第一篇 常用生物化学实验技术及原理第一章 层析技术 2
第二章 电泳技术 11
第三章 光谱技术 23
第四章 离心技术 36
第五章 膜技术及其在生物化学中的应用 42
第六章 蛋白质的分离纯化和检测 46
第七章 蛋白质的分析技术 54
第八章 临床生物化学检验 64
第二篇 学生实验 80
第九章 糖类的化学 80
实验一 糖类的性质实验（一）——糖类的颜色反应 80
Ⅰ．α-萘酚反应（Molisch反应） 80
Ⅱ．间苯二酚反应（Seliwanoff反应） 81
实验二 糖类的性质实验（二）——糖类的还原作用 82
实验三 总糖的测定——蒽酮比色法 84
实验四 还原糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法 86
实验五 血糖的定量测定——GOD-PAP法 88
第十章 脂质的化学 92
实验六 粗脂肪的提取和定量测定 92
实验七 脂肪碘值的测定 93
实验八 血清胆固醇的测定 96
Ⅰ．化学比色法——磷硫铁法 96
Ⅱ．化学比色法——邻苯二甲醛法 98
Ⅲ．酶法 99
第十一章 蛋白质的化学 102
实验九 总氮量的测定——凯氏（Micro-Kjeldahl）定氮法 102
实验十 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 105
实验十一 蛋白质的性质实验（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应 107
Ⅰ．双缩脲反应 107
Ⅱ．茚三酮反应 109
Ⅲ．黄色反应 110
Ⅳ．考马斯亮蓝反应 112
实验十二 蛋白质的性质实验（二）——蛋白质等电点的测定和蛋白质的沉淀反应 113
Ⅰ．蛋白质等电点的测定 113
Ⅱ．蛋白质的沉淀与变性 115
Ⅲ．尿蛋白定性检验 118
实验十三 蛋白质相对分子质量的测定（一）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 120
实验十四 蛋白质相对分子质量的测定（二）——凝胶过滤法 125
实验十五 蛋白质浓度的测定 129
Ⅰ．考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）测定蛋白质的浓度 129
Ⅱ．用福林-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质的浓度 131
实验十六 酪蛋白的制备 133
第十二章 核酸的化学 135
实验十七 大肠杆菌质粒DNA的提取、酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定 135
实验十八 肝细胞核中核酸（RNA和DNA）的分离与测定 138
实验十九 薄层层析法分离AMP、ADP和ATP 140
实验二十 紫外分光光度法测定核酸含量 142
实验二十一 应用PCR技术扩增DNA分子 144
第十三章 酶和维生素 147
实验二十二 酶的特性 147
Ⅰ．温度对酶活力的影响 147
Ⅱ．pH对酶活力的影响 148
Ⅲ．唾液淀粉酶的活化和抑制 150
Ⅳ．酶的专一性 151
实验二十三 枯草杆菌蛋白酶活力测定 154
实验二十四 底物浓度对酶促反应速率的影响——米氏常数的测定 156
实验二十五 胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定 160
实验二十六 维生素C的定量测定 165
Ⅰ．2,4-二硝基苯肼法 165
Ⅱ．荧光法 168
实验二十七 维生素A的定量测定 170
Ⅰ．三氯化锑法 170
Ⅱ．紫外分光光度法 173
第十四章 新陈代谢 176
实验二十八 肌糖原的酵解作用 176
实验二十九 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 178
实验三十 发酵过程中无机磷的利用 180
实验三十一 脂肪酸的β-氧化 183
实验三十二 血液中转氨酶活力的测定 185
实验三十三 组织中乳酸脱氢酶同工酶的活性染色 187
第十五章 综合实验 191
实验三十四 碱性磷酸酶的分离纯化及其特性研究 191
Ⅰ．碱性磷酸酶的分离纯化及各级分酶活性和蛋白含量的测定 191
Ⅱ．碱性磷酸酶的纯度、蛋白印迹鉴定及其亚基相对分子质量测定 196
Ⅲ．碱性磷酸酶的酶学特性研究 200
实验三十五 溶菌酶的提取和系列性质测定 207
Ⅰ．溶菌酶的分离纯化 208
Ⅱ．溶菌酶分离纯化参数的测定 209
Ⅲ．SDS-PAGE鉴定纯化产物的纯度和测定溶菌酶的相对分子质量 212
Ⅳ．溶菌酶的酶学特性研究 214
Ⅴ．分子筛层析测酶相对分子质量 216
附录 219
一、实验室基本操作 219
二、试剂的配制及其分级 227
三、实验误差的统计学处理 229
四、硫酸铵饱和度计算表 232
五、常用核酸、蛋白质换算数据 233
六、氨基酸符号及相应密码子 234
七、常见酸碱试剂的浓度及密度 235
八、常用缓冲液的配制 236
九、常用酸碱指示剂 243
十、离心机转速与相对离心力的换算 244
十一、层析中常用介质的规格及性能 246
参考文献 250