第一章 绪论 1
【知识目标】 1
第一节 分子生物学研究的内容 1
一、分子生物学定义 1
二、分子生物学研究内容 1
第二节 分子生物学的发展历史 2
一、分子生物学的开创时期（1820～1950年） 2
二、近代分子生物学的发展时期（1950～1970年） 3
三、分子生物学技术的深入发展应用时期 4
第三节 分子生物学的发展前景 6
一、分子克隆技术的发展 6
二、人类基因组计划与生物制药产业发展 7
【课后思考】 8
第二章 核酸 9
【知识目标】 9
【能力目标】 9
第一节DNA复制 9
一、DNA的半保留复制 10
二、DNA的双向复制 10
三、DNA复制的半不连续性 10
四、DNA复制体系 11
五、原核生物DNA复制 15
六、真核生物DNA复制 19
七、线粒体DNA复制 24
第二节RNA的种类及其特点 25
一、RNA种类 25
二、RNA的功能特点 26
第三节DNA的损伤（突变）与修复 27
一、基本概念 27
二、突变的意义 27
三、引发突变的因素 28
四、基因突变的分子机制 30
五、DNA损伤的修复 34
六、核酸含量检测 36
【课后思考】 37
第三章 基因转录 38
【知识目标】 38
【能力目标】 38
第一节 基因 38
一、基因的概念 38
二、基因的结构 39
三、原核生物基因组 43
四、真核生物基因组 46
五、病毒基因组 49
第二节 真核细胞的转录 50
一、RNA聚合酶 51
二、转录过程 51
三、转录产物的加工 52
第三节 原核细胞的转录 57
一、RNA聚合酶 57
二、转录单位 58
三、转录过程 58
四、转录产物的加工 59
【课后思考】 60
第四章 蛋白质合成与基因表达调控 64
【知识目标】 64
【能力目标】 64
第一节 蛋白质生物合成的主要物质 64
一、信使RNA（mRNA——翻译的模板）和遗传密码 65
二、转运RNA（tRNA） 68
三、氨基酰-tRNA合成酶（AA-tRNA合成酶） 70
四、核糖体与蛋白质合成场所 71
第二节 原核生物蛋白质合成 73
一、蛋白质生物合成的基本原理 73
二、原核生物蛋白质合成过程 73
三、多核糖体 80
四、原核生物蛋白质合成的抑制剂 81
第三节 真核生物蛋白质合成 82
一、真核生物蛋白质合成的特点 82
二、真核生物蛋白质合成过程 83
三、真核生物蛋白质合成的特异抑制剂 86
第四节 生物合成蛋白质运输及加工修饰过程 87
一、蛋白质运输 87
二、蛋白质的加工和修饰 90
第五节 基因表达调控 95
一、真核生物基因表达调控 95
二、原核生物基因表达调控 98
【课后思考】 101
第五章 分子生物学常用技术及应用 103
【知识目标】 103
【能力目标】 103
第一节PCR技术 103
一、PCR定义 103
二、PCR基本原理 104
三、实现PCR的基本条件 104
四、PCR技术的扩展 110
五、PCR技术的应用 113
第二节 基因工程技术 116
一、基因工程技术原理 116
二、基因工程药物 127
三、基因工程技术开发药物的一般过程 127
四、基因工程药物制造实例——重组人干扰素生产工艺 128
第三节 基因诊断技术 131
一、基因诊断的概念和特点 132
二、基因诊断技术及理论基础 133
三、基因诊断技术在临床上的应用 145
第四节 反义核酸技术 147
一、RNA干扰技术 148
二、反义寡核苷酸 150
第五节 基因敲除技术 150
一、基本原理 150
二、基因敲除技术的操作程序 151
三、基因敲除技术的应用 151
第六节 分子生物学技术在其他领域的应用 152
一、基因改造物种（动物、植物、微生物）及其转基因生物食品 152
二、神奇基因工程分析技术 153
三、分子生物学与环境保护 154
【课后思考】 155
第六章 分子生物实验技术 157
【知识目标】 157
【能力目标】 157
第一节 生物安全实验室常识 157
一、生物安全实验室的设施和设备要求 158
二、实验室生物安全防护 159
第二节 生物安全实验室的特性及安全防护措施 159
一、生物安全实验室的特性 159
二、生物实验室事故的历史与现状 160
三、生物实验室安全防护措施 160
第三节 危害实验室安全的因素和应对方案 161
一、自然灾害 161
二、设备故障 162
三、人为因素 163
第四节 分子生物学实验综合规程与实验操作 166
实验一 仪器设备简介、操作、实验规范训练及实验准备 167
实验二 植物基因组DNA的提取 173
实验三 DNA的琼脂糖凝胶电泳 175
实验四 植物总RNA的提取 176
实验五 聚合酶链反应基因扩增 179
实验六 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PCR差异显示片段的回收） 180
实验七 LB培养基的配制 182
实验八 E.coli感受态细胞的制备 184
实验九 目的产物的T载体的连接与转化 185
实验十 阳性克隆的筛选及序列测定结果分析 186
参考文献 187