第1篇 瘤胃微生物研究方法 2
第1章 瘤胃微生物传统研究方法 2
第1节 瘤胃细菌的培养、计数、分类和保藏 2
第2节 瘤胃真菌的培养、计数和保藏 10
第3节 瘤胃原虫的培养、计数、分类和保藏 14
第2章 瘤胃微生物分子生态学研究方法 22
第1节 瘤胃微生物样品采集与前处理 22
第2节 瘤胃微生物总DNA提取 25
第3节 瘤胃微生物的实时定量PCR方法 30
第4节 瘤胃微生物多样性的变性梯度凝胶电泳分析 40
第5节 瘤胃微生物多样性的RFLP和T - RFLP分析 45
第6节 瘤胃微生物16S/18S rDNA文库构建 53
第3章 瘤胃微生物元基因组学研究方法 62
第1节 瘤胃微生物细菌人工染色体(BAC)文库构建与鉴定 63
第2节 瘤胃微生物BAC文库中纤维素酶活性克隆的筛选 73
第3节 瘤胃微生物BAC文库中脲酶活性克隆的筛选 79
第4节 瘤胃微生物BAC文库中脂肪酶活性克隆的筛选 85
第2篇 营养消化吸收研究方法 92
第4章 体外模拟瘤胃发酵研究方法 92
第1节 体外发酵产气法 92
第2节 短期静态体外发酵批次培养法 96
第3节 持续动态人工瘤胃法 99
第5章 消化道瘘管安装方法 104
第1节 术前准备 104
第2节 瘤胃瘘管安装手术 111
第3节 十二指肠近端T型瘘管安装手术 115
第4节 回肠末端T型瘘管安装手术 120
第5节 术后动物护理 121
第6章 瘤胃营养代谢研究方法 124
第1节 瘤胃营养灌注方法 124
第2节 瘤胃液pH检测 127
第3节 瘤胃甲烷排放量测定 129
第4节 饲料养分瘤胃降解率测定 133
第5节 瘤胃液氨态氮的检测 136
第6节 瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定 139
第7节 瘤胃液共轭亚油酸的测定 141
第8节 瘤胃液中脂肪酸的测定 143
第9节 瘤胃纤维素酶活性测定 145
第10节 瘤胃亚油酸异构酶和共轭亚油酸还原酶活性测定 149
第11节 瘤胃液蛋白酶活性测定 151
第12节 瘤胃细菌脲酶活性的测定 154
第13节 瘤胃细菌脂肪酶活性的测定 156
第7章 小肠营养物质消化吸收研究方法 161
第1节 小肠营养灌注方法 161
第2节 小肠食糜流量测定 164
第3节 移动尼龙袋法测定饲料小肠养分消化率 168
第4节 酶解法评定饲料小肠消化率 171
第5节 小肠冻干粉法评定饲料消化率 174
第3篇 血液生化指标研究方法 180
第8章 血管插管手术方法 180
第1节 颈动脉插管和皮管安装手术 180
第2节 颈静脉留置针安装手术 183
第3节 小肠间膜静脉血管插管安装手术 184
第4节 肝脏门静脉血管插管安装手术 186
第5节 瘤胃壁静脉血管插管安装手术 188
第6节 子宫卵巢静脉血管插管安装手术 190
第9章 血液生化指标分析方法 192
第1节 血样的采集 193
第2节 血样的制备 195
第3节 血液抗凝剂的制备 197
第4节 无蛋白质血液的制备 198
第5节 用自动生化分析仪测定血液生化指标 199
第6节 血清蛋白质的电泳法测定 201
第7节 血糖的光谱法测定 205
第8节 血酯的光谱法测定 207
第9节 血液中共轭亚油酸(CLA)的测定 209
第4篇 组织和细胞生物学研究方法 214
第10章 活体组织取样方法 214
第1节 肝脏活体微创取样方法 214
第2节 乳腺活体取样方法 217
第3节 瘤胃液口腔采样方法 220
第11章 奶牛乳腺上皮细胞体外培养方法 225
第1节 奶牛乳腺上皮细胞体外培养研究概述 225
第2节 原代乳腺上皮细胞分离培养方法 226
第3节 乳腺上皮细胞的传代、冻存和复苏 232
第4节 乳腺上皮细胞生长的生物学鉴定 235
第5节 乳腺上皮细胞染色体核型分析 242
第6节 乳腺上皮细胞标志性蛋白的免疫组化检测 244
第7节 乳腺上皮细胞特异性分泌蛋白的检测 246
第5篇 分子生物学研究方法 254
第12章 营养代谢蛋白质组学研究方法 254
第1节 蛋白质组学研究方法概述 254
第2节 奶牛血浆和乳蛋白质组学研究方法 258
第13章 奶牛乳腺基因组学研究方法 269
第1节 基因组学研究方法概述 269
第2节PAGE法克隆奶牛乳腺上皮细胞中的miRNA 277
第3节 基因芯片检测奶牛乳腺上皮细胞基因表达谱 283
第6篇 牛奶品质研究方法 300
第14章 生乳理化指标评价方法 300
第1节 新鲜度 300
第2节 酸度 301
第3节 杂质度 303
第4节 相对密度 305
第5节 冰点 307
第6节 感官指标 309
第15章 生乳营养成分评价方法 311
第1节 蛋白质 311
第2节 脂肪 314
第3节 乳糖 318
第4节 全脂乳固体及非脂乳固体 323
第5节 氨基酸 325
第6节 维生素 333
第7节 微量元素 340
第8节 乳成分的快速测定方法 347
第16章 液态奶热加工质量评价方法 351
第1节 液态奶热加工质量评价方法概述 351
第2节 巴氏杀菌乳热加工质量评价 354
第3节 超高温灭菌乳加工质量评价 365
第4节 液态奶中复原乳的鉴定 375
第17章 牛奶中活性成分检测方法 384
第1节 牛奶中活性成分检测方法概述 384
第2节 牛奶中CLA等脂肪酸的测定方法 389
第3节 免疫单扩散法检测牛初乳IgG含量 392
第4节SDS-PAGE法测定牛奶中乳铁蛋白含量 396
第5节 间接ELISA方法测定牛奶中特异性抗体效价 401
第6节 夹心ELISA方法测定乳中免疫球蛋白含量 405
第7篇 牛奶安全指标评价方法 414
第18章 生乳中污染物评价方法 414
第1节铅 414
第2节汞 416
第3节 无机砷 419
第4节铬 421
第19章 生乳中真菌毒素和微生物评价方法 424
第1节 黄曲霉毒素M1 424
第2节 菌落总数 428
第3节 致病菌 430
第20章 生乳中农药残留和兽药残留评价方法 432
第1节 六六六、滴滴涕和林丹 432
第2节 有机磷 435
第3节 微生物法 436
第4节 青霉素类 437
第5节 四环素类 440
第6节 磺胺类 443
第21章 生乳中违禁添加物评价方法 446
第1节 三聚氰胺 446
第2节 硫氰酸根 449
第3节 工业用火碱 451
第4节 革皮水解物 453
第5节β-内酰胺酶 456
第6节 玉米赤霉醇 460
第22章 生乳中体细胞评价方法 465
第1节 测定牛奶中体细胞数的显微镜法 465
第2节 测定牛奶中体细胞数的荧光光电计数法 467
第3节 测定牛奶中体细胞数的电子粒子计数法 468
第8篇 饲料中纤维素和动物源性成分检测及饲用微生物研究方法 472
第23章 饲料中纤维素成分检测方法 472
第1节 粗纤维的测定 473
第2节 中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和木质素的测定 475
第3节 酸性洗涤不溶氮和中性洗涤不溶氮的测定 478
第24章 饲料中动物源性成分PCR检测方法 482
第1节 饲料中动物源性成分检测方法研究概述 482
第2节 饲料样品的采集和制备 488
第3节 饲料中牛、羊、猪、鸡和鱼源性成分的PCR检测方法 491
第4节 饲料中乳粉与肉骨粉的PCR区分 498
第25章 饲用微生物研究方法 504
第1节 饲用乳酸菌的筛选鉴定 504
第2节 饲用酵母菌的筛选鉴定 512
第3节 饲用芽孢杆菌的筛选鉴定 522
第4节 饲用微生物的评价方法 529
第9篇 试验设计与数据处理 542
第26章 常用试验设计与数据分析 542
第1节 试验方案设计 542
第2节 重复观测试验数据的统计分析 551
缩略词表 557