第1篇 常用现代生物学实验技术及原理 3
第1章 显微技术 3
1.1明视野显微镜 3
1.2暗视野显微镜 7
1.3相差显微镜 8
1.4微分干涉差显微镜 9
1.5荧光显微镜 10
1.6激光扫描共聚焦显微镜 11
1.7多光子荧光显微镜 15
1.8电子显微镜 15
第2章 切片技术 26
2.1石蜡切片技术 26
2.2碳蜡切片技术 29
2.3冷冻切片技术 30
2.4超薄切片技术 32
2.5其他切片技术 37
第3章 层析技术 38
3.1层析技术的定义及分类 38
3.2色谱图及其专业术语 41
3.3层析分离的基本理论和重要参数 44
3.4层析定性定量分析的基本原理及方法 52
3.5层析技术的基本操作 57
3.6常用的色层分离技术简介 61
第4章 电泳技术 94
4.1电泳的基本原理 94
4.2琼脂糖凝胶电泳 95
4.3聚丙烯酰胺凝胶电泳 8
4.4毛细管电泳 109
4.5单细胞凝胶电泳 110
第5章 核酸研究技术 112
5.1核酸的分离纯化与鉴定 112
5.2核酸的序列分析 117
5.3基因扩增 121
5.4分子杂交 129
5.5 DNA重组 141
5.6目的基因的分离与克隆 114
5.7基因功能研究 157
5.8生物芯片 163
5.9噬菌体展示和细菌表面展示 166
5.10分子标记 117
第6章 蛋白质研究技术 179
6.1蛋白质的分离纯化与检测 179
6.2蛋白质结构研究技术 187
6.3蛋白质的变复性研究技术 201
6.4蛋白质相互作用研究技术 205
6.5蛋白质组学研究技术 208
第7章 免疫学相关技术 217
7.1抗体的制备 217
7.2标记免疫技术 226
7.3免疫细胞化学技术 238
第8章 细胞研究技术 248
8.1动物细胞培养的基本原理与技术 248
8.2植物组织培养的基本原理与技术 278
8.3流式细胞术 303
第9章 中药研究相关技术 312
9.1中药有效成分的分离纯化 312
9.2药理学简介 319
9.3动物实验基本常识及常用技术 323
9.4整体动物实验研究技术 331
9.5离体实验研究技术 335
9.6分子水平的药理药效学研究技术 344
9.7新药临床前及临床药理学研究简介 350
9.8药物筛选方法简介 352
9.9抗肿瘤药物的药理药效学研究方法 353
第2篇 学生实验 361
实验1 碱性磷酸酶突变体的构建及其结构功能分析 361
实验2 小鼠碱性磷酸酶基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达 384
实验3 酵母双杂交法寻找烟草CaM结合蛋白 395
实验4 烟草突变体库的构建及其T-DNA侧翼序列的分析 411
实验5 RNAi研究线虫肌丝蛋白unc22基因的功能 421
实验6 细菌表面展示绿色荧光蛋白GFP 428
实验7 辽东栎的分子标记分析 435
实验8 烟草原生质体分离和体细胞杂交 445
实验9 红豆杉次生代谢产物紫杉醇的生产与检测 450
实验10 紫杉醇诱导宫颈癌Hela细胞凋亡作用机制的研究 454
实验11 紫杉醇的在体药理学研究 461
实验12 单克隆抗体的制备 465
第3篇 附录 475
附录1 常用缓冲液及培养基的配制 475
1.1常用pH缓冲液的配制 475
1.2常用电泳缓冲液及凝胶加样缓冲液 483
1.3常见限制性内切酶的酶切位点及其缓冲液 485
1.4常用抗生素溶液 487
1.5常用培养基 487
附录2 相关实验资料和常用数据 494
2.1常用单位及换算方法 494
2.2氨基酸符号及相应密码子 494
2.3常用核酸与蛋白质换算数据 495
2.4离心机转速与相对离心力的换算 497
2.5常见市售酸碱的浓度 499
2.6几种主要同位素的衰变及半衰期 500
2.7硫酸铵饱和度表 501
2.8常用层析介质 503
2.9菌种保存 511