1绪论 1
1.1细胞工程概述 2
1.1.1细胞工程概念 2
1.1.2细胞工程基本内容 3
1.2细胞工程发展简史 7
1.2.1探索期 7
1.2.2奠基期 8
1.2.3蓬勃发展期 8
1.3细胞工程发展前景 9
1.3.1细胞工程理论发展前景 9
1.3.2细胞工程技术发展前景 10
1.3.3细胞工程应用前景 10
1.4细胞工程学习方法 10
2细胞工程理论基础 12
2.1细胞全能性 13
2.1.1细胞全能性定义 13
2.1.2细胞全能性研究历史 14
2.1.3细胞全能性应用 15
2.2细胞分化与脱分化 15
2.2.1细胞分化 15
2.2.2细胞脱分化 16
2.3细胞融合 17
2.3.1细胞融合的概念 17
2.3.2细胞融合的基本原理 17
2.4合成生物学与人工细胞 18
2.4.1合成生物学概述 18
2.4.2合成生物学关键技术 18
2.4.3人工细胞 19
3细胞工程实验基础 21
3.1细胞工程实验室的规划设计及常用仪器设备 22
3.1.1基本实验室 22
3.1.2辅助实验室 24
3.2无菌操作技术 25
3.2.1培养用品的清洗 25
3.2.2灭菌原理与方法 25
3.2.3无菌操作技术 26
3.2.4无菌操作技术的注意事项 27
3.2.5污染的检测与控制 27
3.3培养基的设计与优化 28
3.3.1植物细胞培养基的设计与优化 28
3.3.2动物细胞培养基的设计与优化 29
4细胞组织培养技术 32
4.1植物细胞组织及器官培养技术 33
4.1.1植物细胞和组织培养 34
4.1.2植物器官培养 36
4.1.3植物细胞组织开放式培养 38
4.2动物细胞组织及器官培养技术 38
4.2.1动物细胞培养 39
4.2.2动物组织培养 46
4.2.3动物器官培养 48
5细胞融合技术 50
5.1细胞融合技术概述 51
5.1.1细胞融合方法 51
5.1.2融合细胞的筛选 54
5.2细胞融合技术发展历程 55
5.3动物细胞融合——杂交瘤技术 56
5.3.1杂交瘤技术概述 56
5.3.2单克隆抗体制备基本原理 57
5.3.3单克隆抗体制备基本流程 58
5.3.4杂交瘤细胞的筛选 65
5.3.5单克隆抗体细胞株的建立 66
5.4植物细胞融合技术 66
5.4.1植物原生质体制备 67
5.4.2植物原生质体培养 69
5.4.3植物原生质体融合 71
5.4.4植物体细胞杂种植株的鉴定 72
6细胞拆合与克隆技术 74
6.1细胞拆合 75
6.1.1细胞拆合技术发展概况 75
6.1.2细胞拆合技术 76
6.1.3细胞器重组 78
6.1.4转染色体核移植技术 79
6.2克隆技术 80
6.2.1克隆的概念和分类 80
6.2.2克隆技术研究进展 81
6.2.3 胚胎分割技术 86
6.2.4哺乳动物克隆 89
7干细胞技术 97
7.1干细胞概述 98
7.1.1干细胞定义 98
7.1.2干细胞分类 99
7.2干细胞制备方法 100
7.2.1胚胎干细胞制备方法 100
7.2.2成体干细胞制备方法 104
7.2.3诱导多能干细胞制备方法 107
7.2.4肿瘤干细胞制备方法 109
7.3干细胞研究进展 111
7.3.1胚胎干细胞研究进展 111
7.3.2成体干细胞研究进展 112
7.3.3 诱导多能干细胞研究进展 113
7.4干细胞临床应用 114
7.4.1干细胞及其衍生产品上市情况 114
7.4.2干细胞治疗的困境和对策 114
8植物细胞大规模培养生产天然活性物质 119
8.1植物细胞大规模培养生产天然活性物质概述 121
8.1.1植物细胞大规模培养概念 121
8.1.2植物细胞大规模培养生产天然活性物质特点 121
8.2植物细胞大规模培养生产天然活性物质的关键技术 121
8.2.1植物细胞系建立 121
8.2.2高产细胞系选育 122
8.2.3高产细胞系保存 122
8.2.4植物细胞放大培养技术及工艺 123
8.2.5产物分离纯化 124
8.3植物细胞大规模培养生产天然活性物质的调控 124
8.3.1植物细胞大规模培养的诱导表达调控 124
8.3.2植物细胞响应外界刺激积累次生代谢物合成的信号转导途径 125
8.3.3植物天然活性物质合成的分子调控机制 125
8.4植物细胞大规模培养生产贵重药物应用实例 126
8.4.1紫杉醇生物合成的代谢调控 126
8.4.2人参皂苷生物合成和次生代谢调控 129
9植物组织快速繁殖生产试管苗 132
9.1植物快速繁殖的概述 134
9.1.1植物快速繁殖的概念 134
9.1.2植物快速繁殖的特点 134
9.2植物脱毒培养技术 134
9.2.1植物脱毒和快速繁殖的意义 134
9.2.2植物脱毒培养的方法及原理 135
9.2.3植物脱毒苗的鉴定 135
9.3人工种子 136
9.3.1人工种子的概念 136
9.3.2人工种子各构成部分的特点 136
9.3.3人工种子的储藏 137
9.3.4人工种子的应用 137
9.4植物组织快速繁殖生成试管苗技术 138
9.4.1植物试管苗形成途径 138
9.4.2试管苗的形成过程 139
9.4.3试管苗形成过程存在的问题与对策 141
9.4.4试管苗的应用 142
9.5植物组织快速繁殖生产试管苗的应用实例 143
9.5.1经济作物马铃薯的快速繁殖 143
9.5.2药用植物金线莲的快速繁殖 144
9.5.3景观植物香石竹的快速繁殖 145
10植物细胞工程育种 147
10.1植物体细胞杂交育种 149
10.1.1植物体细胞杂交概述 149
10.1.2植物体细胞杂交育种过程 150
10.1.3植物体细胞杂交育种的应用 152
10.2多倍体与单倍体育种 154
10.2.1多倍体育种 154
10.2.2单倍体育种 155
10.3分子标记辅助育种 158
10.3.1分子标记辅助育种的概念与意义 159
10.3.2用于分子标记辅助育种的分子标记 159
10.3.3分子标记在植物育种中的应用 165
10.4体细胞突变体育种 165
10.4.1体细胞突变体 165
10.4.2体细胞突变体育种过程 167
10.4.3体细胞无性系变异的应用 168
10.4.4体细胞无性系变异育种存在的主要问题 169
10.5基于细胞工程的植物转基因育种 169
11动物细胞工程制药 172
11.1动物细胞培养生产疫苗 173
11.1.1疫苗生产用细胞基质及其特性 174
11.1.2疫苗生产用新细胞系／株建立技术 177
11.1.3动物细胞培养生产疫苗进展 178
11.2动物细胞工程药物筛选 178
11.2.1药物筛选概述 178
11.2.2细胞工程药物筛选技术 179
11.2.3高通量细胞筛选模型 181
11.2.4高通量细胞筛选新技术 182
11.3单克隆抗体的应用 182
11.3.1单克隆抗体在医学检验中的应用 182
11.3.2单克隆抗体在农牧业及食品安全中的应用 183
11.3.3单克隆抗体药物在疾病治疗中的应用 183
12胚胎移植与试管动物 186
12.1受精与胚胎发育 187
12.1.1受精 187
12.1.2胚胎发育 189
12.2胚胎移植 192
12.2.1概述 192
12.2.2发情控制技术 192
12.2.3 胚胎移植 193
12.2.4 胚胎移植的影响因素 197
12.3体外受精与试管动物 197
12.3.1体外受精技术在动物生产中的重要性 198
12.3.2卵母细胞的体外成熟 198
12.3.3精子获能 200
12.3.4体外受精 201
13转基因动物及其应用 204
13.1转基因动物概述 206
13.1.1转基因动物研究发展简史 206
13.1.2转基因动物的效率 207
13.1.3动物转基因的结构 208
13.1.4动物转基因的表达特性 209
13.1.5转基因动物的安全性 209
13.2转基因动物生物反应器 210
13.2.1转基因动物生物反应器的类型 210
13.2.2转基因动物生物反应器制备的基本流程 213
13.2.3转基因动物生物反应器存在的问题及展望 213
13.3转基因动物模型 214
13.3.1转基因动物制备方法 215
13.3.2动物转基因载体分类 218
13.3.3转基因动物的鉴定 219
13.3.4人类疾病转基因动物模型 221
13.3.5转基因动物的研究 223
13.4转基因动物的应用 225