第一部分 病毒学实验 3
第一章 病毒的提纯及浓度测定 3
实验一 植物病毒的提纯 3
实验二 紫外分光光度法测定提纯病毒的浓度 11
实验三 动物病毒的提纯和感染单位测定 15
第二章 病毒的形态学观察 20
实验四 负染法观察提纯的病毒 23
实验五 免疫电镜法检测发病叶片中的病毒 24
实验六 超薄切片法观察组织中的病毒及细胞病理学变化 26
实验七 免疫胶体金检测细胞中病毒的分布 28
第三章 RNA病毒侵染性cDNA克隆的构建 33
实验八 烟草花叶病毒侵染性cDNA克隆的构建 33
实验九 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性cDNA克隆的构建 42
实验十 单引物扩增技术获得病毒基因组全序列 49
第四章 病毒的分子生物学检测技术 57
实验十一 RT-PCR检测植物叶片中的特定病毒 62
实验十二 病毒的斑点杂交检测 67
实验十三 病毒的Northern blotting检测技术 71
实验十四 病毒的实时荧光定量PCR检测 75
实验十五 反转录环介导的等温扩增技术检测病毒 86
第五章 病毒的血清学检测技术 94
实验十六 植物病毒抗血清效价的测定 96
实验十七 琼脂双扩散反应检测植物病毒 98
第二部分 免疫学实验 103
第六章 实验动物 103
实验动物简介 103
实验十八 实验动物采血方法 114
实验十九 实验动物免疫方法 116
实验二十 常用免疫学实验动物模型的建立 120
第七章 细胞培养技术 133
实验二十一 细胞的传代与细胞计数 136
实验二十二 细胞的冻存与复苏 139
实验二十三 树突细胞的诱导及培养 142
第八章 抗体制备及检测技术 144
实验二十四 兔抗血清制备 144
实验二十五 单克隆抗体的制备 146
实验二十六 抗体的纯化 153
实验二十七 血凝和血凝抑制实验 154
实验二十八 酶联免疫吸附实验 156
实验二十九 免疫电泳实验 159
实验三十 蛋白免疫印迹实验 162
实验三十一 免疫组织化学实验 164
实验三十二 细胞免疫荧光实验 167
第九章 补体实验 170
实验三十三 补体与补体单位的滴定实验 170
实验三十四 溶血素制备与补体参与的溶血反应 172
实验三十五 补体介导的细胞毒实验 175
第十章 淋巴细胞分离纯化 177
实验三十六 制备免疫细胞悬液 177
实验三十七 密度梯度离心法分离外周血液中的白细胞 181
实验三十八 脾脏不同免疫细胞磁珠分选实验 183
第十一章 免疫细胞荧光染色流式细胞仪检测 188
实验三十九 免疫细胞表面分子检测 188
实验四十 胞内细胞因子表达检测 192
实验四十一 Annexin V/PI双荧光染色检测细胞凋亡 194
第十二章 免疫细胞功能实验 197
实验四十二 淋巴细胞转化实验 197
实验四十三 混合淋巴细胞反应 199
实验四十四 T细胞增殖实验——MTT法 201
实验四十五 T细胞增殖实验——3H-TdR掺入法 204
实验四十六 T细胞增殖实验——CFSE染色法 206
实验四十七 体外CTL实验 208
实验四十八 体内CTL实验 211
实验四十九 酶联免疫斑点实验 214
实验五十 B细胞增殖实验 216
实验五十一 B细胞溶血空斑实验 218
实验五十二 NK细胞杀伤活性实验——乳酸脱氢酶释放法 220
实验五十三 NK细胞杀伤活性检测——MTT比色法 222
实验五十四 NK细胞杀伤活性实验——51 Cr释放法 223
附录一 常用血液抗凝剂的配制及用法 226
附录二 常用消毒液的配制及用途 228
附录三 常用试剂和溶液的配制 229