实验目的与要求 1
实验室规则 1
实验内容和方法 2
实验报告 3
实验考核 3
二、无菌室内设备和用具 7
一、无菌室建筑要求 7
第一节 无菌室简介 7
第一章 微生物学实验室简介 7
第一部分 实验技术 7
上篇 医学微生物学实验 7
三、无菌室的消毒灭菌 8
四、无菌室工作规程 8
五、无菌室空气污染情况的检验 8
第二节 微生物学实验室常用的器皿 9
一、器皿的种类 9
二、玻璃器皿的清洗方法 12
三、玻璃器皿灭菌前的准备 14
第三节 微生物学实验室常用仪器 16
一、显微镜 16
四、玻璃仪器使用时的注意事项 16
二、普通电冰箱 18
三、水浴箱 18
四、恒温培养箱 18
六、血清凝固器 19
七、干热灭菌器（烤箱） 19
五、高压灭菌器 19
八、超净工作台 20
第二章 微生物的形态观察 21
第一节 细菌的形态观察 21
一、显微镜油镜使用法 21
二、细菌不染色标本检查法 23
三、细菌染色标本检查法 24
四、细菌特殊结构染色法 27
五、细菌的基本形态和特殊结构观察 30
六、放线菌的形态结构观察 31
七、细菌大小的测定 32
第二节 真菌的形态观察 34
一、真菌形态结构观察 35
二、常见浅部真菌镜检 35
三、常见深部真菌镜检 37
四、白假丝酵母菌芽管及厚膜孢子形成试验 38
第三节 病毒的形态观察 38
一、观察病毒形态的电镜照片 38
二、观察病毒包涵体形态 39
三、噬菌斑的培养观察 40
第三章 微生物培养技术 41
第一节 细菌的培养 41
一、常用培养基制备 41
二、细菌的分离培养与接种技术 42
三、细菌在不同培养基上生长状态的观察 44
四、平板菌落计数 44
一、真菌培养基简介 45
二、真菌培养方法 45
第二节 真菌的培养 45
三、真菌的菌落观察 46
第三节 病毒的培养 47
一、病毒的动物接种法 47
二、鸡胚培养法 48
三、组织培养法 50
四、细胞病变观察及病毒量测定 51
五、空（蚀）斑形成试验 53
一、热力灭菌 54
第一节 物理学消毒灭菌法 54
第四章 消毒灭菌技术 54
二、过滤除菌 56
三、紫外线杀菌 57
第二节 化学消毒灭菌法 58
一、几种常用消毒剂的抑菌试验 58
二、酚系数的测定 59
三、不同浓度酒精的杀菌试验 60
第五章 抗菌药物敏感性试验 61
一、纸片扩散法 61
二、稀释法 62
三、E试验 64
四、联合抑菌试验 66
第六章 细菌代谢产物的检测 69
一、单糖发酵实验 69
二、IMViC试验 69
三、H2S试验 71
四、尿素酶实验 71
五、内外毒素的检测 72
一、细菌抗血清的制备（以伤寒免疫血清的制备为例） 74
第七章 细菌血清学诊断技术 74
二、沉淀反应（毛细管法） 75
三、凝集反应 76
四、中和试验 79
五、荚膜肿胀试验 79
第八章 动物实验 81
一、实验动物的分类 81
二、实验动物的选择 82
三、实验动物接种法 83
四、动物采血技术 86
一、微生物DNA的提取 88
第九章 分子生物学实验技术 88
二、PCR技术 92
三、核酸杂交技术 94
四、核酸指纹图谱技术 95
五、生物芯片技术 95
六、基因克隆技术 97
实验一 化脓性球菌的病原学检测 100
一、常见化脓性球菌的形态染色性观察 100
第十章 基本实验 100
第二部分 实验项目 100
二、常见化脓性球菌的培养特征观察 101
三、血浆凝固酶试验 101
四、触酶试验 102
五、耐热核酸酶试验 103
六、抗链球菌溶血素“O”试验（ASO） 103
七、胆汁溶菌试验 104
实验二 肠道杆菌病原学检测 105
八、氧化酶试验 105
二、肠道杆菌的培养特征观察 106
三、肠道杆菌的生化反应 106
一、肠道杆菌的形态染色性观察 106
四、肥达（Widal）试验 107
实验三 厌氧性细菌实验 109
一、常见厌氧芽胞梭菌的形态染色性 110
二、厌氧培养法及常见厌氧芽胞梭菌的培养特征 110
三、“汹涌发酵”试验 111
五、脂酶试验 112
四、卵磷脂酶及奈格尔试验 112
六、产气荚膜梭菌动物试验 113
七、破伤风毒素抗毒素中和试验 113
实验四 呼吸道感染细菌实验 114
一、常见呼吸道感染菌株形态染色性观察 114
二、结核分枝杆菌和白喉棒状杆菌培养特征观察 115
三、分枝杆菌菌种鉴定方法 115
四、结核菌素试验 116
六、流感嗜血杆菌卫星试验 117
五、白喉棒状杆菌Elek平板毒力试验 117
一、其他微生物形态染色性观察 118
实验五 其他微生物实验 118
二、其他微生物的培养特征观察 119
三、炭疽杆菌串珠实验 119
四、放线菌的硫磺颗粒检查法 120
五、梅毒螺旋体RPR试验 120
六、溶脲脲原体脲酶试验 121
七、外斐（Weil-Felix）反应 122
一、流感病毒的血凝与血凝抑制试验 123
实验六 常见病毒检测技术 123
二、实时荧光定量RT-PCR检测SARS-Cov病毒 126
三、ELISA间接双抗体夹心法检测轮状病毒 127
四、乙型肝炎病毒“两对半”的检测 128
五、胶体金标记抗体一步法检测HBsAg 131
六、HIV的实验室诊断 132
第十一章 提高型实验 137
实验一 脓汁标本病原微生物的分离鉴定 137
实验二 痰标本病原微生物的分离鉴定 139
实验三 尿液标本病原微生物的分离鉴定 142
实验四 生殖道标本病原微生物的分离鉴定 144
实验五 粪便标本病原微生物的分离鉴定 146
实验六 血液标本病原微生物的分离鉴定 149
实验七 脑脊液标本病原微生物的分离鉴定 151
实验八 组织标本病原微生物的分离鉴定 152
实验九 细菌耐药质粒的提取与转化 156
实验十 鲜奶中微生物的检测 157
实验一 医院空气中细菌种类的调查及药敏试验 160
第十二章 研究创新型实验 160
实验二 医院氧气湿化瓶污染情况的调查 161
实验三 结核分枝杆菌临床分离株耐药性分析 161
实验四 溶菌酶的杀菌效果探讨 162
第十三章 病例分析 164
病例一 164
病例二 164
病例三 164
病例五 165
病例四 165
病例六 166
病例七 166
病例八 166
病例九 167
附录 168
附录一 实验设计 168
附录二 实验室常见意外事故的处理 169
附录三 常用染色液的配制和染色方法 170
附录四 常用培养基的配制 174
附录五 实验室常用试剂及溶液配制 183
附录六 菌种保藏 186
下篇 人体寄生虫学实验 193
第十四章 实验室仪器器材的使用和保养 193
一、显微镜的使用和保养 193
二、测微尺的使用 196
四、手持放大镜的使用 197
五、其他仪器器材的使用和保养 197
三、体视显微镜的使用 197
第十五章 基本实验 198
医学蠕虫学 198
第一节 线虫（Nematode） 198
一、似蚓蛔线虫（蛔虫）（Ascaris lumbricoides） 198
二、毛首鞭形线虫（鞭虫）（Trichuris trichiura） 199
三、蠕形住肠线虫（蛲虫）（Enterobius vermicularis） 200
四、十二指肠钩口线虫（Ancylostoma duodenale）和美洲板口线虫（Necator americanus） 201
六、班氏吴策线虫（Wuchereria bancrofti）和马来布鲁线虫（Brugia malayi）（丝虫） 204
五、旋毛形线虫（旋毛虫）（Trichinella spiralis） 204
七、其他线虫 206
粪类圆线虫（Strongyloides stercoralis） 206
美丽筒线虫（Gongylonema pulchrum） 206
结膜吸吮线虫（Thelazia callipaeda） 207
颚口线虫（Gmathostoma） 207
东方毛圆线虫（Trichostrongylus orientalis） 207
第二节 棘头虫 207
猪巨吻棘头虫 207
一、华支睾吸虫（肝吸虫）（Clonorchis sinensis） 208
第三节 吸虫（Trematode） 208
二、布氏姜片吸虫（姜片虫）（Fasciolopsis buski） 210
三、卫氏并殖吸虫（Paragonimus westermani）和斯氏狸殖吸虫（Pagumogonimus skrjabini） 211
四、日本裂体吸虫（日本血吸虫）（Schistosoma japonicum） 213
五、其他吸虫 215
肝片形吸虫（Fasciola hepatica） 215
异形吸虫（Heterophyia trematodes） 215
第四节 绦虫（cestode） 216
一、链状带绦虫（猪带绦虫）（Taenia solium）与肥胖带绦虫（牛带绦虫）（Taenia saginata） 216
棘口科（Echinostomatidae）吸虫 216
二、细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus） 218
三、微小膜壳绦虫（Hymenolepis nana）与缩小膜壳绦虫（Hymenolepis diminuta） 219
四、曼氏迭宫绦虫（Spirometra mansoni） 220
五、其他绦虫 221
多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis） 221
犬复孔绦虫（Dipylidium caninum） 221
西里伯瑞列绦虫（Raillietina celebensis） 221
第一节 叶足虫 222
一、溶组织内阿米巴（Entarnoeba histolytica）与结肠内阿米巴（Entarnoeba coli） 222
医学原虫学 222
二、致病性自由生活阿米巴 224
第二节 鞭毛虫 224
一、蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia） 224
二、阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis） 225
三、杜氏利什曼原虫（Leishmania donovani） 226
第三节 孢子虫 227
一、疟原虫（malaria parasite） 227
刚地弓形虫（Toxoplasma gondii） 229
二、机会致病原虫（Opportunistic protozoan） 229
肺孢子虫（Pneumocystis） 230
微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum） 230
第四节 纤毛虫（结肠小袋纤毛虫） 230
医学节肢动物 231
第一节 昆虫 231
一、蚊（Mosquito） 231
二、蝇（Fly） 233
三、虱（Louse） 235
五、臭虫（Bed-bugs） 236
四、蚤（Flea） 236
六、蜚蠊（Cockroach） 237
第二节 蜱螨 238
一、蜱（Ixodidea） 238
二、螨（Miter） 239
疥螨（Itch mite） 239
蠕形螨（Follicle mite） 239
粉螨（Acaridae） 240
尘螨（Dust mite） 240
第十六章 提高型实验 242
一、蛔虫生活史过程的验证 242
二、巴门氏钩蚴分离法 242
三、钩蚴培养法 242
四、旋毛虫病动物模型的建立 243
五、马来丝虫幼虫在中间宿主体的发育 243
六、线虫标本的制作 243
八、肺吸虫病动物模型的建立 244
九、解剖肺吸虫病试验动物 244
七、肺吸虫囊蚴分离法 244
十、肺吸虫病的免疫学诊断 245
十一、肺吸虫流行病学的生物宿主现场调查 245
十二、血吸虫病动物模型的建立 246
十三、快速酶联免疫吸附试验 246
十四、日本血吸虫虫卵沉淀、孵化法 247
十五、肠道寄生虫病原学检查 248
十六、鼠疟模型的建立 249
二、肺孢子虫大鼠模型的建立及肺孢子虫卵囊的检查方法 250
一、日本血吸虫病兔或鼠解剖及病理变化观察 250
第十七章 研究创新型实验 250
第十八章 病例分析 252
线虫 252
病例一 252
病例二 253
病例三 254
病例四 255
病例五 255
病例六 256
吸虫 256
病例七 257
病例八 258
病例九 258
病例十 259
绦虫 259
病例十一 259
原虫 260
病例十二 260
病例十三 261
病例十四 262
病例十五 262
病例十六 263
病例十七 264
病例十八 265
节肢动物 266
病例十九 266
病例二十 266
病例二十一 267