第一章 神经生物学研究中的科学思维 1
第一节 神经生物学的概念与任务 1
第二节 神经生物学研究的特点 1
第三节 神经生物学研究的方法与思维 2
上篇 神经生物学研究中的多学科实验技术方法 13
第二章 行为生理学实验技术方法 13
第一节 行为生理学简介 13
第二节 有关反射性行为的神经调制环路的研究方法 17
第三节 神经递质释放量的整体、原位、实时测定 21
第四节 神经递质生理功能的测定 25
第五节 脑功能成像 27
第六节 脑内神经递质受体的原位、实时核素显像 30
第三章 电生理学实验技术与仪器 31
第一节 电生理学实验仪器的一般介绍 31
第二节 微电泳技术简介 38
第三节 多电极记录技术 38
第四节 膜片钳技术 39
第五节 立体定位技术 45
第六节 脑电图 45
第一节 给药途径与神经递质功能的研究 47
第四章 神经药理学方法 47
第二节 递质代谢与神经药理研究 50
第三节 受体的药理学研究 52
第四节 G蛋白与细胞内信使系统的药理学研究 52
第五章 神经生物化学方法简介 53
第一节 神经组织细胞破碎法 54
第二节 用离心法分离突触小体 55
第三节 用电泳法分离带电荷的生物大分子 56
第四节 色谱分析法及其在神经科学研究中的应用 58
第五节 膜受体的放射配体结合分析测定技术 65
第六章 神经分子生物学常用技术 69
第一节 聚合酶链式反应技术 69
第二节 核酸分子杂交技术 76
第三节 蛋白质免疫印迹技术 81
第四节 DNA序列测定 84
第五节 转基因动物技术和基因打靶技术 87
第六节 DNA芯片技术 89
第七节 mRNA差异显示技术 89
第一节 神经细胞及神经胶质细胞的显示方法 92
第七章 神经细胞化学显示技术与观察工具 92
第二节 神经通路示踪法 99
第三节 神经形态学观察工具 102
第八章 核医学研究技术方法 110
第一节 应用于神经生物学的核素示踪技术方法简介 110
第二节 脑血流灌注显像技术 113
第三节 脑代谢功能的核素显像技术 115
第四节 脑内神经递质受体的核素显像技术 117
第五节 脑灌注显像介入试验 121
第六节 其他显像技术 129
第九章 脑功能磁共振成像技术方法 131
第一节 磁共振成像原理 131
第二节 脑功能磁共振成像研究方法 132
第三节 MRS在中枢神经系统疾病中的应用 135
第四节 脑功能磁共振成像的原理及其基础研究和临床应用 136
第五节 脑磁图的临床应用 137
第六节 磁共振显微成像 137
第十章 计算机科学技术 138
第一节 计算神经科学——理论神经科学与实验神经科学联姻 138
第二节 计算机技术与生物信号记录分析系统简介 139
第三节 计算机图像分析系统简介 142
下篇 神经生物学研究中的多层次、多水平实验 150
Ⅰ 整体行为水平的实验 150
第十一章 躯体感觉及其传入 150
实验一 蜚蠊(蟑螂)躯体对机械刺激的感受 150
实验二 蜚蠊腹神经索的自发和诱发放电反应 153
实验三 躯体刺激对大鼠脊髓背角广动力细胞电活动的影响 157
实验四 对家兔中脑网状结构神经元单位放电的观察 159
实验五 中缝核群神经元单位放电 161
实验六 窒息对大鼠大脑皮层诱发电位的影响 163
第十二章 视、听觉及其传入 167
实验一 蛙视网膜电图的观察 167
实验二 耳蜗微音器效应与听神经动作电位记录 169
实验三 视觉中枢单个神经元对视觉刺激的反应 171
第十三章 反射性行为 174
实验一 脊髓反射与反射回路 174
实验二 脊髓横断与脊休克 176
实验三 大鼠大脑皮质运动控制表征区定位 177
实验四 姿势、平衡与前庭、小脑 180
实验一 青蛙的视动反应行为的观察 183
第十四章 感觉反应性行为 183
实验二 苍蝇的味觉感受与摄食行为 184
实验三 大鼠下丘脑毁损后体重的改变 186
实验四 节肢动物变色反应的神经体液调节 190
第十五章 痛反应性行为 192
实验一 坐骨神经损伤性痛 194
实验二 镇痛药的抗灼热性痛反应的效应 197
实验三 吗啡对福尔马林致痛大鼠的镇痛作用 200
实验四 芬太尼对内脏痛的镇痛作用 202
实验一 条件性和非条件性逃避行为 205
第十六章 学习与记忆 205
实验二 空间、工作记忆以及辨别能力的获得 208
实验三 大鼠吗啡成瘾性(条件性)位置偏爱 212
实验四 大鼠下丘脑隔核的慢性自我刺激 214
实验五 大鼠海马的LTP 217
Ⅱ 细胞水平的实验 222
第十七章 神经组织细胞普通染色方法 222
实验一 Golgi-Cox法显示神经元 222
实验二 灌注的快速Golgi法 223
实验三 Cajal氏氯化金升汞法显示星状胶质细胞 225
实验四 Marchalls法显示胶质细胞 226
实验五 神经元细胞的尼氏体染色法 227
实验六 神经纤维与轴索的Holmes镀银法 228
实验七 髓鞘的染色(Pal-Weigert法) 230
第十八章 神经通路示踪法 232
实验一 辣根过氧化物酶(HRP)追踪法 232
实验二 荧光素追踪法 235
实验三 放射性核素示踪法 238
实验四 神经纤维溃变与终末嗜银追踪法 244
第十九章 神经细胞的免疫组织化学技术 247
实验一 PAP法 248
实验二 ABC法 251
第二十章 神经组织细胞的多重标记技术 253
实验一 神经组织细胞的多重标记技术 253
第二十一章 神经细胞分散培养技术 259
实验一 大鼠皮质细胞分散培养技术 259
第二十二章 神经细胞凋亡检测方法 264
实验一 原位末端标记检测法(DNA聚合酶或Klenow大片段介导的原位缺口平移) 265
实验二 原位末端标记检测法(TdT介导的dUTP缺口末端标记技术) 267
实验三 细胞凋亡的流式细胞仪检测法一(AnnexinV-PI双染色法) 269
实验四 细胞凋亡的流式细胞仪检测法二(活化的Caspase-3荧光染色法) 271
第二十三章 神经、肌肉电活动的记录 273
实验一 骨骼肌纤维的静息电位与动作电位 273
实验二 肌被动张力变化与肌梭放电的同步记录 278
实验三 离体脊神经节细胞电活动的细胞内记录 282
实验四 神经干复合动作电位的记录 285
实验五 容积传导——神经冲动的电位场记录 289
实验六 神经-肌肉标本电活动和肌肉张力的同步记录 291
实验一 颈上神经节细胞膜钙通道电流的记录 296
第二十四章 离子通道电流的记录 296
Ⅲ 分子水平的实验 296
实验二 大鼠初级感觉神经元的全细胞膜片钳记录 301
实验三 Baclofen对大鼠海马分离细胞GABA-激活电流的影响 305
实验四 非洲爪蟾卵母细胞内源性ATP受体激活电流的记录 308
第二十五章 神经递质释放的采集、分析、测定与组织化学显示技术 313
实验一 推挽灌流法 313
实验二 微透析法 316
实验三 氨基酸递质HPLC分析的荧光法 321
实验四 单胺类递质HPLC分析的电化学法 324
实验五 脑组织中5-HT、5-HIAA、NE和DA的同时提取和荧光分析 325
实验六 生物胺的荧光组织化学显示 329
实验七 颈上神经节三磷酸腺苷释放的荧光素-荧光素酶测定 332
实验八 神经肽的放射免疫测定 335
实验九 乙酰胆碱酯酶活性的测定与显示——Karnovsky-Roots亚铁氰化铜直接显色法 342
实验十一 氧化氮合酶的组织化学显示 344
第二十六章 神经信息物质生物效应的测定及其受体亚型的鉴定 347
实验一 乙酰胆碱对骨骼肌的作用与生物测定 347
实验二 乙酰胆碱的舒血管效应与血管内皮细胞 352
实验三 吗啡样生物活性肽的测定与受体亚型的鉴定 355
实验一 阿片受体的放射配体结合分析法 358
第二十七章 受体分析与放射自显影技术 358
实验二 受体放射自显影法 362
第二十八章 第二信使及其激酶的测定与组织化学显示技术 365
实验一 cAMP含量的放射免疫测定 365
实验二 蛋白竞争结合法测定cAMP 368
实验三 特异受体结合法测定1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)含量 371
实验四 细胞内钙离子浓度变化的实时检测 373
第二十九章 神经系统的原位杂交 376
实验一 神经系统的原位杂交 376
参考文献 386