《生物化学与分子生物学实验教程 第3版》PDF下载

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  • 作  者:徐岚,钱晖主编;王卉放,唐彦萍,冯磊副主编
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2014
  • ISBN:9787030403902
  • 页数:170 页
图书介绍:生物化学及分子生物学是一门实践性极强的学科,纵观学科发展历史,糖、脂肪、蛋白质与核酸研究的发展,均是在实验研究基础上建立,近代分子生物学的奠基石之一的双螺旋结构学说更是在众多实验成果以及Watson和Crick研究总结的基础上提出的,很难设想没有实验研究,生化及分子生物学会发展成今天的生物医学学科的领头羊地位。本教材中首先打破实验教学依附于理论教学的传统模式,重新确定实验教学的地位。打破传统的以验证性实验为主的框架,建立新的实验比例,即综合性、设计性比例为主,使学生在掌握基本实验技术的基础上,动手操作一些综合性的大实验,提高学生综合分析能力及实验动手能力。

第1篇 总论 1

实验须知 1

第1章 基本操作技术 3

第1节 玻璃器皿的清洗 3

第2节 吸量管的种类和使用 4

第3节 溶液的混匀、过滤及离心 5

第4节 实验样品的制备 6

第5节 分光光度法 8

第2章 电泳技术 13

第1节 电泳的基本原理 13

第2节 影响电泳的主要因素 13

第3节 区带电泳的分类 14

第4节 几种常见的电泳方法 15

第5节 二维电泳 19

第3章 层析技术 24

第1节 层析技术的分类 24

第2节 层析中的常用术语 24

第3节 纸层析 27

第4节 薄层层析 28

第5节 离子交换层析 28

第6节 凝胶层析 30

第7节 亲和层析 33

第4章 离心分离技术 34

第1节 离心分离技术的原理 34

第2节 离心机的使用方法与维护 35

第3节 离心技术的分类与选择 36

第4节 离心机转子的种类与应用 38

第5章 印迹技术 40

第1节 Southern印迹杂交 40

第2节 Northern印迹杂交 41

第3节 斑点杂交 42

第4节 Western印迹杂交 42

第6章 聚合酶链式反应 44

第1节 PCR技术概述 44

第2节 PCR技术的基本原理 44

第3节 PCR反应条件的优化 46

第4节 PCR技术的扩展 49

第5节 PCR中应注意的问题 52

第6节 PCR在医学中的应用 54

第2篇 各论 55

第7章 蛋白质与氨基酸 55

实验1 蛋白质含量的测定 55

实验2 凝胶层析法分离血红蛋白和DNP-鱼精蛋白(或DNP-酪蛋白) 59

实验3 酪蛋白等电点的测定 62

实验4 氨基酸的薄层层析 63

实验5 DNS-氨基酸聚酰胺薄膜双向层析 65

第8章 酶学 68

实验6 影响酶活性的因素 68

实验7 蔗糖酶的专一性 69

实验8 丙氨酸转氨酶活性的测定 72

实验9 乳酸脱氢酶同工酶的分离 74

实验10 转氨基反应 76

实验11 琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制 78

实验12 米氏常数的测定 80

第9章 糖、脂和生物氧化 88

实验13 饥饿和饱食对肝糖原含量的影响 88

实验14 血清甘油三酯测定 89

实验15 高密度脂蛋白中胆固醇含量测定 91

实验16 血清总胆固醇含量测定 93

实验17 乳酸测定 95

实验18 血中葡萄糖含量的测定 99

第10章 核酸 103

实验19 细胞核的分离和纯化 103

实验20 核酸含量的测定 105

实验21 酵母RNA的提取及组分鉴定 108

实验22 真核细胞基因组DNA的制备与定量 110

实验23 Southern印迹杂交 111

实验24 Northern印迹杂交 117

实验25 PCR扩增技术 120

实验26 随机扩增多态性DNA技术 122

第11章 综合性实验 124

实验27 血清γ-球蛋白分离与纯度鉴定 124

实验28 蛋白质的分离、提取、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western印迹 127

实验29 脂蛋白的分离、提纯和电泳鉴定 136

实验30 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞、提取、纯化鉴定 140

实验31 碱性磷酸酶的纯化及比活性和Km值的测定 146

实验32 血清中鞘糖脂的分离与质谱分析 150

参考文献 154

附录一 155

附录二 169