第1章 基因及基因组学检测技术 1
1.1 核酸制品的理化指标及其检测 1
1.1.1 核酸分离纯化的原则 1
1.1.2 核酸分离纯化的技术路线 2
1.1.3 基因组DNA的分离与纯化 3
1.1.4 质粒DNA的分离与纯化 4
1.1.5 RNA的分离与纯化 4
1.1.6 全自动核酸提取纯化工作站 5
1.2 DNA的变性与复性及其Tm值和C0t值测定 6
1.2.1 DNA变性及其Tm值的意义与测定 6
1.2.2 DNA复性及其C0t值的意义和测定 7
1.2.3 核酸杂交分析及核酸探针技术 8
1.3 常规PCR原理与步骤 9
1.3.1 PCR的基本原理 9
1.3.2 操作过程 9
1.3.3 热稳定性DNA聚合酶 10
1.3.4 PCR引物的设计 10
1.3.5 PCR扩增的模板 10
1.3.6 常规的PCR扩增方案 10
1.4 实时荧光定量PCR检测技术 11
1.4.1 CT值 12
1.4.2 荧光信号和定量数据的归一化 14
1.4.3 污染的预防和热启动 14
1.4.4 标准 14
1.4.5 TaqMan探针技术原理 15
1.4.6 SYBR Green Ⅰ荧光染料 15
1.4.7 定量PCR仪 16
1.5 其他非常规扩增技术 16
1.6 核酸的序列测定技术 18
1.6.1 双脱氧末端终止法测序 18
1.6.2 全自动测序 20
1.6.3 测序策略 21
1.6.4 高通量测序 22
1.7 基因组学检测技术 24
1.7.1 结构基因组学检测技术 24
1.7.2 功能基因组学检测技术 25
1.7.3 比较基因组学检测技术 26
1.7.4 宏基因组学检测技术 26
主要参考文献 27
第2章 蛋白质及蛋白质组学检测技术 28
2.1 蛋白质的理化性质 29
2.2 蛋白质一级结构测定 31
2.2.1 水解分析 31
2.2.2 蛋白质分子中末端氨基酸的分析 32
2.2.3 质谱测序 34
2.2.4 蛋白质的非共价复合物研究 35
2.3 蛋白质高级结构分析测定 35
2.3.1 仪器分析方法 35
2.3.2 理论分析方法 37
2.4 蛋白质组学检测技术 46
2.4.1 电泳分析法 47
2.4.2 层析技术 47
2.4.3 质谱技术 48
2.4.4 蛋白质修饰及其分析方法 52
主要参考文献 55
第3章 酶检测技术 56
3.1 基础酶学检测技术 56
3.1.1 酶反应的解析 56
3.1.2 酶学常数测定 57
3.2 应用酶学检测技术 66
3.2.1 酶产品质检 66
3.2.2 酶法检测 79
3.2.3 常见酶活力测定方法 85
主要参考文献 103
第4章 次生活性成分检测技术 104
4.1 生物碱 104
4.1.1 生物碱的分类 104
4.1.2 生物碱的理化性质 105
4.1.3 生物碱的提取分离 106
4.1.4 生物碱定性鉴别 109
4.1.5 生物碱的含量测定 111
4.2 醌类化合物 114
4.2.1 醌类化合物的主要理化特性 115
4.2.2 醌类化合物的提取分离 116
4.2.3 醌类化合物的定性鉴别 117
4.2.4 醌类化合物的含量测定 119
4.2.5 蒽醌类化合物的结构测定 120
4.3 黄酮类化合物 123
4.3.1 黄酮类化合物的主要理化特性 123
4.3.2 黄酮类化合物的分离 123
4.3.3 黄酮类化合物的定性鉴别 125
4.3.4 黄酮类化合物的定量分析 127
4.4 香豆素和木脂素类 130
4.4.1 香豆素类成分的主要理化性质 130
4.4.2 香豆素类的提取分离 131
4.4.3 香豆素类的检识 132
4.4.4 木脂素类的理化性质 132
4.4.5 木脂素类的提取分离 132
4.4.6 木脂素类的检识 133
4.5 皂苷类 133
4.5.1 皂苷的性质 133
4.5.2 皂苷的提取分离 134
4.5.3 皂苷类成分的定性分析 135
4.5.4 皂苷类成分的定量分析 136
4.6 强心苷类 137
4.6.1 强心苷类的主要性质 137
4.6.2 强心苷类的检识反应 139
4.6.3 强心苷类的提取分离 140
4.7 挥发油 141
4.7.1 挥发油的主要性质 141
4.7.2 挥发油成分的提取 141
4.7.3 挥发油成分的分离 142
4.7.4 挥发油的鉴定 143
4.8 抗生素 143
4.8.1 抗生素的种类 143
4.8.2 抗生素的效价测定 144
主要参考文献 147
第5章 细胞分析检测技术 148
5.1 细胞的分离与培养 148
5.1.1 细胞培养技术的特点与应用 148
5.1.2 培养细胞生长的条件 149
5.1.3 原代培养细胞的取材与分离 150
5.2 细胞形态与活性的常规检测法 151
5.2.1 普通显微染色观察法 151
5.2.2 MTT法 153
5.3 数字显微及激光共聚焦显微分析法 155
5.3.1 数字显微分析法 155
5.3.2 激光扫描共聚焦显微观察分析法 155
5.4 流式细胞术检测技术 158
5.4.1 流式细胞术的发展简史 158
5.4.2 流式细胞术的基本结构和工作原理 159
5.4.3 流式细胞术的应用 165
主要参考文献 168
第6章 功效与代谢检测技术 169
6.1 保健食品功效检测与评价 169
6.1.1 保健食品概述 169
6.1.2 保健食品功能检测 171
6.2 药理检测技术 183
6.2.1 药效学检测技术 183
6.2.2 药物代谢动力学检测技术 191
主要参考文献 198
第7章 生物安全评价方法与技术 199
7.1 生物安全性评价基本方法 199
7.1.1 急性毒性试验 199
7.1.2 蓄积毒性试验 199
7.1.3 亚急性毒性试验 200
7.1.4 慢性毒性试验 201
7.1.5 致癌试验 203
7.1.6 致突变试验 204
7.1.7 代谢试验 205
7.2 各主要制品生物安全性评价 205
7.2.1 食品安全性评价 205
7.2.2 药物毒理及安全性评价 207
7.2.3 化妆品毒理及安全性评价 212
7.2.4 转基因产品的安全性评价 222
7.3 质量安全认证 223
7.3.1 HACCP认证 223
7.3.2 GMP认证 224
7.3.3 QS认证 226
7.3.4 其他与生物技术产品相关的认证 228
主要参考文献 228
第8章 生物传感器及生物芯片技术 229
8.1 生物传感器 229
8.1.1 生物传感器的结构和原理 230
8.1.2 生物传感器的定义与分类 230
8.1.3 几种主要的生物传感器 230
8.2 生物芯片 237
8.2.1 生物芯片的制造 238
8.2.2 生物芯片的使用和阅读 241
8.2.3 各种生物芯片 244
8.2.4 生物芯片的应用 247
主要参考文献 249