第一部分 显微镜的使用 3
实验1 普通光学显微镜的基本使用方法 3
附录:石蜡切片和苏木精-伊红染色法 9
实验2 相差、干涉差、暗视野显微镜的基本使用方法 14
实验3 荧光显微镜的基本使用方法 20
附录1:绿色荧光蛋白(GFP)标记蛋白质定位的常规实验方法 27
附录2:激光共聚焦显微镜的基本原理和应用简介 32
实验4 电子显微镜技术(负染色技术) 35
第二部分 基本实验技术 43
实验5 细胞化学 43
Ⅰ.福尔根(Feulgen)染色 43
Ⅱ.酸性磷酸酶的检测 47
实验6 免疫标记与核酸原位杂交 51
Ⅰ.免疫酶标法检测细胞骨架蛋白 52
Ⅱ.免疫荧光标记法检测细胞中的微管蛋白 53
Ⅲ.小鼠3T3细胞中28S rRNA的检测 55
实验7 细胞器的分离、纯化和鉴定 61
Ⅰ.差速离心法分离线粒体 61
Ⅱ.叶绿体的密度梯度离心与荧光观察 64
附录:肝组织细胞核的制备 66
实验8 细胞融合 68
植物原生质体制备与融合 68
附录1:早熟染色体凝集(PCC) 71
附录2:单克隆抗体的制备 74
实验9 动物细胞培养 81
附录1:培养细胞的冻存与复苏 84
附录2:无菌操作技术要领 85
实验10 细胞分选与分析——流式细胞仪的使用 87
第三部分 细胞的结构、功能与生命活动 97
实验11 细胞质膜及其特化结构 97
Ⅰ.细胞质膜通透性效应的观察 97
Ⅱ.四膜虫纤毛的再生 99
Ⅲ.小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的观察 102
实验12 细胞骨架 105
Ⅰ.免疫荧光标记法观察微管的分布 105
Ⅱ.鬼笔环肽标记法观察微丝的分布 108
Ⅲ.黑藻细胞的胞质环流 111
Ⅳ.细胞骨架的立体镜观察 115
实验13 细胞周期 118
Ⅰ.小鼠M期染色体的制备与观察 118
Ⅱ.S期细胞的检测 121
Ⅲ.细胞周期中组蛋白H3磷酸化的检测 124
附录:细胞周期中DNA(或组蛋白)含量的流式细胞仪检测 127
实验14 细胞分化 130
Ⅰ.植物细胞的脱分化与再分化 130
Ⅱ.血细胞的分化和不同类型血细胞的观察 133
实验15 细胞凋亡与细胞衰老 138
Ⅰ.细胞凋亡的诱导及检测 138
Ⅱ.细胞衰老的诱导及β-半乳糖苷酶染色观察 144
实验16 细胞信号转导 147
Ⅰ.G蛋白耦联受体信号通路与心肌细胞的收缩 147
Ⅱ.TGF β对斑马鱼胚胎发育的影响 152
附录 实验材料及其培养 156
一、四膜虫 156
二、黑藻 157
三、斑马鱼 158
四、小鼠 160
五、拟南芥 162