第一章 国内外食品微生物检测方法体系及方法确认和证实规定 1
第一节 国内外食品微生物检验体系 1
一、标准方法 1
二、非标准方法 3
第二节 微生物快速检测系统 4
一、微生物快速检测方法概述 4
二、微生物快速检测系统的认可 7
三、微生物快速检测系统的局限性 9
第三节 方法的选择 9
第四节 国内外关于方法确认和证实的规定 10
一、食品微生物检测方法的证实要求 10
二、食品微生物检测方法的确认要求 11
三、食品微生物检测方法确认和方法证实的不同之处 11
四、食品微生物检测方法确认和证实的要求 11
第二章 我国关于食品微生物检测方法的确认技术 13
第一节 我国现行实验室认证认可管理制度 13
一、我国实验室认证机构及相关制度 13
二、我国实验室认可机构及相关制度 14
第二节 我国关于食品微生物检测方法确认的技术规范 14
一、方法确认的基本原则 15
二、定性方法确认试验 15
三、定量方法确认试验 22
第三章 ISO关于食品微生物检测方法的确认技术 25
第一节 概述 25
一、ISO组织结构 25
二、ISO组织的相关职责 26
三、ISO标准的制定程序和体系概况 26
四、与食品微生物检测方法确认与证实相关的ISO标准 26
第二节 ISO 16140《食品和饲料微生物学可替代方法确认规范》 27
一、可替代方法确认和确认的一般准则 27
二、定性方法确认的技术规范 28
三、定量方法确认的技术规范 38
第三节 ISO/TC 34/SC 9 N 593《实验室内方法确认》 41
一、相关术语和定义 41
二、食品与微生物的选择 42
三、定性方法确认 42
四、定量方法确认 43
第四节 ISO 13843《水质微生物检测方法确认指南》 44
一、相关术语和定义 44
二、注意事项 47
三、数学模型 47
四、性能特征的确认和描述 52
五、确认的程序和步骤 53
六、测定特性的设计 54
第五节 实例 55
一、欧洲AFSSA Ploufragan和美国生化控制系统的国际协作测试 55
二、荷兰国家公共卫生研究所组织的一次国际协作测试 57
第四章 AOAC关于食品微生物检测方法的确认技术 60
第一节 概述 60
一、AOAC的食品微生物学分析方法确认程序 60
二、AOAC方法委员会的组织结构 61
第二节 AOAC方法委员会食品及环境表面微生物方法的确认指南 62
一、术语和定义 62
二、定性方法确认的技术方案 64
三、定量方法确认的技术方案 76
四、确证方法确认的技术方案 82
五、安全 85
第三节 其他AOAC方法确认技术 85
一、AOAC同行验证方法确认技术 85
二、AOAC研究所性能测试方法确认技术 86
三、AOAC三种方法确认技术的比较 87
第四节 实例 88
第五章 美国关于食品微生物检测方法的确认技术 92
第一节 概述 92
一、美国环境保护局 92
二、美国食品药品监督管理局 92
三、美国农业部食品安全检验局 94
第二节 美国环境保护局的方法确认 94
一、目的和范围 94
二、方法确认定义 94
三、方法确认的一般准则 94
四、微生物培养检验方法的注意事项 99
五、运行限值和质量控制措施 100
六、参与实验室 101
七、试验材料 102
第三节 美国食品药品监督管理局的方法确认 103
一、目的和范围 103
二、方法开发实验室的一般责任 103
三、方法确认 104
四、进行方法确认的条件 104
五、开发方法的确认标准和指导原则 105
六、标准 106
七、注意事项 108
八、评估 109
九、市售的微生物诊断试剂盒核查、确认标准和指导原则 110
第四节 美国农业部食品安全检验局的方法确认 114
一、目的和范围 114
二、评估检测病原体替代方法的性能特点 114
三、一般注意事项 115
第五节 实例 120
一、定性方法确认 120
二、定量方法确认 124
三、泊松分布 127
四、负二项分布 127
五、未配对样本的皮尔逊-卡方统计计算的例子 127
第六章 加拿大健康署关于食品微生物检测方法的确认技术 129
第一节 概述 129
一、微生物方法确认组织结构 129
二、关于微生物方法确认的政策声明 130
第二节 方法确认的基本概念 130
一、相关定义 130
二、方法的选择 134
第三节 微生物方法确认的通用要求 136
一、预合作研究的相对确认 136
二、转移性研究的要求 140
三、合作研究和比对研究的要求 140
四、申请方法确认提交材料的要求 140
第四节 食品微生物定量方法确认要求 141
一、定量方法提交的通用数据要求 141
二、食品微生物定量方法确认要求 141
三、微生物方法委员会审查内容 142
四、微生物方法委员会技术组审查定量方法报告摘要 143
第五节 食品微生物间接定性方法确认要求 144
一、范围 144
二、应用 144
三、定性方法提交的通用数据要求 144
四、食品微生物定性方法确认要求 145
五、微生物方法委员会审查内容 147
第六节 食品微生物方法修改、撤销指南 148
一、范围 148
二、已发表方法的复审 148
三、确认方法的修改 148
四、确认方法的撤销 149
第七章 新加坡关于食品微生物检测方法的确认技术 150
第一节 概述 150
一、机构介绍 150
二、SAC-SINGLAS的标准体系 151
第二节 微生物检测方法确认指导书 151
一、相关术语和定义 151
二、使用范围 152
三、参考微生物 152
四、检验方法的确认 152
五、致病菌检测 160
第八章 澳大利亚关于食品微生物检测方法的确认技术 161
第一节 概述 161
第二节 定量和定性检测方法的确认和验证准则 162
一、对已确认方法的验证 162
二、方法确认和确认参数 163
三、非常规方法的确认 175
四、主观性方法的确认和验证 176
第三节 AS/NZS 4659:1999《食品微生物检测方法等效性评定指南》 177
一、定性试验、定量试验、证实试验3个子标准相同的要求 178
二、定性试验（AS/NZS 4659.1 :1999） 179
三、定量试验（AS/NZS 4659.2 :1999） 183
四、证实试验（AS/NZS 4659.3 :1999） 186
第九章 食品微生物分子生物学检测方法的确认技术 188
第一节 概述 188
第二节 国外食品微生物PCR检测方法确认原则 189
一、方法文本应涵盖的内容 190
二、方法开发与优化 191
三、PCR数据分析 191
四、方法确认基本原则 196
第三节 ISO 2 2174《食源性病原体PCR检测通用要求和定义》 197
一、相关术语和定义 197
二、检测程序 197
三、测试样品 197
四、实验室通用要求 197
五、仪器和设备 198
六、检测步骤 198
七、评估 199
第四节 加拿大健康署关于食源性微生物PCR检测技术导则 199
一、纲要方法 199
二、PCR技术的应用 200
三、补充资料 200
第五节 美国环保局关于环境样品PCR分析实验室质量保证／质量控制导则 201
一、实验室质量保证 201
二、试剂、试剂盒、引物和酶 204
三、方法开发和验证 204
四、PCR方法中的质量控制样品 211
五、数据记录和评价 216
第六节 动物传染病PCR检测技术确认 216
一、PCR方法确认要素 216
二、应提供的确认材料 219
第七节 实例 219
一、方法开发及实验室内确认 219
二、国际实验室间协作试验 220
第十章 食品微生物免疫学检测方法的确认技术 226
第一节 食品微生物的免疫学检测方法 226
一、食品中微生物的免疫学检测方法的特点 226
二、常用免疫学检测方法介绍 226
三、免疫学检测方法的局限性 228
第二节 食品微生物免疫学检测方法的确认 229
一、我国食品微生物免疫学检测方法的标准采用情况 229
二、食品微生物免疫学检测方法确认需考虑的方法性能 229
第三节 食品微生物免疫学检测方法确认实例 231
一、免疫荧光快速检测方法VIDAS Listeria DUO的确认 231
二、一种检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌的酶联免疫方法的确认 233
三、AOAC官方分析方法2004.06的方法确认 236
第十一章 食品微生物检测方法等效性评估技术 240
第一节 概述 240
第二节 ISO 21187:2004《牛奶 细菌学质量的定量检测 常规方法结果和锚方法结果之间换算关系的建立及验证导则》 241
一、范围 241
二、术语和定义 241
三、原理 241
四、换算关系的建立 242
五、换算关系验证 246
六、测试报告 246
七、其他 247
第三节 ISO 17994:2004《水质 微生物方法之间的等效性建立准则》 249
一、范围 250
二、术语、定义和符号 250
三、原理 251
四、等效性试验的基本要求 251
五、计算 255
六、评价 256
七、检测报告 258
八、其他 258
第四节 ISO/TS 16489:2006《水质 结果等效性确定导则》 262
一、范围 262
二、术语和定义 263
三、不同等效性评价方法概述 263
四、数据量 263
五、数据比较 264
六、两组独立获得的检测结果数据的算术平均数比较 264
七、总体和样本的算术平均数比较 265
八、方差分析 266
九、不同基质样品结果等效性比较 268
十、报告 270
十一、其他 270
第五节 国外等效性验证实例 280
一、验证对象 280
二、验证方法 280
三、验证结果 280
第十二章 食品微生物检测方法的方法偏离及其控制 284
第一节 概述 284
第二节 方法偏离定义 284
一、方法偏离定义 284
二、方法偏离与管理体系的偏离 285
三、方法偏离与不符合项 285
四、方法偏离与非标方法 285
第三节 方法偏离的条件和原则 286
一、允许方法偏离的控制原则 286
二、允许方法偏离的条件 286
第十三章 食品微生物定量检测的测量不确定度评估 287
第一节 概述 287
一、测量不确定度的定义和意义 287
二、测量不确定度的发展历程和相关标准 288
三、适用于微生物领域的有关测量不确定度的政策 288
第二节 ISO/TS 19036:2006《食品微生物学 测量不确定度评估指南》 290
一、范围 290
二、术语和定义 290
三、原理 291
四、总则 292
五、实验室内的再现性标准偏差 293
六、实验室间的再现性标准差计算方法 296
七、实验室间水平测试得出的再现性标准偏差 298
八、测试报告中测量不确定度的表示 298
第三节 微生物测量不确定度评估实例 299
一、试验方法 299
二、不确定度的计算 300
附录1 定性方法单个实验室数据POD和dPOD的计算 301
附录2 定性方法协同研究数据LPOD和dLPOD值的计算 303
附录3 与次级取样试验和初始悬液制备相关的不确定度分量的试验结果 307