简史 1
原理 2
优点 4
荧光抗体技术的应用 5
在细菌及病毒方面的应用方式 9
荧光抗体技术在生产实践中的意义 10
〔附一〕IgM 11
〔附二〕IgG 11
〔附三〕IgA 12
第一章 特异性抗血清的制备 13
一、不同试验动物的免疫程序 13
二、不同抗原的抗血清生产 15
三、免疫吸附剂 20
〔附〕脂蛋白苏丹黑染色法 21
一、硫酸铵法(Kendall氏法) 23
第二章 球蛋白的分离、提纯和效价测定 23
二、冷乙醇法(Nichol及Deutsch氏法) 27
三、Ethodin法(Gordon等及Horejsis Smetana氏法) 28
四、抗体球蛋白的提纯 28
五、球蛋白在和荧光性色素结合前的测定 30
(一)蛋白质含量的测定(球蛋白的定量测定) 30
(二)球蛋白纯度的测定 34
(三)抗体球蛋白的抗体效价测定 36
第三章 荧光标记剂和抗体的标记 39
一、荧光标记剂 39
二、抗体的标记 43
(一)用FITC标记 44
(二)用异硫氰酸四甲基若丹明标记 51
(三)用RB200SC标记(Chadwick氏法) 51
(四)用DANSC标记(Mayersbach氏法) 52
三、荧光性的对比染色剂 53
第四章 荧光抗体的精制、滴定、浓缩及保存 54
一、排除未结合色素及其降解物 54
(一)透析法 54
(二)凝胶滤过法 55
(三)应用DEAE-葡聚糖G25层析法 57
(四)活性炭提出法 59
二、DEAE-纤维素柱层析法 59
三、吸收 60
四、稀薄蛋白质溶液的浓缩 62
五、荧光抗体的测定及评价 63
六、荧光抗体的保存 67
第五章 载片的准备和标本的固定 68
一、载片的准备 68
二、荧光抗体染色标本的制作 69
三、标本的固定方法 71
四、染色用的标本的保存 75
〔附一〕粪便标本的制备 76
〔附二〕水样标本的制备 76
第六章 免疫荧光染色法 77
一、用已知抗体染抗原 77
(一)直接法 77
(二)抗球蛋白法 81
(三)抗补体法 84
(四)双重染色法 86
二、染色定位的抗体 86
(一)直接法 86
(二)间接法 87
三、血清中抗体的鉴定 88
(一)抗球蛋白法 88
(二)抑制法 89
(四)溶解性抗原法 90
(三)抗补体法 90
四、封裱剂 91
五、染色标本的保存 92
第七章 荧光显微镜的使用 93
一、荧光显微镜装置 93
二、观察方法 100
三、摄影 102
第八章 关于非特异性染色问题 104
一、自发荧光 104
二、来自荧光血清的非特异性染色 105
三、来自正常血清及免疫血清的非特异性染色 107
四、来自荧光抗体技术的非特异性染色 109
五、消除非特异性染色的方法 110
一、链球菌的荧光抗体技术检验 112
第九章 荧光抗体技术在兽医细菌性疾病诊断上的应用 112
二、炭疽病的荧光抗体检验 113
三、猪丹毒的间接免疫荧光检验 114
四、李氏杆菌病的荧光抗体检验 114
五、野兔病的荧光抗体检验 115
六、Tyzzer氏病病原体——毛样杆菌(B.piliformis)的荧光抗体检验 115
七、应用荧光抗体区别腐败梭菌与气肿疽(黑腿病)梭菌 116
八、用荧光抗体法检查腐败梭菌 117
九、免疫荧光检验食物中的肉毒梭菌E型所产生的毒素 118
十、破伤风的荧光抗体检验 119
十一、应用免疫荧光技术检验猪组织中的沙门氏杆菌 120
十二、布氏杆菌病的荧光抗体检验 121
十三、用荧光抗体检验精液及包皮渗出物中的胎儿弧菌 122
十四、荧光抗体技术鉴定坏死杆菌(Sphaerophorus necrophorus) 123
十六、钩端螺旋体的荧光抗体检验 124
十五、结核病的间接荧光抗体法检验 124
十七、用间接荧光抗体法检查新型隐球菌 127
第十章 荧光抗体技术在兽医枝原体及病毒性疾病诊断上的应用 128
一、猪枝原体肺炎的荧光抗体检验 128
二、鹦鹉病的荧光抗体检验 130
三、狂犬病涂片的荧光抗体染色及检验 130
四、假狂犬病的荧光抗体检验 132
五、猪SMEDI(Entero)病毒的荧光抗体检验 133
六、猪瘟的荧光抗体检验 133
七、马传染性贫血的荧光抗体检验 137
八、德兴(Teschen)病病毒的免疫荧光检验 139
九、口蹄疫的荧光抗体检验 139
十、牛传染性鼻气管炎的荧光抗体检验 140
十一、荧光抗体直接法诊断鸡脑脊髓炎(AE) 140
十二、鸡的其他几种病毒性感染的荧光抗体检验 141
十三、免疫荧光技术检验猫白血病及肌瘤病毒的抗原和抗体 142
十四、用间接荧光抗体法检验猫纤维肉瘤病毒 143
十五、猪传染性水泡病病毒的荧光抗体检验 143
第十一章 荧光抗体技术在兽医寄生虫病诊断上的应用 147
一、荧光抗体研究禽球虫的抗原 147
二、用间接荧光抗体法研究牛的泰氏焦虫感染 147
三、荧光抗体法检验扁虱体内的焦虫 148
四、免疫荧光法诊断牛囊包虫病的抗原的制备与选择 148
五、应用可溶性抗原荧光抗体法检验犬心丝虫 149
六、用间接荧光抗体法检验牛羊血吸虫病 151
附录 152
一、碳酸盐缓冲剂,pH9.5,0.5M 152
二、磷酸盐缓冲剂,pH6.3,0.0175M 152
三、食盐溶液(供DEAE色层析法用) 152
四、硫柳汞的配制 152
五、5%酚甘油的配制 152