第一章 生物化学实验基本原理和方法 1
第一节 生物大分子的分离纯化的一般步骤与方法 1
第二节 层析技术 12
第三节 离心技术 20
第四节 电泳技术 26
第五节 分光光度技术 28
第二章 蛋白质与氨基酸类实验 30
实验一 蛋白质和氨基酸的呈色反应 30
内容一 双缩脲反应 30
内容二 茚三酮反应 32
内容三 黄色反应 34
内容四 乙醛酸反应 35
内容五 坂口反应 37
内容六 米伦反应 39
实验二 蛋白质的等电点测定 40
内容一 pH值沉淀法 40
内容二 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法 43
实验三 蛋白质的沉淀反应 48
实验四 蛋白质定量测定 51
内容一 双缩脲法测定蛋白质含量 51
内容二 Folin-酚法测定蛋白质含量 53
内容三 紫外分光光度法测定蛋白质含量 56
内容四 染料结合法测定蛋白质含量 58
内容五 BCA法测定蛋白质含量 60
实验五 脯氨酸含量测定 63
实验六 氨基酸纸层析 66
实验七 牛乳中酪蛋白制备与鉴定 69
实验八 SDS-PAGE电泳测定蛋白质相对分子质量 71
实验九 血清免疫球蛋白IgG的分离纯化 75
实验十 胰蛋白酶抑制剂的分离纯化和活性测定 78
实验十一 蛋白质的双向电泳 81
第三章 酶类与维生素和辅酶实验 87
实验一 酶的基本性质 87
实验二 马铃薯多酚氧化酶的制备及性质分析 92
实验三 同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 95
实验四 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 101
实验五 脲酶米氏常数的测定 104
实验六 植物组织中抗氧化酶的活性测定 107
内容一 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 108
内容二 过氧化物酶(POD)的活性测定 111
内容三 过氧化氢酶(CAT)活性测定 113
实验七 酵母蔗糖酶的粗提及活力和比活力分析 115
实验八 糖化酶的固定化及酶学性质分析 119
实验九 果蔬维生素C的提取和定量测定 128
第四章 糖、脂类及代谢实验 133
实验一 发酵过程中无机磷的利用 133
实验二 总糖和还原糖的测定 135
内容一 3,5-二硝基水杨酸法 135
内容二 蒽酮比色法 138
实验三 可溶性糖的分离提取与薄层层析鉴定 141
实验四 天然产物中多糖的分离纯化与鉴定 145
内容一 多糖的提取、纯化 145
内容二 多糖的鉴定 148
实验五 脂类的测定 150
内容一 索氏抽提法测定粗脂肪含量 150
内容二 脂肪酸含量测定 152
内容三 血清甘油三酯简易测定 154
内容四 血清胆固醇含量的测定(磷硫铁法) 156
实验六 脂肪酸的β-氧化 158
实验七 卵磷脂的提取和鉴定 162
实验八 丙二醛含量的测定 164
内容一 油炸方便面中丙二醛含量的测定 164
内容二 植物组织中丙二醛含量的测定 166
第五章 核酸类实验 168
实验一 薄层层析分离AMP、ADP和ATP 168
实验二 核酸含量的测定 170
内容一 紫外分光光度法 170
内容二 地衣酚法 171
内容三 定磷法 173
内容四 二苯胺法 176
实验三 酵母RNA的提取和组分鉴定 178
实验四 植物基因组DNA提取 180
实验五 动物基因组DNA提取 183
内容一 动物肝脏组织中基因组DNA的提取(高盐法) 183
内容二 动物血液中基因组DNA的提取 185
内容三 动物传代细胞基因组DNA的提取 187
实验六 质粒DNA提取 188
实验七 核酸的琼脂糖凝胶电泳 193
实验八 植物总RNA的提取和电泳分析 195
实验九 核酸的酶切分析 200
实验十 PCR技术 203
附录 206
第一节 实验室安全防护知识 206
第二节 生物化学实验各类样品制备 210
第三节 玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制 212
第四节 实验的基本操作和要求 215
第五节 实验室常用仪器的使用和维护 218
第六节 常用试剂的配制与保存 220
第七节 实验室常用数据表 230
第八节 分子生物学与基因工程常用试剂及数据表 233
参考文献 244