第一章 组织培养基本技术及细胞生物学特性分析 1
第一节 组织培养基本方法 1
第二节 细胞生物学特性分析 4
第三节 细胞培养的污染及检测 7
第二章 核酸制备技术 11
第一节 质粒DNA的制备 11
第二节 真核细胞核酸的制备 14
第三节 核酸的回收和纯化 17
第四节 DNA和RNA的测定 19
第五节 凝胶电泳 20
第六节 限制性内切酶的酶学分析 24
第三章 核酸分析技术 28
第一节 核酸分子探针的标记 28
第二节 原位杂交组织化学技术 34
第三节 Southern印迹杂交 38
第四节 Northern印迹杂交 40
第五节 基因突变分析技术 44
第四章 聚合酶链式反应 51
第一节 聚合酶链反应的原理 51
第二节 PCR反应的成分和作用 52
第三节 引物设计一般性原则 54
第四节 逆转录PCR 55
第五节 聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP) 57
第六节 Real-time PCR 60
第五章 DNA重组技术 66
第一节 DNA重组技术的定义及步骤 66
第二节 细菌感受态细胞的制备和转化 70
第三节 重组质粒的连接、转化及筛选 72
第六章 基因转染 76
第一节 脂质体介导的基因转染法 76
第二节 腺病毒感染法 78
第三节 慢病毒感染法 81
第四节 转染细胞的筛选与分离 84
第七章 蛋白质表达分析 89
第一节 免疫组织化学 89
第二节 Western Blotting 91
第三节 免疫沉淀 95
第四节 免疫共沉淀 97
第五节 蛋白相互作用研究策略 98
第六节 细胞凋亡检测 104
第八章 RNAi技术 108
第九章 表观遗传学 111
第一节 DNA甲基化与CpG岛 111
第二节 DNA甲基化与肿瘤发生 112
第三节 DNA甲基化检测方法简介 113
第四节 特异性PCR检测基因启动子甲基化 115
第五节 亚硫酸氢盐修饰后测序法分析甲基化 116
第十章 蛋白质组学及其研究方法概述 119
第一节 蛋白质组学的概念 119
第二节 蛋白质组学研究方法概述 120
第三节 蛋白质组学在疾病研究中的应用 123
第十一章 蛋白质样品制备技术 129
第一节 蛋白质制备的基本方法 129
第二节 细胞蛋白质的制备 139
第三节 体液蛋白质的制备 152
第十二章 蛋白质双向凝胶电泳分离技术 155
第一节 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的发展 156
第二节 蛋白质双向凝胶电泳分析的原理 158
第三节 固相pH梯度-SDS双向凝胶电泳实验操作方法 159
第四节 双向凝胶电泳图像分析 167
第五节 2-DE数据库的构建 187
第十三章 蛋白质组学研究中的非胶技术 189
第一节 液相色谱法 189
第二节 毛细管电泳 196
第三节 非凝胶技术与质谱联用在蛋白质组学研究中的应用 199
第十四章 质谱技术与蛋白质鉴定 206
第一节 蛋白质鉴定技术概述 206
第二节 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术 211
第三节 电喷雾串联质谱技术 220
第四节 SELDI-TOF质谱技术 228
第十五章 定量蛋白质组学研究技术 235
第一节 基于双向凝胶电泳的定量蛋白质组研究策略 235
第二节 基于生物质谱的定量蛋白质组研究策略 250
第十六章 蛋白质组翻译后修饰分析策略 258
第一节 概述 258
第二节 磷酸化蛋白质组研究 259
第三节 糖基化蛋白质组研究 275
第十七章 功能蛋白质组学研究技术 287
第一节 蛋白质相互作用研究技术 287
第二节 蛋白质芯片技术 295
第三节 磷酸化蛋白质组分析技术在信号传导研究中的应用 299
第十八章 蛋白质组学研究中的生物信息学 301
第一节 生物信息学与蛋白质组学信息学 301
第二节 蛋白质组学研究信息资源 303
第三节 生物信息学软件在蛋白质组学研究中的运用 323
第四节 生物信息学在蛋白质组学研究中的新进展 335
附录 360
附录一 分子生物实验室的常规仪器及设施 360
附录二 放射性核素的基本知识 373
附录三 细胞培养室 379
附录四 常用试剂的配制 383
附录五 常用单位换算 391
附录六 在线生物软件介绍 393
医学分子生物学常用名词英汉缩略对照 396
参考文献 419