第一章 荧光定量PCR技术及其应用 1
第一节 定量PCR技术产生及其发展 1
一、定量PCR技术产生背景 1
二、定量PCR技术现状及进展 2
三、定量PCR技术的展望 4
第二节 荧光定量PCR的原理与特点 5
一、荧光定量PCR定量的理论模式 6
二、荧光阈值和Ct值 6
三、荧光定量PCR技术的特点 7
第三节 荧光定量PCR的类型 9
一、荧光内参染料法 9
二、序列特异性探针 11
三、绝对定量与相对定量 15
四、标准曲线的制作 17
第四节 防污染的控制策略 18
一、PCR污染的原因 18
二、污染的监测 19
三、防范污染的方法 19
第五节 荧光定量PCR技术的应用 20
一、肿瘤相关基因的检测 20
二、转基因检测 22
三、基因突变检测 25
四、病毒检测 27
五、病原菌检测 32
六、寄生虫检测 36
七、基因表达的相对定量分析 37
第二章 环介导等温扩增技术及其应用 43
第一节 环介导等温扩增法的原理 43
第二节 引物设计及操作步骤 45
一、引物设计 45
二、反应体系 45
三、结果判断 46
第三节 环介导等温扩增技术的应用 46
一、细菌检测 47
二、病毒检测 47
三、寄生虫检测 48
第三章 焦磷酸测序技术及其应用 50
第一节 焦磷酸测序技术的产生及其发展 50
一、测序技术的发展现状 50
二、测序技术的发展瓶颈 52
三、焦磷酸测序技术的产生及发展 53
四、焦磷酸测序技术的前景 60
第二节 焦磷酸测序技术的原理及流程 62
一、焦磷酸测序技术的一般原理 62
二、焦磷酸测序技术的一般流程 63
三、焦磷酸测序反应过程的具体原理 66
第三节 焦磷酸测序技术引物的设计及结果分析 67
一、利用软件进行引物设计的流程 67
二、焦磷酸测序的结果分析 69
第四节 焦磷酸测序技术的应用 72
一、焦磷酸测序技术在各领域中的应用 72
二、焦磷酸测序技术的深度测序优势 74
第四章 变性高效液相色谱及其应用 78
第一节 变性高效液相色谱的产生及其发展 78
第二节 变性高效液相色谱的分析原理 80
一、长度多态性分析原理 80
二、单核苷酸多态性分析原理 80
三、基因型多态性分析原理 81
四、温度工作原理 81
第三节 变性高效液相色谱实验设计及影响要素 83
一、变性高效液相色谱推荐优化设计 83
二、DHPLC基本操作流程 88
第四节 变性高效液相色谱的应用 91
一、DHPLC的应用技术 91
二、DHPLC的应用领域 96
第五节 变性高效液相色谱的标准化管理 111
第五章 变性梯度凝胶电泳技术及其应用 117
第一节 变性梯度凝胶电泳技术的原理 117
一、变性梯度凝胶电泳的衍生技术 118
二、PCR-DGGE方法的优点 119
第二节 DGGE技术的引物设计 120
一、引物设计原则 120
二、Primer Premier 5.0使用简介 121
三、Oligo 6.2 2使用简介 124
四、DGGE/TGGE引物设计注意事项 126
第三节 DGGE和TGGE技术的应用 126
一、在食品微生物研究中的应用 126
二、在口腔微生物研究中的应用 130
三、在土壤微生物研究中的应用 130
四、在环境微生物研究中的应用 132
五、在其他领域中的应用 133
第六章 肽核酸探针技术及其应用 138
第一节 肽核酸探针技术的产生及发展 138
一、肽核酸探针技术的产生 138
二、肽核酸探针技术的迅速发展历程 139
第二节 肽核酸探针技术的原理 141
第三节 肽核酸相探针技术的引物和探针设计 143
一、PNA探针的设计原则 143
二、PNA探针的设计方案和流程 144
第四节 肽核酸探针技术的应用 146
一、PNA探针技术在微生物检测领域的应用 146
二、PNA探针技术在疾病诊疗中的应用 148
三、PNA在分子生物学领域中的应用 150
四、PNA探针在生物传感器检测中的应用 154
五、PNA在其他领域的应用 155
六、PNA探针发展前景 156
第七章 基因芯片 159
第一节 基因芯片技术介绍 159
第二节 基因芯片技术的原理及操作流程 161
一、基本原理 161
二、基本分类 162
三、基因芯片的制作 163
四、基因芯片的检测方法 165
五、扫描阅读 166
第三节 基因芯片技术的应用 166
一、在基础研究中的应用 166
二、在疾病诊断中的应用 168
三、基因芯片在药物研究中的应用 170
四、在环境保护和监测方面的应用 171
五、基因芯片技术存在的问题与展望 171