第一章 绪论 1
第一节 临床分子诊断学实验须知 1
第二节 临床分子诊断学实验常用仪器介绍 5
第二章 临床分子诊断学基本技术 10
第一节 核酸的分离与纯化 10
实验一 人体外周血细胞基因组DNA的分离与纯化 10
实验二 细菌基因组DNA的分离与纯化 13
实验三 质粒DNA的提取与纯化 15
实验四 人体外周血细胞RNA的分离与纯化 19
第二节 核酸的鉴定与分析 25
实验五 紫外吸收法鉴定核酸的纯度和浓度 25
实验六 荧光法检测核酸的浓度 27
实验七 核酸片段的琼脂糖凝胶电泳 29
实验八 核酸片段的聚丙烯酰胺凝胶电泳 34
第三节 聚合酶链反应 37
实验九 常规PCR检测方法 38
实验十RT-PCR检测方法 42
实验十一 实时荧光定量PCR 45
第四节 核酸分子杂交技术 50
实验十二 核酸标记探针的制备 50
实验十三Southern印迹杂交 57
实验十四Northern杂交技术 60
实验十五 荧光原位杂交技术 65
第五节 核酸测序技术 69
实验十六 双脱氧链终止测序法 70
实验十七 焦磷酸测序法 75
第六节 分子克隆技术 78
实验十八 感受态细胞的制备 78
实验十九DNA重组与转化 81
实验二十 重组子的筛选与鉴定 84
实验二十一 重组基因的诱导表达与检测 87
实验二十二Western-blot技术 91
实验二十三 二维蛋白电泳技术 95
第三章 临床分子诊断学综合性实验 102
第一节 感染性疾病的临床分子诊断 102
实验二十四HBV DNA实时荧光定量PCR检测 102
实验二十五HCV RNA实时荧光定量PCR检测 106
实验二十六 结核分枝杆菌的检测与耐药分析 109
实验二十七 乙肝P区耐药检测 113
实验二十八 人乳头瘤病毒（HPV）基因分型检测 116
第二节 单基因遗传病的临床分子诊断 120
实验二十九 地中海贫血的分子诊断 120
实验三十DMD的分子诊断 124
第三节 肿瘤疾病的临床分子诊断 128
实验三十一PCR-SSCP检测p53抑癌基因突变 128
实验三十二PCR-RFLP检测K-ras癌基因突变 133
第四节 个体遗传标记的临床分子诊断 137
实验三十三 荧光标记复合STR分型 138
实验三十四H LA基因分型 141
附录A临床分子诊断学实验常用试剂与缓冲液的配制 145
彩图 151