第一章 绪论 1
一、实验课的程序与要求 1
二、实验报告的撰写 2
三、实验室规则 3
第二章 常用生物化学实验技术 4
一、层析法 5
二、电泳法 13
三、分光光度法 17
四、离心技术 21
五、膜分离技术 25
第三章 生物化学实验 28
实验一 酶的性质 28
实验二 胡萝卜素的色层分析(柱层析法) 34
实验三 激素对血糖浓度的影响及血糖测定 36
实验四 血清甘油三酯测定 42
实验五 血清总胆固醇测定 46
实验六 蛋白质的提取纯化和总量测定 50
实验七 转氨基作用与纸层析法分析 65
实验八 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 69
实验九 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 72
实验十 酵母核苷酸片段的提取和鉴定 79
实验十一 血浆碳酸氢根测定(滴定法) 81
实验十二 自行设计性实验——唾液淀粉酶活性与脾虚证的关系研究 83
第四章 分子生物学技术和实验 91
实验十三 组织RNA的提取纯化(异硫氰酸胍—酚—氯仿一步法) 91
实验十四 基因组DNA的提取纯化 93
实验十五 质粒DNA的提取纯化(碱裂解法) 95
实验十六 核酸的琼脂糖凝胶电泳 98
实验十七 核酸的紫外分光光度法定量测定 101
实验十八 质粒DNA的限制性核酸内切酶酶切 103
实验十九 DNA酶切片段的体外连接 105
实验二十 大肠杆菌感受态细胞的制备 107
实验二十一 重组DNA的转化 109
实验二十二 转化子的快速鉴定——快速细胞破碎法 112
实验二十三 聚合酶链式反应(PCR) 114
实验二十四 蛋白免疫印迹(Western blot)分析技术 117
附录 122
附录一 玻璃仪器的洗涤、使用及量器的校正 122
附录二 称量 127
附录三 试剂的级别、纯度及配制 130
附录四 缓冲溶液的配制 135
附录五 溶液pH的测定 139
附录六 采血、血标本的处理与抗凝剂 140
附录七 组织样品的处理 143
参考文献 149