.1.1 酶与酶工程研究的重要意义 1
1.1.2 酶研究的历史与现状 3
1.1.3 酶工程简介 6
1.2 酶是生物催化剂 7
1.2.1 酶在生物体内的功能 8
1.2.2 酶在生物体内的分布 12
1.1.3 酶的作用特点 15
1.3 酶的分类命名 25
1.3.1 酶的分类命名原则 25
1.3.2 各类酶的主要特点 26
1.3.3 各类酶的分类和编号的简单说明 32
主要参考文献 40
2.1.1 酶蛋白结构 41
2.1 酶催化功能的结构基础 41
第二章 酶的作用原理 41
2.1.2 酶的活性部位 54
2.2 酶催化作用的方式和机制 73
2.2.1 酶的作用方式 73
2.2.2 酶催化作用专一性的学说 76
2.2.3 酶的催化机理 77
2.3 酶活性调节机制 83
2.3.1 共价调节 83
2.3.2 通过聚合(结合)解离进行的调节 87
2.3.3 别构调节 91
主要参考文献 99
第三章 酶的生产 100
3.1 酶的发酵生产 100
3.1.1 酶的来源 100
3.1.2 酶的生产菌 102
3.1.3 酶的发酵生产 104
3.2 酶的生物合成 109
3.2.1 酶基因表达的中心法则 110
3.2.2 操纵子模型 111
3.3 微生物酶产量的提高 115
3.3.1 诱导与阻遏 115
3.3.2 诱变育种 117
3.3.3 限制性内切酶 120
3.3.4 基因工程 128
3.4 酶分子的修饰(改造)与模拟 134
3.4.1 酶分子的修饰 134
3.4.2 酶分子的模拟 136
主要参考文献 139
第四章 酶的分离纯化 141
4.1 酶分离纯化前的预处理 142
4.1.1 酶的抽提 142
4.1.2 细胞破碎 143
4.1.3 酶液的浓缩 144
4.2 沉淀分离法 145
4.2.1 盐析法 146
4.2.2 有机溶剂沉淀法 147
4.2.3 其他沉淀法 151
4.3 层析分离法 152
4.3.1 离子交换层析 152
4.3.2 凝胶排阻层析 156
4.3.3 亲和层析 162
4.3.4 高压液相层析 164
4.4 电泳分离 167
4.4.1 凝胶电泳 168
4.4.1 等电聚焦电泳 169
4.5 酶的结晶 170
4.6 酶的纯度与回收率 172
主要参考文献 175
第五章 酶作用动力学 176
5.1 单底物酶促反应动力学 176
5.1.1 Michaelis-Menten快速平衡学说 177
5.1.2 Briggs-Haldane 稳态学说 178
5.1.3 米氏方程的讨论 180
5.1.4 米氏方程的表达形式——作图法求Km、Ｖm 185
5.2 双底物酶促反应动力学 188
5.2.1 顺序机制 188
5.2.2 乒乓机制 190
5.3 各种因素对酶促反应动力学的影响 191
5.3.1 pH对酶促反应速度的影响 191
5.3.2 温度对酶促反应速度的影响 194
5.3.3 抑制剂对酶促反应动力学的影响 196
5.3.4 底物与产物对酶反应的抑制 201
5.3.5 金属离子的影响 202
5.3.5 酶的变性因素 202
主要参考文献 203
6.1 酶活力测定 205
章六章 酶分析法 205
6.1.1 测定原理 206
6.1.2 反应条件 206
6.1.3 测定方法 209
6.1.4 测定 213
6.2 酶法分析 215
6.2.1 酶法分析的基本方法 215
6.2.2 酶法分析的几个问题 216
6.2.3 酶标免疫分析 218
6.3 酶电极 225
6.3.1 酶电极的结构与原理 225
6.3.2 酶电极的制备和性能 229
6.3.3 酶电极的应用 237
主要参考文献 237
第七章 酶与细胞的固定化 239
7.1 酶应用的重要突破 240
7.1.1 固定化酶(细胞)的由来与发展 240
7.1.2 固定化酶的定义 241
7.2 固定化酶(细胞)的制备方法 243
7.2.1 固定化酶的制备 243
7.2.1 固定化细胞的制备 258
7.3 固定化酶(细胞)的性质 260
7.3.1 影响固定化酶(细胞)性质的因素 262
7.3.2 固定化酶(细胞)的性质 265
7.3.3 评价固定化酶(细胞)的指标 269
7.4 固定化对酶促反应动力学的影响 271
7.4.1 外扩散限制 271
7.4.2 内扩散限制 276
7.4.3 外扩散与内扩散的联合作用 278
7.5 固定化酶反应器 280
7.5.1 各种酶反应器的特点 281
7.5.2 固定化酶反应器的选择 285
主要参考文献 287
8.1.1 酶在食品工业中的应用 288
8.1 酶在生产实践中的应用 288
第八章 酶与固定化酶的应用 288
8.1.2 酶在轻化工业中的应用 292
8.1.3 酶在氨基酸、有机酸生产方面的应用 295
8.1.4 酶在医学方面的应用 300
8.2 固定化酶(细胞)的应用 303
8.2.1 工业应用 303
8.2.2 医疗方面的应用 308
8.2.3 诊断、分析方面的应用 310
8.2.4 环境保护方面的应用 312
8.3 几种工业常用酶 313
8.3.1 蛋白酶 314
8.3.2 淀粉酶 319
8.3.3 纤维素酶 325
8.3.4 葡萄糖氧化酶 328
8.3.5 青霉素酰化酶 330
主要参考文献 333