绪论 1
第一章 生物化学与分子生物学实验基本仪器和基本操作 3
第一节 移液器的选择原则及使用方法 3
第二节 DNA热循环仪的工作原理及使用方法 6
第三节 离心机的工作原理及使用方法 8
第二章 光谱技术 11
第一节 光谱分析的基础知识 11
第三节 吸收光谱分析技术 13
第三节 其他光谱分析技术 19
实验一 血红蛋白及其衍生物的吸收光谱分析 21
实验二 蔬菜中维生素C含量的测定 24
实验三 葡萄糖氧化酶法测定血糖含量 26
第三章 电泳技术 28
第一节 电泳技术的基本原理 28
第二节 醋酸纤维素薄膜电泳 30
第三节 琼脂糖凝胶电泳 32
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 36
第五节 其他电泳技术 43
实验四 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳(微量法) 46
实验五 DNA琼脂糖凝胶电泳 48
实验六 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 50
第四章 色谱技术 53
第一节 凝胶层析 54
第二节 离子交换层析 58
第三节 亲和层析 64
第四节 高效液相色谱 65
实验七 葡聚糖G-25凝胶过滤去盐 66
实验八 微量柱色谱——DE-52分离血清γ-球蛋白 68
第五章 蛋白质分析技术 70
第一节 蛋白质分离纯化的基本原理及方法 70
第二节 蛋白质的鉴定 81
实验九 血清蛋白的分离与提纯 84
实验十 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 86
实验十一 紫外吸收法测定蛋白质含量 88
第六章 酶学分析技术 90
第一节 酶分离纯化的基本原则及方法 90
第二节 酶活力测定 94
第三节 同工酶的测定 99
实验十二 底物浓度对酶活力的影响——碱性磷酸酶米氏常数的测定 102
实验十三 血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定(赖氏法) 105
实验十四 血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的测定 109
第七章 核酸的分离与纯化 114
第一节 真核基因组DNA分离与纯化的基本原理及方法 114
第二节 质粒DNA提取与纯化的基本原理及方法 116
第三节 RNA分离与纯化的基本原理及方法 118
实验十五 外周血白细胞DNA的提取(SDS裂解法) 121
实验十六 真核细胞RNA的制备(Trizol试剂抽提法) 123
第八章 核酸的鉴定与分析 125
第一节 核酸的定量分析 125
第二节 核酸凝胶电泳 126
第三节 核酸分子杂交技术 128
第四节 聚合酶链反应技术 130
第五节 DNA限制性内切酶酶切技术 133
实验十七 紫外分光光度法分析核酸的纯度及浓度 136
实验十八 聚合酶链反应扩增目的基因片段 138
实验十九 逆转录-聚合酶链反应扩增目的基因片段 140
实验二十 DNA限制性内切酶酶切反应 143
参考文献 145