第一篇 观察细胞、细胞器和大分子的技术 3
第一章 显微镜技术 3
第一节 光学显微镜 5
第二节 激光扫描共聚焦显微镜 8
第三节 超高分辨率荧光显微镜技术 11
第四节 活细胞荧光工作站 14
第五节 电子显微镜 16
第六节 原子力显微镜 20
第二章 细胞化学技术 23
第一节 酶细胞化学技术 25
第二节 免疫细胞化学技术 27
第三节 原位杂交技术 31
第二篇 操作细胞及其大分子的技术 37
第三章 细胞结构成分的离心分离技术 37
第一节 差速离心法 40
第二节 密度梯度离心法 42
第四章 细胞培养技术 45
第五章 细胞工程技术 52
第一节 细胞融合技术 53
第二节 核酸分子导入细胞的技术 54
第三篇 分析细胞及其大分子的技术 63
第六章 流式细胞术 63
第一节 分析式流式细胞术 64
第二节 分选式流式细胞术 75
第七章 组织和细胞显微图像分析技术 78
第一节 组织和细胞几何参数的分析 80
第二节 荧光和染色的信号强度和阳性面积分析 80
第八章 定量分析mRNA的技术 83
第一节 RT-PCR技术 84
第二节 real-time PCR技术 87
第九章 分析蛋白质的技术 93
第一节 免疫印迹 94
第二节 免疫共沉淀 97
第三节 荧光共振能量转移(FRET)技术 100
第四篇 分析细胞基本活动的综合技术 109
第十章 检测细胞增殖 109
第一节 MTT法和CCK8法 109
第二节 BrdU参入法 111
第三节 细胞周期分析 113
第十一章 检测细胞衰老和死亡 116
第一节 衰老相关的β-半乳糖苷酶染色 117
第二节 Annexin V标记 118
第三节 TUNEL标记 120
第十二章 检测细胞自噬 123
第一节 自噬过程和水平的电镜分析 124
第二节 LC3-Ⅱ水平和LC3点状定位的检测 127
第三节 自噬流的评估 130
第十三章 检测细胞黏附和迁移 134
第一节 细胞-基质黏附实验 134
第二节 Transwell实验 136
第三节 划痕实验 137
第五篇 分析细胞信号转导的综合技术 143
第十四章 分析蛋白质修饰和活性 143
第一节 分析蛋白质修饰的方法(以磷酸化和SUMO化修饰为例) 143
第二节 分析酶活性的方法(以激酶和SUMO蛋白酶为例) 147
第三节 分析转录因子活性的方法 150
第十五章 干预基因的表达和功能 156
第一节 野生型、截短体或突变体基因的强制过度表达 156
第二节 基因沉默和敲除 160
第十六章 分析蛋白质相互作用来验证蛋白质的功能和上下游关系 164
第一节 基因表达干预下的免疫共沉淀分析 164
第二节 基因表达干预下的蛋白质定位和相互作用分析 166