第一部分 理论知识 1
第一章 绪论 3
第一节 工业微生物 3
第二节 工业微生物育种技术 4
一、自然选育(选择育种) 4
二、诱变育种 5
三、代谢控制育种 5
四、杂交育种 5
五、基因工程育种 6
本章小结 6
复习思考题 6
第二章 微生物育种的遗传基础 7
第一节 细胞分裂及遗传学意义 7
一、有丝分裂 7
二、减数分裂 9
三、微生物的繁殖方式 12
第二节 微生物的遗传物质 16
一、核基因 16
二、核外基因 17
第三节 基因突变 18
一、基因突变的类型 18
二、基因突变的修复 19
三、突变体的形成 22
第四节 微生物的基因重组 22
一、原核微生物的基因重组 22
二、真核微生物的基因重组 26
本章小结 27
复习思考题 27
第三章 工业微生物育种出发菌株的分离与筛选 28
第一节 育种出发菌株的选择 29
一、育种出发菌株的特性 29
二、育种出发菌株的来源 29
第二节 微生物样品的采集 30
一、采样 30
二、富集培养 34
第三节 纯种分离 37
一、好氧微生物的分离 37
二、厌氧微生物的分离 45
第四节 出发菌株的筛选和产物活性的测定 47
一、出发菌株的筛选 47
二、产物活性的测定 49
本章小结 50
复习思考题 51
第四章 工业微生物诱变育种 52
第一节 工业微生物育种诱变剂 52
一、物理诱变剂 52
二、化学诱变剂 57
三、生物诱变剂 64
第二节 诱变育种的步骤与方法 65
一、诱变出发菌株的选择与纯化 65
二、单细胞(或单孢子)悬液的制备 67
三、诱变剂及诱变剂量的选择 69
四、诱变剂的处理方式与方法 72
五、影响诱变效果的因素 74
第三节 典型诱变菌株的筛选 76
一、营养缺陷型菌株的筛选 76
二、温敏突变株的筛选 81
三、抗噬菌体菌株的选育 83
本章小结 86
复习思考题 87
第五章 工业微生物代谢控制育种 88
第一节 微生物的代谢及产物 88
一、初级代谢及其产物 89
二、次级代谢及其产物 89
三、初级代谢与次级代谢的关系 91
第二节 初级代谢的调控 92
一、酶合成的调节 92
二、酶活性的调节 97
三、反馈抑制与反馈阻遏的比较 100
第三节 次级代谢的调控 100
一、碳源分解调节 101
二、氮源分解调节 101
三、磷酸盐调节 102
四、代谢产物反馈调节 102
五、细胞膜透性调节 103
第四节 代谢控制育种 104
一、组成型突变株的选育 104
二、抗分解调节突变株的选育 105
三、抗反馈调节突变株的选育 109
四、细胞膜透性突变株的选育 113
五、营养缺陷型在代谢调节育种中的应用 115
六、渗漏缺陷型在代谢调节育种中的应用 116
本章小结 117
复习思考题 118
第六章 工业微生物杂交育种 119
第一节 微生物杂交育种 119
一、微生物杂交育种的意义 119
二、微生物杂交育种的一般程序 120
三、微生物杂交育种方法 121
第二节 细菌杂交育种 122
一、细菌杂交的特点 122
二、细菌杂交育种的方法 122
第三节 放线菌杂交育种 123
一、放线菌杂交的特点 124
二、放线菌杂交育种的方法 125
第四节 酵母菌杂交育种 129
一、酵母菌杂交的特点 129
第五节 霉菌杂交育种 132
一、霉菌杂交的特点 132
二、霉菌杂交育种的方法 133
第六节 原生质体育种 138
一、原生质体再生育种 139
二、原生质体诱变育种 140
三、原生质体转化育种 143
四、原生质体融合育种 146
本章小结 156
复习思考题 157
第七章 基因工程育种 158
第一节 基因工程简介 158
一、基因工程的特点 158
二、基因工程中常用的工具酶 159
三、基因工程中常用的载体 160
第二节 基因工程育种 162
一、目的基因的获取 162
二、载体的制备 164
三、目的基因与载体DNA的体外重组 165
四、重组DNA导入受体细胞 166
五、重组菌的筛选、鉴定与分析 167
第三节 基因工程育种的应用 169
一、在工业上的应用 169
二、在医学上的应用 170
三、在农业上的应用 171
本章小结 173
复习思考题 174
第八章 菌种保藏 175
第一节 菌种的退化及防止措施 175
一、菌种退化的现象 175
二、菌种退化的原因 176
三、防止菌种退化的措施 177
第二节 菌种保藏方法 178
一、斜面低温保藏法 178
二、普通冷冻保藏法 179
三、超低温冷冻保藏法 179
四、液氮超低温保藏法 179
五、沙土管保藏法 180
六、冷冻真空干燥保藏法 181
七、液体石蜡保藏法 182
本章小结 183
复习思考题 184
第二部分 实训操作 185
实训一 培养基的配制及灭菌 187
1牛肉膏蛋白胨培养基和高氏1号培养基 187
2马丁(链霉素、孟加拉红、去氧胆酸钠)培养基和豆芽汁葡萄糖培养基 188
实训二 微生物采样、富集和分离纯化 190
1土壤微生物的采样 190
2土壤微生物的富集培养(淤泥红螺菌) 191
3土壤微生物的分离纯化(细菌、放线菌、酵母菌、霉菌) 192
实训三 紫外线诱变育种 196
1出发菌株的分离纯化 196
2紫外线诱变剂量的选择与诱变育种 198
3高产突变株的初筛 201
4高产突变株的复筛 202
实训四 基因工程育种操作 205
1少量质粒DNA的提取和鉴定 205
2 PCR扩增制备目的基因 209
3大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 211
4重组菌的筛选、鉴定与分析 213
实训五 菌种保藏 217
参考文献 219