第一篇 理论篇 3
一、中药分子鉴定概述 3
(一)常用的中药鉴定方法 3
(二)中药产业对中药鉴定的新要求 4
(三)中药分子鉴定的优势与适用性 6
二、中药系统鉴定法 8
(一)中药系统鉴定法的提出 8
(二)中药系统鉴定法的原理 9
(三)中药系统鉴定法的优势与应用范围 10
(四)中药系统鉴定的操作 12
(五)结语 13
三、中药材二维分子标记法 15
(一)二维分子标记方法 15
(二)二维分子标记的原理与方法 16
(三)二维分子标记的优势与应用 17
(四)结语 19
第二篇 技术篇 23
一、概述 23
(一)DNA提取技术 23
(二)SCAR标记技术 23
(三)特异性PCR技术 25
(四)SSR分型技术 27
(五)PCR-RFLP技术 28
(六)环介导等温扩增技术 29
(七)序列分析技术 31
(八)免疫检测技术 32
(九)基因芯片技术 33
二、基于特异性PCR技术的药材真伪鉴别方法 39
实验一 样品的采(收)集与保存 39
实验二 数据获取 43
实验三 鉴别位点的筛选 45
实验四 引物设计 47
实验五 植物类药材及成药生粉原料DNA提取方法 49
实验六 动物类药材DNA提取方法 51
实验七 中药材DNA快速提取方法 53
实验八 特异性PCR 54
实验九 电泳技术 56
实验十 成药(口服液、糖浆等)水提原料DNA提取方法 58
第三篇 实践篇 63
一、含淀粉及多糖类中药材DNA的提取方法研究 63
二、鹿骨类药材DNA提取方法研究 70
三、使用碱裂解法快速提取药材DNA方法的研究 80
四、断肠草与金银花类药材水提液特异性PCR鉴定方法研究 102
五、头花蓼RAPD向SCAR分子标记转化的研究 110
六、获取人参、西洋参特定序列位点(STS)标记的新方法 119
七、金钱白花蛇快速PCR鉴别方法的建立 125
八、位点特异性PCR方法的建立及对近源种鹿茸药材的鉴别研究 135
九、基于位点特异性PCR的黄芪与红芪鉴别方法研究 145
十、基于双向位点特异性PCR的金银花真伪鉴别方法研究 155
十一、山茱萸种子形态和蛋白电泳分析 167
十二、冬虫夏草可溶性蛋白质多样性与产地关联度初探 173
十三、不同种源引种紫锥菊的过氧化物酶同工酶分析 180
十四、蛋白免疫检测技术在天花粉真伪鉴别中的初步研究 188
十五、中药致肾毒性成分马兜铃酸A单抗制备及酶联免疫分析方法的建立 197
十六、牛蒡子及其伪品的ITS序列分子鉴定研究 206
十七、太子参及其混伪品的rDNA ITS区序列分析及鉴别 213
十八、基于ITS区多态性研制用于柴胡属植物来源生药鉴定的寡核苷酸DNA芯片 218