第一篇 概 论 1
第一章 实验室基本常识 1
第二章 生物化学实验基本操作 5
第二篇 常用技术 9
第一章 分光分析技术 9
第二章 电泳技术 13
第三章 层析技术 27
第四章 离心技术 35
第五章 聚合酶链反应技术 39
第六章 印迹技术 43
第七章 组织细胞培养技术 48
第三篇 生物化学实验 64
实验一 蛋白质定量测定 64
实验二 蛋白质的沉淀反应 74
实验三 蛋白质的两性反应和等电点测定 75
实验四 血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳 77
实验五 聚丙烯酰胺凝胶电泳 79
实验六 肝染色质蛋白的提取与鉴定 85
实验七 凝胶层析法分离血红蛋白与DNP-酪蛋白 87
实验八 DEAE-纤维素离子交换层析分离血清蛋白质 89
实验九 亲和层析法分离乳酸脱氢酶 91
实验十 影响酶活性的因素 95
实验十一 碱性磷酸酶Km值测定 97
实验十二 底物浓度及抑制剂对酶活性的影响 99
实验十三 琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制 101
实验十四 乳酸脱氢酶同工酶的测定 103
实验十五 血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定 105
实验十六 转氨基作用 109
实验十七 血糖测定及胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 110
实验十八 糖酵解中间产物的鉴定 116
实验十九 血清胆固醇总量的测定 119
实验二十 血清尿素氮测定 122
实验二十一 酮体的生成与利用 125
实验二十二 血清(浆)过氧化脂质测定 128
第四篇 分子生物学实验 133
实验一 酵母RNA的提取与成分鉴定 133
实验二 真核细胞DNA的提取与鉴定 134
实验三 基因的PCR扩增与产物鉴定 139
实验四 肉制品的基因鉴定 142
实验五 人p16基因PCR扩增产物的T/A克隆 145
实验六 大肠杆菌感受态细胞的制备 146
实验七 质粒热激法转化感受态细菌 149
实验八 重组克隆的筛选与扩增 151
实验九 转化菌的质粒提取与定量 153
实验十 质粒的酶切与琼脂糖凝胶电泳鉴定 156
实验十一 pcDNA3.1(+)-EGFP质粒转染HeLa细胞株 161
实验十二 pcDNA3.1(+)-EGFP质粒转染HeLa细胞株的RT-PCR分析 162
实验十三 pcDNA3.1(+)-EGFP质粒转染HeLa细胞株的Western分析 165
实验十四 PCR-RFLP检测NQO1 C609T多态性 171
实验十五 检测人CLEC4M基因多态性 174
附录 177
一、常用缓冲液及酸碱指示剂的配制方法 177
二、化学试剂的规格及保管 181
三、几种动物生化常数 183
四、聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配制 185
五、细胞培养用液的配制 186
六、生物化学与分子生物学实验常用词的中英文对照 190