《蛋白质分离与纯化技术》PDF下载

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  • 作  者:张建社,褚武英,陈韬编著
  • 出 版 社:北京:军事医学科学出版社
  • 出版年份:2009
  • ISBN:9787802452565
  • 页数:178 页
图书介绍:本书介绍了蛋白质分离技术的技术发展史、理论基础、发展方向、实验材料制备、实验技术应用、实验技术方案;具体介绍了实验原理、技术特点、步骤;详细介绍反应原理、使用实例、实验常见问题解决方案,包括预期结果、影响实验结果的因素、技术关键、常见失败结果、原因分析、解决方案等。

第一章 绪论 1

1 蛋白质定义与结构 1

2 蛋白质的一般理化性质 2

3 蛋白质分离纯化的目的和意义 5

4 蛋白质分离纯化的基本原则和策略 6

5 蛋白质分离纯化的基本过程 8

第二章 蛋白质样品的初级分离 13

1 制备蛋白质的原材料的选择和预处理 13

2 目标蛋白质的离心分离 16

3 沉淀分级 18

4 萃取 19

5 吸附 20

6 膜分离 21

第三章 蛋白质高效分离——层析法 23

1 离子交换层析 23

2 层析聚焦 31

3 分子排阻层析 35

4 羟基磷灰石层析 44

5 亲和层析 46

6 高效液相色谱 55

7 免疫亲和层析 62

第四章 分离纯化蛋白质的电泳分析 66

1 电泳的基本原理 66

2 纸电泳 67

3 薄层电泳 69

4 薄膜电泳 70

5 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析(SDS-PAGE) 71

6 固相pH梯度IEF-SDS蛋白质组双向凝胶电泳分析 75

7 蛋白质印迹法(Western blotting) 84

第五章 蛋白质定量和定性分析 88

1 蛋白质含量测定 88

2 Folin-酚试剂法(Lowry法) 90

3 考马斯亮蓝法(Bradford法) 92

4 紫外吸收法 95

5 蛋白质分子量的测定 97

6 蛋白质纯度分析 98

7 糖蛋白中糖含量分析 99

8 蛋白质N末端序列分析 102

9 蛋白质C末端序列分析 105

第六章 纯化蛋白的浓缩、干燥和保存 107

1 浓缩 107

2 干燥 110

3 纯化蛋白制成品的保存 112

4 蛋白质和酶保存方法 113

第七章 不同组织蛋白质分离纯化 115

1 动物组织 115

2 植物组织 117

3 细菌细胞 121

4 真菌细胞 124

第八章 重组蛋白的分离与纯化 128

1 大肠杆菌(E.coli)表达蛋白产物 128

2 酵母表达系统的蛋白与纯化 132

3 哺乳动物培养细胞重组蛋白的表达与分离纯化 135

4 GST融合蛋白的表达及分离纯化 139

5 His-Tag融合蛋白的分离纯化 142

第九章 膜蛋白的分离 146

1 膜蛋白的特性 146

2 膜蛋白抽提 146

3 分离膜蛋白的基本原则 147

4 分离细胞膜蛋白的方法 148

5 分离组织膜蛋白的方法 149

6 分离细菌膜蛋白的方法 149

第十章 特殊蛋白质纯化实例 151

1 乳清蛋白各成分分离 151

2 蔗糖酶的纯化 152

3 辣根过氧化物酶的纯化 152

4 烟草含铜锌超氧化物歧化酶的纯化 153

5 乙醇脱氢酶的纯化 155

6 胞外脂酶的纯化 156

7 核糖核酸酶的纯化 157

8 β-葡萄糖苷酶的纯化 158

9 α-半乳糖苷酶的纯化 158

10 甲硫氨酸特异性氨肽酶的纯化 159

附件 161

参考文献 176