绪言 1
一、病原生物学与免疫学实验目的和要求 1
二、实验室生物安全 1
三、实验室规章制度 2
第一篇 基本实验 3
第一章 免疫学基本实验 3
第一节 抗体的制备 3
一、多克隆抗体 3
实验1-1多克隆抗体的制备 3
实验1-2抗体的提取与纯化（盐析沉淀法） 4
二、单克隆抗体 5
第二节 凝集实验 7
一、直接凝集实验 7
实验1-3细菌的鉴定 8
实验1-4人ABO血型鉴定 9
实验1-5试管凝集实验（肥达反应） 10
二、间接凝集实验 11
实验1-6间接凝集实验 12
实验1-7间接凝集抑制实验（妊娠实验） 12
实验1-8协同凝集实验 13
第三节 沉淀实验 14
实验1-9单向琼脂扩散试验 15
实验1-10双向琼脂扩散试验 16
实验1-11免疫电泳 17
实验1-12对流免疫电泳 18
实验1-13火箭免疫电泳 19
第四节 补体相关实验 21
实验1-14血清总补体活性测定 21
实验1-15 补体结合实验 22
第五节 免疫细胞相关实验 26
实验1-16外周血单个核细胞的分离 26
实验1-17巨噬细胞吞噬功能测定（大吞噬试验） 28
实验1-18中性粒细胞吞噬功能测定（小吞噬试验） 29
实验1-19 NK细胞活性测定 30
实验1-20 E玫瑰花环试验 31
实验1-21间接免疫荧光技术检测T细胞亚群（CD4） 33
试验1-22淋巴细胞转化实验 34
实验1-23 ELISPOT 35
实验1-24溶血空斑试验 38
第六节 免疫标记技术 40
一、酶联免疫吸附实验 40
实验1-25免疫斑点实验 41
实验1-26间接ELISA 42
实验1-27双抗体夹心法 44
二、胶体金标记技术 45
实验1-28胶体金的制备 45
实验1-29胶体金标记蛋白的制备 46
实验1-30胶体金标记技术常用方法 47
三、荧光抗体标记技术 48
实验1-31荧光抗体制备技术 50
实验1-32 间接法检测抗核抗体 50
四、放射免疫标记技术 51
五、化学发光免疫技术 52
第七节 超敏反应 53
实验1-33豚鼠过敏试验 53
第二章 医学微生物学基本实验 54
第一节 细菌形态结构观察 54
实验2-1显微镜的使用 54
实验2-2悬滴法观察细菌的运动 56
实验2-3革兰染色法 56
实验2-4细菌特殊结构的染色法 59
第二节 细菌的人工培养 62
一、细菌的培养基 62
实验2-5细菌基础培养基的制备方法 62
二、细菌的接种及生长现象观察 65
实验2-6平板培养基接种法 65
实验2-7试管培养基接种法 70
实验2-8细菌计数 74
第三节 细菌代谢产物的检测 79
一、细菌分解代谢产物的检测 79
实验2-9碳水化合物代谢试验 79
实验2-10蛋白质与氨基酸代谢试验 82
实验2-11碳源与氮源利用试验 84
实验2-12其他酶类试验 84
二、细菌合成代谢产物的检测 85
实验2-13侵袭性酶的检测 85
实验2-14毒素的检测 87
第四节 理化因素对细菌生长繁殖的影响 90
实验2-15 高压蒸汽灭菌法 90
实验2-16紫外线杀菌试验 91
实验2-17手指皮肤消毒试验 91
实验2-18药物敏感试验（纸片琼脂扩散法） 92
实验2-19药敏试验（稀释法） 93
实验2-20联合药物敏感试验 97
第五节 细菌的遗传变异 98
实验2-21细菌R质粒接合传递实验 98
实验2-22细菌鞭毛变异 99
第六节 特殊细菌的染色方法 99
实验2-23抗酸染色法 99
实验2-24异染颗粒染色法观察棒状杆菌 100
第七节 螺旋体观察 102
实验2-25 Fontana镀银染色法镜检钩端螺旋体 102
实验2-26刚果红负染色法观察奋森疏螺旋体 103
第八节 病毒学实验 104
实验2-27病毒蚀斑实验 104
实验2-28病毒血凝实验及血凝抑制试验 105
实验2-29病毒中和实验 106
第九节 真菌相关实验 108
实验2-30真菌形态结构观察 108
实验2-31真菌的培养 109
第三章 人体寄生虫学基本实验 112
第一节 人体寄生虫形态观察 112
实验3-1人体寄生虫形态观察 112
第二节 寄生虫常用诊断技术 131
实验3-2粪便直接涂片法检查蠕虫卵 131
实验3-3饱和盐水漂浮法检查粪便中钩虫卵 132
实验3-4幼虫孵化法 133
实验3-5肛门试纸法 135
实验3-6十二指肠分泌物检查 136
实验3-7阴道分泌物检查 137
实验3-8血液检查 138
实验3-9毛囊或皮脂腺（蠕形螨）检查 140
第三节 寄生虫感染特殊免疫学检测方法 141
实验3-10皮内试验 141
实验3-11血吸虫环卵沉淀实验 142
实验3-12诊断弓形虫感染的染色实验 143
第二篇 综合、设计型实验 145
第四章 感染性疾病的实验室检测概述 145
第一节 细菌感染的实验诊断 145
一、标本的采集 145
二、细菌的检测 146
三、细菌感染的血清学诊断 147
四、常见致病菌的鉴定流程 147
第二节 病毒感染的实验室诊断 148
一、标本的采集与送检 148
二、病毒的形态学检查法 149
三、病毒抗原的直接检出 149
四、检测病毒核酸 150
五、病毒感染的血清学诊断 150
六、病毒分离培养 151
第三节 真菌感染的实验室诊断 153
一、标本的采集 153
二、真菌的直接镜检 153
三、真菌的分离培养 154
四、血清学诊断 154
五、核酸杂交探针技术 154
第四节 寄生虫感染的实验室诊断 154
一、病原学检查方法 154
二、常用于寄生虫感染诊断的免疫学技术 156
三、寄生虫的核酸检测 156
第五章 综合、设计型实验相关分子生物学实验技术 158
实验5-1聚合酶链反应 158
实验5-2 Southern杂交 160
实验5-3蛋白质印迹 163
第六章 感染性疾病病例分析及病原体检测 169
第三篇 创新性实验相关内容 180
一、创新性实验选题原则 180
二、实施原则 180
三、对学生的要求 180
四、文献检索 181
附一：国家级大学生创新创业训练计划指南 181
一、计划目标 181
二、计划内容 181
三、参与高校 181
四、计划管理 182
五、项目管理 182
六、学校工作 182
附二：大学生创新创业训练计划项目申报书 184
填写说明 185
参考文献 188