第一篇 实验技术与原理 1
第一章 实验材料的预处理 3
第二章 提取与沉淀分离技术 4
第三章 过滤与膜分离技术 6
第四章 萃取分离技术 7
第五章 离心技术 8
第六章 层析技术 10
第七章 电泳技术 11
第八章 聚合酶链式反应技术 13
第九章 核酸杂交技术 15
第十章 光谱检测技术 17
第二篇 实验模块与内容 19
模块一 氨基酸分析与测定 21
实验1-1 氨基酸纸层析分析 21
实验1-2 氨基酸纤维素薄层层析 23
实验1-3 植物组织中游离氨基酸总量的测定 26
模块二 植物组织中可溶性蛋白质的提取与含量测定 29
实验2-1 紫外吸收法测定蛋白质含量 29
实验2-2 考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量 32
实验2-3 微量凯氏定氮法测定粗蛋白质含量 34
实验2-4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量 37
实验2-5 植物组织中丙酮酸含量的测定 41
实验2-6 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 43
模块三 酶的分离、纯化与测定 45
实验3-1 马铃薯多酚氧化酶的制备及性质 45
实验3-2 唾液淀粉酶的基本性质 49
实验3-3 蔗糖酶米氏常数的测定 53
实验3-4 温度与pH对蔗糖酶活力的影响 57
实验3-5 酵母蔗糖酶的分离纯化 59
实验3-6 淀粉酶的提取和活力测定 65
实验3-7 血清转氨酶活力的测定 69
实验3-8 过氧化物同工酶聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 73
模块四 维生素含量的测定 76
实验4-1 维生素C含量的测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法 76
实验4-2 维生素C含量的测定——荧光法 79
实验4-3 维生素B2含量的测定——荧光法 81
模块五 糖类的提取、分离与测定 83
实验5-1 3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖含量 83
实验5-2 邻甲苯胺法测定血清葡萄糖的含量 86
实验5-3 菌类多糖的分离提取与含量测定 88
模块六 脂质提取与测定 91
实验6-1 粗脂肪的提取和含量的测定——索氏提取法 91
实验6-2 游离脂肪酸含量的快速测定 93
实验6-3 卵磷脂的提取及鉴定 94
模块七 核酸操作技术 96
实验7-1 植物总DNA的提取(CTAB法) 96
实验7-2 动物肝总DNA的提取 99
实验7-3 植物总RNA的提取 101
实验7-4 PCR技术 103
实验7-5 质粒DNA的提取 105
实验7-6 质粒DNA的酶切分析 107
实验7-7 琼脂糖凝胶电泳 108
实验7-8 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 111
参考文献 114
附录 115
一、实验室安全知识及实验注意事项 115
二、常用缓冲溶液的配制 116
三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制 123
四、蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制 124
五、硫酸铵饱和度的常用表 127