第一部分 基础生化实验 1
实验一 蛋白质定量测定(一)——微量凯氏定氮法 1
1 Quantitation of Protein(1)——Kjeldahl Method 5
实验二 蛋白质定量测定(二)——福林-酚试剂法 10
2 Quantitation of Protein(2)——Folin-Phenol Reagent Method(Lowry Method) 12
实验三 蛋白质定量测定(三)——双缩脲法 15
3 Quantitation of Protein(3)——Biuret Method 17
实验四 蛋白质定量测定(四)——紫外分光光度法 19
4 Quantitation of Protein(4)——Ultraviolet Absorption Method 21
实验五 蛋白质定量测定(五)——染料结合比色法 23
5 Quantitation of Protein(5)——Bradfond Method 25
实验六 蛋白质定量测定(六)——BCA法 27
6 Quantitation of Protein(6)——BCA Method 29
实验七 核酸的定量测定(一)——紫外分光光度法 31
7 Quantitation of Nucleic Acid(1)——Ultraviolet Absorption Method 33
实验八 核酸的定量测定(二)——定磷法 35
8 Quantitation of Nucleic Acid(2)——Phosphorus Analysis 38
实验九 核酸的定量测定(三)——定糖法 41
9 Quantitation of Nucleic Acid(3)——Saccharide Analysis 45
实验十 动物组织中核酸的提取与鉴定 49
10 Extraction and Identification of Nucleic Acid from Animal Tissue 52
实验十一 质粒DNA的提取 55
11 Extraction of Plasmid DNA 57
实验十二 DNA序列测定——双脱氧链终止法 60
12 DNA Sequencing——Dideoxy-mediated Chain Termination Method 69
实验十三 多肽的末端分析 80
13 Analysis of Polypeptide Termination 83
实验十四 蛋白质及肽的N-末端氨基酸DNS分析——DNS法 86
14 N-Terminal Amino Acid Assay of Protein or Peptide——DNS Method 90
实验十五 底物浓度对酶活性的影响——蔗糖酶米氏常数的测定 94
15 Influence of Substrate Concentration on Enzyme Activity——Michaelis Constant Assay of Sucrase 98
实验十六 酶的竞争性抑制作用——丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制 103
16 Competitive Inhibition——Malonicacid Inhibit Fumaric Reductase 105
实验十七 糖的定量测定(一)——3,5-二硝基水杨酸比色法 108
17 Quantitation of Saccharide(1)——3,5-Dinitro Salicylic Acid Method 112
实验十八 糖的定量测定(二)——蒽酮比色定糖法及糖的纸上色谱鉴定法 116
18 Quantitation of Saccharide(2)——Anthrone method and Paper Chromatography 119
实验十九 维生素C的定量测定 122
19 Quantitation of Vitamin C 125
实验二十 维生素A的含量测定 129
20 Quantitation of Vitamin A 132
实验二十一 运动对尿乳酸排出量的影响 136
21 Influence of Sport on Uninany Lactate 138
实验二十二 肌糖原的酵解作用 140
22 Glycolysis of Muscle Glycogen 143
实验二十三 脂肪酸β-氧化 146
23 β-Oxidation of Fatty Acid 149
实验二十四 脂肪碘值的测定 152
24 Iodine Value of Adipose 155
第二部分 用于药物研究的生化技术实验 159
实验二十五 凝胶层析法——Sephadex G-50分离核黄素与丙种球蛋白 159
25 Gel Chromatography——Separating Riboflavin and Gammaglobulin by Sephadex G-50 163
实验二十六 琼脂糖凝胶电泳技术分析DNA 168
26 Analyze DNA by Agarose Gel Electrophoresis 170
实验二十七 PCR扩增DNA片断 172
27 PCR Amplify DNA Fragment 174
实验二十八 Southern印迹法 177
28 Southern Blotting 181
实验二十九 银耳多糖的制备及一般鉴定 186
29 Preparation and Identification of Tremellan 189
实验三十 鱼油中不饱和脂肪酸EPA和DHA的制备 192
30 Preparation of EPA and DHA from Fish Oil 194
实验三十一 离子交换树脂层析分离混合氨基酸 197
31 Separating Mixed Amino Acids by Ion-exchange Chromatography 199
实验三十二 溶菌酶的结晶和活力测定 202
32 Crystallization and Activity Assay of Lysozyme 206
实验三十三 盐析法制备免疫球蛋白 211
33 Preparation of Immunoglobulin by Salting Out 214
实验三十四 DEAE-琼脂糖凝胶层析纯化IgG 218
34 Purification of IgG Using DEAE-Sepharose Chromatography 220
实验三十五 琼脂糖凝胶电泳分离LDH同工酶 222
35 Separating LDH Isozyme by Agarose Gel Electrophoresis 225
实验三十六 免疫电泳技术——胎儿甲种球蛋白对流免疫电泳 228
36 Fetuin Assay by Counter Immunoelectrophoresis 230
实验三十七 蛋白质的分子量测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 233
37 Molecular Weight Determination of Protein——SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis 236
实验三十八 聚丙烯酰胺凝胶双向电泳 239
38 Two-Dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis 244
实验三十九 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦 250
39 Polyacrylamide Gel Isoelectrofocusing 253
实验四十 微量酶联免疫法测定胰岛素 257
40 Insulin Assay by Enzyme Linked Immunoassay(ELISA) 261
实验四十一 植物血球凝集素的提取、分离及活性检测 265
41 Extraction,Separation and Activity Assay of Phytohemagglutinin 268
实验四十二 固定化细胞法生产L-天冬氨酸 271
42 Preparation of L-Aspartic Acid by Immobilized Cell Method 274
实验四十三 偶联法制备固定化胰蛋白酶 278
43 Preparation of Immobilized by Couple Method 283
实验四十四 亲和层析法制取胰蛋白酶抑制剂 288
44 Preparation of Trypsin Inhibitor By Affinity Chromatography 292
实验四十五 α-糜蛋白酶注射剂效价测定 296
45 Titer Assay of α-Chymotrypsin Injection 299
第三部分 药物作用的生化分析实验 302
实验四十六 观察四氯化碳中毒性肝炎血清中谷丙转氨酶的活力变化 302
46 Activity Changes of Serum Alanine Transaminase in Phenixin-induced Toxic Hepatitis 306
实验四十七 血清总胆固醇及甘油三酯的测定 310
47 Determination of Serum Total Cholesterol and Triglyceride 314
实验四十八 激素的活力测定——胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响(一) 318
48 Activity Assay of Hormone——Influence of Insulin and Adrenaline on Blood Glucose Concentration(1) 322
实验四十九 激素的活力测定——胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响(二) 326
49 Activity Assay of Hormone——Influence of Insulin and Adrenaline on Blood Glucose Concentration(2) 328
实验五十 药物毒性的生化分析——血清尿素氮的测定 331
50 Biochemical Analysis of Drug Toxicity——Assay of Serum Urea Nitrogen 333
实验五十一 有机磷化合物对胆碱酯酶的抑制作用 335
51 Organic Phosphorus Compounds Inhibit Choling Esterase 338
实验五十二 磺胺类药物在体内的代谢分析 342
52 Metabolic Analyze of Sulfonamides in Vivo 345
实验五十三 刀豆球蛋白对小鼠脾淋巴细胞DNA合成的影响 348
53 Influence of Canavalin on DNA Replication of Mouse Spleen Lymphocyte 350
附录 353
附录一 试剂及试剂配制和保存 353
附录二 层析法常用数据表 368
附录三 某些蛋白质的物理性质 375
附录四 氨基酸的物理常数 376