第一章 杂交棉生产与发展概况 1
第一节 国内外杂交棉的发展概况 2
一、杂交棉的发展状况 2
二、杂交棉的生产与繁育 6
三、棉花杂交制种方法 9
四、国内外三系杂交棉研究状况 19
第二节 细菌人工染色体(BAC)文库的研究状况 24
一、大片断DNA插入文库的发展 24
二、克隆载体的发展概况 25
三、大片断DNA插入文库的种类 31
四、BAC文库的优、缺点 34
五、BAC文库在基因组学上的研究进展 36
六、棉花BAC文库构建的研究进展 40
第二章 陆地棉18R核基因组BAC文库的构建 53
第一节 陆地棉18R高效BAC文库构建体系的建立 53
一、试验材料的准备与处理 53
二、高质量、高分子量细胞核DNA的制备 66
三、大片断DNA的获得 70
四、大肠杆菌感受态细胞的制备 77
五、大片断DNA与载体的连接与转化 79
六、转化子的大批量转化、存储 83
七、BAC文库的复制与保存 86
第二节 陆地棉18R BAC文库的质量评估 86
一、插入片断的评估 86
二、BAC克隆稳定性的检测 88
三、其他细胞器对BAC文库污染状况的检测 90
四、文库覆盖率的确定 93
五、PCR法检测BAC混合池 94
第三章 陆地棉18R核基因组BAC文库构建的技术要点 97
第一节 高质量、高分子量棉花核DNA提取的技术要点 97
第二节 高效BAC文库体系构建的技术要点 99
一、BAC载体与大片断DNA的连接 99
二、转化与克隆的技术要点 100
第三节 BAC文库储存方法的比较 101
第四章 线粒体、叶绿体DNA的BAC文库 107
第一节 高等植物线粒体基因组文库 108
一、线粒体的基本特点 108
二、线粒体与细胞质雄性不育 110
三、线粒体BAC文库的构建 123
第二节 叶绿体基因组文库 130
一、植物叶绿体的基本特点 130
二、叶绿体BAC文库的构建 132
第三节 叶绿体、线粒体大片断DNA提取方法 135
一、叶绿体大片断DNA的提取 135
二、线粒体大片断DNA的提取 138
缩略词表 144
参考文献 145