第一部分 理论和技术原理 2
第一章 基因和基因技术基础 2
第一节 基因和基因技术的发展 2
第二节 基因和基因组基础 10
第三节 生物信息学工具 37
第四节 基因操作中的模式生物 47
复习题 50
第二章 基本技术和工具 51
第一节 DNA/RNA的提取 52
第二节 电泳技术 61
第三节 特异的检测技术 67
第四节 工具酶 82
第五节 遗传转化 88
复习题 89
第三章 离体基因扩增 91
第一节 聚合酶链式反应 91
第二节 PCR反应的组成和设计 93
第三节 PCR反应循环及参数 98
第四节 PCR中的几个问题 99
第五节 各种PCR扩增及其应用 102
第六节 其他核酸扩增技术 117
复习题 123
第四章 重组技术 124
第一节 特异的DNA内切酶及其特点 125
第二节 连接和重组 134
第三节 同源重组技术 145
复习题 151
第五章 质粒载体 153
第一节 质粒生物学和质粒载体 153
第二节 质粒载体的功能元件 158
第三节 表达载体 165
复习题 174
第六章 噬菌体衍生的载体 175
第一节 λ噬菌体 175
第二节 λ噬菌体载体 178
第三节 λ噬菌体衍生的质粒载体——柯斯质粒 181
第四节 单链DNA载体 183
第五节 P1噬菌体衍生的载体 186
复习题 189
第七章 基因克隆 190
第一节 基因组DNA文库 191
第二节 cDNA文库 195
第三节 克隆筛选的策略 201
复习题 215
第八章 DNA测序 216
第一节 双脱氧终止法DNA测序 218
第二节 DNA测序的自动化 221
第三节 基因组测序 223
第四节 新一代测序技术 228
第五节 测序在研究中的应用 233
复习题 235
第九章 离体突变和基因创建 236
第一节 DNA和基因的化学合成 236
第二节 离体突变 237
第三节 分子进化 252
复习题 259
第十章 蛋白质组学技术原理 260
第一节 蛋白质样本制备 260
第二节 复杂样本的蛋白质分离 263
第三节 蛋白质酶解及肽段分离 266
第四节 肽混合物质谱分析 269
第五节 定量蛋白质组学研究技术 274
第六节 蛋白质组学数据分析技术 280
复习题 290
第十一章 酵母和动物基因操作 291
第一节 酿酒酵母基因操作 292
第二节 毕赤酵母和昆虫细胞表达系统 297
第三节 动物细胞培养和转染 300
第四节 转基因动物 313
第五节 动物基因改造的应用 316
复习题 319
第十二章 植物转基因 321
第一节 转基因载体和外源基因导入技术 322
第二节 植物转基因的选择和筛选标记 332
第三节 转基因结构和表达 335
第四节 基因开发和转基因植物 342
复习题 348
第二部分 实验操作 352
第一单元 基本技术 352
实验一 生物信息学实验：基因检索和表达克隆设计 352
实验二 实验室基本操作 355
实验三 大肠杆菌的培养和分离 360
实验四 蛋白质SDS-PAGE电泳 362
实验五 质粒DNA的分离 366
实验六 基因组DNA提取 367
实验七 总RNA的提取 371
实验八 聚合酶链式反应（PCR）扩增和电泳观察 372
实验九 质粒DNA酶切及凝胶电泳 374
实验十 DNA片段的分离纯化 376
实验十一 DNA末端的连接 377
实验十二 感受态细胞的制备 378
实验十三 大肠杆菌的遗传转化 379
实验十四 蛋白质二维电泳分离及胶内蛋白质点质谱分析 380
实验十五 SSR分子标记 385
第二单元 综合实验 389
综合实验一 EGFP蛋白质的克隆表达 389
综合实验二 植物转基因 394
综合实验三 动物细胞基因操作 398
附录 403
一、常用生物信息学网址 404
二、常用核酸、蛋白质数据 406
三、度量衡 407
四、基因的命名 408
五、糖类的结构 409
六、MS培养基 410
参考文献 411
索引 413