一、层析技术简介 1
二、层析技术分类 4
1．两相物质在层析全过程中所处的生物物理状态 4
2．层析表现形式 4
3．层析载体内容 5
4．技术形式及理化性质 5
三、层析技术应用 10
（一）凝胶层析技术 10
1．免疫球蛋白G（IgG）的纯化与制备 15
2．肌红蛋白的纯化与制备 19
3．酶标记体（IgG）的纯化与制备 22
戊二醛标记二步法与检测 23
过碘酸氧化法与检测 26
4．IgM类MoAb的纯化与制备 28
Sephadex凝胶层析技术 28
Sepharose凝胶层析技术 30
5．蓖麻毒蛋白-A链的纯化与制备 32
6．细胞色素-C的纯化与制备 34
7．胰岛素的纯化与制备 36
8．分泌型IgA的分离与制备 37
9．核酸（RNA）的纯化 39
10．胶体金标记单克隆抗体的纯化 40
11．蛋白质分子量测定 43
（二）离子交换树脂层析技术 46
1．硫胺素（维生素B1）的提取 48
2．核黄素的分离与提取 51
3．碱性氨基酸的分离 53
4．核苷酸的分离 55
5．单核苷酸的分离 57
6．肽的制备性分离 61
7．食物中胡萝卜素的分离与测定 65
8．胆红素的分离与测定 69
（三）离子交换纤维素层析技术 73
1．蛇毒磷酯酶-A2的纯化 79
2．碱性磷酸酯酶的纯化 83
3．钩体属特异抗原的纯化 88
4．鸡卵类粘蛋白的纯化 91
5．免疫球蛋白M-Fc（IgM-Fc）重链的纯化 94
6．补体C3抗血清的纯化 97
7．血红蛋白肽链的纯化 102
8．干扰素的纯化 105
（四）离子交换-交联葡聚糖层析技术 108
1．输卵管AKP的纯化 110
2．乙型肝炎“e”抗体的纯化 113
3．羧肽酶-Y的纯化 116
4．鸽血清、组织AKP的纯化 120
5．IgG链、片段的纯化 121
6．IgE的分离与纯化 123
（五）亲和层析技术 125
1．胰蛋白酶的分离与纯化 126
2．蛇毒磷酯酶-A2的分离与纯化 131
3．葡萄球菌蛋白-A分离与纯化 134
4．人与哺乳动物的IgG亚类的分离与纯化 138
5．抗IgG抗体的分离与纯化 141
6．旋毛虫蚴虫α-杆细胞颗粒可溶性组份进一步分离与纯化 144
（六）纸层析技术 148
1．氨基酸的层析与检测 156
2．His的层析与检测 159
3．Arg的层析与检测 160
4．Pro与bydroxy-Pro的层析与检测 160
5．Trp的层析与检测 161
6．Tyr的层析与检测 162
7．Gly的层析与检测 162
8．Val、Gly、Leu共存时的层析与检测 162
9．微量蛋白质、肽或氨基酸的层析与检测 163
10．多种金属离子的层析与检测 164
11．Cu2SO 4、CuCl2和CuNO3的层析与检测 165
12．Mg2+、K+、Na+的层析与检测 166
13．糖类的层析与检测 166
14．糖果色素的层析与检测 168
（七）薄层层析技术 170
1．菌体细胞壁含糖物质的分离分析 171
2．混合性糖的分离与检测 175
3．食用色素的分离与检测 180
4．食物中黄曲霉毒素B1的分离与检测 184
5．3·4-苯并芘的分离与检测 187
6．亚硝胺类化合物的分离与检测 189
7．生物碱的分离与检测 192
8．雷公藤碱的分离与检测 193
9．苦楝素的分离与检测 194
10．矿物油的分离与检测 195
11．有机磷农药的分离与检测 195
12．有机氯农药的分离与检测 199
13．核苷酸的分离与分析 203
14．细胞膜磷酯的分离与分析 205
15．寡核苷酸的同系层析与分离 210
（八）聚酰胺薄膜层析技术 215
1．丹磺酰氯-氨基酸层析与鉴定 217
2．DNS-氨基酸膜板层析与鉴定 221
3．蛋白质N-末端层析与鉴定 224
4．DNP-氨基酸层析与鉴定 228
5．肽链顺序层析与鉴定 232
附录 238
1．装填Sephadex、Bio及Sepharose column，流速受到影响的原因及处理办法 238
2．影响分辨率的因素及解决办法 239
3．国内外各种层析载体、商品种类、物理特性、吸附剂及显色反应 240
4．各种氨基酸中、英文缩写及理化性质 265
5．常用冷却剂和干燥剂 268
主要参考文献 270