第一篇 生物化学技术原理与实验 1
第一章 基本操作与试剂的配制 1
第一节 实验器皿的洗涤 1
第二节 试剂的配制 3
第三节 试剂的分类与保存 13
第二章 离心技术 16
第三章 层析分离技术原理 22
第一节 层析的基本原理 22
第二节 层析方法 23
第四章 质谱分析 30
第一节 质谱基本原理及质谱仪 30
第二节 质谱中的主要离子及质谱解析 36
第三节 层析-质谱联用技术 39
第五章 电泳技术 41
第一节 概述 41
第二节 电泳的基本原理 42
第三节 区带电泳技术 46
第四节 染色方法 61
第六章 光谱分析技术 65
第一节 分光光度法 65
第二节 荧光光谱分析法 70
第七章 生物化学实验方法 72
实验一 血红蛋白吸收曲线的绘制 72
实验二 茚三酮反应与蛋白质等电点的测定 73
实验三 蛋白质的沉淀 76
实验四 肝组织中核酸的分离与鉴定 78
实验五 pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 81
实验六 丙二酸对琥珀酸脱氢酶活性的影响 83
实验七 血清胆固醇测定 84
实验八 维生素C的测定 86
实验九 邻甲苯胺法测定血糖浓度 88
实验十 醋酸纤维薄膜电泳观察严重肝硬化病人与正常人血清蛋白的区别 90
实验十一 血清丙氨酸转氨酶活性检测 93
实验十二 平板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 95
实验十三 核黄素荧光定量测定 97
实验十四 麻杏石甘汤对流感病毒神经氨酸酶活性的影响 98
实验十五 碱性磷酸酶米氏常数的测定(双倒数法) 100
实验十六 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 102
实验十七 乳酸脱氢酶及其辅酶的作用 103
实验十八 亲和层析纯化胰蛋白酶 105
第二篇 分子生物学技术原理与实验 109
第一章 聚合酶链反应技术原理 109
第一节 PCR技术的基本原理 109
第二节 PCR反应体系 111
第三节 PCR过程与应用 114
第二章 重组DNA技术原理 119
第一节 重组DNA技术中的工具 119
第二节 DNA重组的过程 123
第三章 核酸分子杂交技术 128
第一节 核酸的变性、复性与核酸探针 128
第二节 核酸分子杂交 132
第四章 生物大分子相互作用技术原理 135
第五章 分子生物学实验方法 141
实验一 大肠杆菌感受态的制备及质粒转化 141
实验二 外周血白细胞DNA提取(微量法) 143
实验三 肝组织总RNA的提取与电泳鉴定 145
实验四 GAPDH mRNA的逆转录PCR 146
实验五 从琼脂糖凝胶中回收目的DNA 148
实验六 质粒DNA的微量快速提取 149
实验七 利用PCR产物构建真核生物表达载体 151
实验八 克隆化基因在大肠杆菌的诱导表达 154
实验九 细胞培养实验 156
实验十 SDS-PAGE测定蛋白质分子量 157
实验十一 蛋白质的Western印迹实验 162
实验十二 DNA印迹(Southern Blot)杂交实验 164
实验十三 荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒含量 168
实验十四 琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 171
实验十五 染色质免疫沉淀实验(ChIP) 173
实验十六 酵母双杂交系统确定蛋白质相互作用实验 175
实验十七 RNA干扰实验 178
实验十八 电泳迁移率实验 181
实验十九 荧光素酶报告检测TRAF2对NFkB活化的影响 184