第1章 工具 1
1.1前言 1
1.2切割 1
1.3修饰 7
1.4连接 10
1.5转化 12
1.6从大肠杆菌中纯化质粒DNA 14
1.7核酸的凝胶电泳 15
1.8寡核苷酸合成 19
1.9微阵列 20
第2章 聚合酶链反应 21
2.1基本技术 21
2.2预防措施和缺点 27
2.3改良 30
第3章 简单克隆 36
3.1基本实验 36
3.2载体、转化和宿主 40
3.3修饰 45
3.4接头、衔接子和序列盒 48
第4章 用于大肠杆菌的其他载体系统 52
4.1前言 52
4.2BAC载体 52
4.3M13噬菌体载体 53
4.4λ噬菌体 57
4.5黏粒 65
4.6Mu噬菌体 65
4.7P1噬菌体 66
第5章 文库构建 69
5.1前言 69
5.2基因组文库 69
5.3cDNA文库 70
5.4专业文库 75
第6章 文库筛选 81
6.1前言 81
6.2数据库筛选 81
6.3编码功能的实验筛选 82
6.4其他功能的筛选：报告基因 94
第7章 改造与诱变 100
7.1前言 100
7.2基于限制性内切核酸酶的方法 100
7.3寡核苷酸定向诱变 102
7.4选择正确的突变 107
7.5灭活基因 108
第8章 克隆化DNA的应用 114
8.1作为DNA使用 114
8.2RNA的合成 114
8.3蛋白质的合成 115
8.4体外翻译 116
8.5体内表达 116
8.6研究基因功能：报告基因和标签 125
第9章 使用其他生物 128
9.1前言 128
9.2细菌 128
9.3酿酒酵母 133
9.4其他真菌 139
9.5藻类 141
9.6维管植物 142
9.7细胞器转化 149
9.8秀丽隐杆线虫 153
9.9昆虫 153
9.10哺乳动物 158
第10章 实例 172
10.1前言 172
参考文献 177
索引 184