1 文献综述 1
1.1 引文 1
1.2 植物对昆虫取食的感知 4
1.2.1 对昆虫口腔分泌物中激发子的识别 4
1.2.2 对昆虫取食引起的特定的机械伤害的识别 6
1.3 离子流在植物防御反应中的作用 8
1.3.1 钙离子流在植物防御反应中的作用 8
1.3.2 阴离子外流在植物防御反应中的作用 13
1.4 活性氧信号在植物防御反应中的作用 14
1.5 电信号是植物快速响应昆虫取食的传感系统 17
1.6 蛋白质可逆磷酸化在激发子诱导的植物防御反应中的作用 18
1.7 非损伤性扫描离子选择电极技术(SIET)原理及优势 20
1.7.1 非损伤性扫描离子选择电极的工作原理 20
1.7.2 非损伤性扫描离子选择电极的优势 21
1.8 研究内容和意义 21
1.9 研究的技术路线 23
2 MeJA对沙冬青细胞防御反应的诱导 24
2.1 前言 24
2.2 材料与方法 26
2.2.1 植物材料 26
2.2.2 细胞贴壁 27
2.2.3 离子流测定方法 28
2.2.4 离子流测定实验方案 28
2.2.5 H202测定 29
2.2.6 质膜电位测定 30
2.3 结果与分析 31
2.3.1 MeJA诱导的Ca2+、H+流的变化 31
2.3.2 MeJA诱导H2O2的产生 34
2.3.3 MeJA诱导质膜的变化 37
2.4 结论与讨论 38
2.4.1 MeJA诱导的细胞H+内流依赖于胞内Ca2+的释放 38
2.4.2 H2O2参与了MeJA诱导的沙冬青细胞H+内流 40
2.4.3 蛋白质磷酸化参与了MeJA诱导的沙冬青细胞H2O2产生 40
2.4.4 H+内流是MeJA诱导的沙冬青细胞膜电位去极化的原因 41
3 昆虫口腔分泌物对沙冬青细胞防御反应的诱导 43
3.1 前言 43
3.2 材料与方法 44
3.2.1 植物材料 44
3.2.2 昆虫口腔分泌物的收集 44
3.2.3 离子流的测定方法 45
3.2.4 H2O2的测定 45
3.2.5 质膜电位的测定 45
3.2.6 实验设计 46
3.3 结果与分析 47
3.3.1 昆虫口腔分泌物诱导的沙冬青细胞Ca2+流的变化 47
3.3.2 昆虫口腔分泌物诱导的沙冬青细胞H+流的变化 51
3.3.3 昆虫口腔分泌物诱导的沙冬青细胞H2O2的变化 52
3.3.4 昆虫口腔分泌物诱导的沙冬青细胞质膜电位的变化 56
3.4 结论与讨论 59
4 沙冬青细胞对机械刺激诱导的离子流响应 65
4.1 前言 65
4.2 材料与方法 67
4.2.1 植物材料 67
4.2.2 离子流的测定方法 68
4.2.3 机械刺激细胞的方法 68
4.2.4 实验设计 68
4.3 结果与分析 69
4.3.1 短期机械刺激后沙冬青细胞Ca2+流的变化 69
4.3.2 蛋白质磷酸化参与了短期机械刺激诱导的Ca2+内流 71
4.3.3 持续机械刺激对沙冬青细胞Ca2+流的影响 73
4.3.4 短期机械刺激对沙冬青细胞H+流的影响 76
4.3.5 持续机械刺激对沙冬青细胞H+流的影响 78
4.4 结论与讨论 80
5 结论与展望 84
5.1 主要结论 84
5.1.1 MeJA诱导的沙冬青悬浮细胞H+内流依赖于胞内Ca2+的释放 84
5.1.2 H2O2参与了MeJA诱导的沙冬青悬浮细胞H+内流 85
5.1.3 蛋白质磷酸化参与了MeJA诱导的沙冬青悬浮细胞H2O2产生 86
5.1.4 H+内流是MeJA诱导的沙冬青悬浮细胞膜电位去极化的原因 86
5.1.5 昆虫口腔分泌物诱导的沙冬青悬浮细胞跨膜Ca2+流 87
5.1.6 昆虫口腔分泌物诱导的沙冬青悬浮细胞跨膜H+内流依赖NADPH氧化酶 88
5.1.7 沙冬青细胞H2O2的积累与跨膜Ca2+流的关系 89
5.1.8 质膜电位去极化与H2O2的积累及Ca2+流的关系 89
5.1.9 沙冬青悬浮细胞对机械刺激诱导的离子流响应 90
5.2 展望 94
参考文献 95
后记 119