第一章 绪论 1
第一节 松毛虫和松叶蜂的发生与防治概述 1
第二节 昆虫病原真菌在松毛虫和松叶蜂防治上的应用概述 7
第三节 研究北方地区松毛虫和松叶蜂的病原真菌的内容、目的及意义 10
第二章 病原真菌的采集、分离和鉴定 13
第一节 松毛虫的病原真菌 13
一、林间自然染病油松毛虫幼虫的采集 13
二、病原菌种的分离鉴定 15
1．培养基制备 15
2．菌株的分离 15
3．菌株的回接杀虫试验 15
4．菌株鉴定 16
三、菌株对松毛虫的致病力试验 18
1．球孢白僵菌1573菌株对油松毛虫的致死率 20
2．布氏白僵菌2382菌株对油松毛虫的致死率 20
四、讨论 21
第二节 松叶蜂的病原真菌 21
一、林间自然染病的松叶蜂幼虫的采集 21
二、病原菌的分离与回接杀虫试验 24
1．菌株的分离 24
2．菌株的回接杀虫试验 25
三、病原菌的形态特征与分子鉴定 26
1．菌株的显微形态与超微结构观察 26
2．病原菌的分子鉴定 30
四、菌株对松叶蜂致病力试验 30
1．菌株对松扁叶蜂幼虫的致病效果 30
2．菌株对松阿扁叶蜂致病效果 31
五、讨论 32
第三章 菌种的生物学特性 34
第一节 油松毛虫病原真菌的生物学特性 34
一、球孢白僵菌（Beauveria bassiana）1573菌株的生物学特性 34
1．1573菌株在低温条件下的生长速率和产孢量 34
2．1573菌株在低温低湿条件下孢子萌发率 36
3．不同培养基上1～5代菌落的特征及稳定性 36
4．不同培养基上1～5代菌落的生长速率 38
5．不同培养基上1～5代菌落的产孢量 39
6．不同培养基上1～5代菌落的胞外蛋白酶产量 41
7．讨论 42
二、布氏白僵菌（Beauveria brongniartii）2382菌株的生物学特性 42
1．温度对2382菌株菌落生长速率和产孢量的影响 43
2．不同温度和相对湿度对2382菌株孢子萌发率的影响 43
三、讨论 44
第二节 松叶蜂病原真菌的生物学特性 44
一、紫外线照射对菌落直径的影响 44
二、紫外线照射对菌株产孢量的影响 46
三、3个菌株的胞外酶活性 47
四、讨论 48
第四章 病原真菌感染油松毛虫的组织病理学 51
第一节 油松毛虫感染球孢白僵菌1573菌株后的组织病理变化 52
一、油松毛虫感染球孢白僵菌后的外部症状 52
二、球孢白僵菌在油松毛虫虫体表面的附着、萌发与入侵 52
三、球孢白僵菌对油松毛虫体壁的入侵 56
四、球孢白僵菌对虫体的体壁和内部器官的侵染 57
第二节 油松毛虫感染布氏白僵菌2382菌株后的组织病理变化 60
一、油松毛虫感染布氏白僵菌后的外部症状 60
二、布氏白僵菌在松毛虫体表的附着、萌发和入侵 61
三、布氏白僵菌菌感染油松毛虫的透射电镜观察 65
四、布氏白僵菌在松毛虫体内的感染和组织病理变化 67
第三节 讨论 70
第五章 病原真菌感染后松毛虫和松叶蜂体内的生化反应 73
第一节 球孢白僵菌1573菌株感染后油松毛虫体内保护酶的变化 73
一、球孢白僵菌感染后油松毛虫体内超氧化物歧化酶（SOD）的变化 73
1．SOD活性的变化 73
2．SOD同工酶带的变化 75
二、球孢白僵菌孢子液处理后油松毛虫体内过氧化氢酶（CAT）的变化 77
1．CAT活性的变化 77
2．CAT同工酶带的变化 79
三、球孢白僵菌感染后油松毛虫体内多酚氧化酶（PPO）的变化 80
四、球孢白僵菌感染后油松毛虫体内酯酶同工酶的变化 82
五、讨论 84
第二节 病原真菌侵染后松叶蜂幼虫体内保护酶和解毒酶的活性变化 85
一、松叶蜂幼虫感染真菌后SOD活性变化 85
二、松叶蜂幼虫感染真菌后CAT活性变化 86
三、松叶蜂幼虫感染真菌后POD活性变化 87
四、松叶蜂幼虫感染真菌后乙酰胆碱酯酶（AchE）活性变化 88
五、松叶蜂幼虫感染真菌后谷胱甘肽－S－转移酶（GST）的活性变化 88
六、讨论 88
第三节 油松毛虫幼虫的抗菌物质及其抗菌活性研究 90
一、抗菌活性的测定 90
二、温度变化对抗菌活性的影响 92
三、pH值对抗菌活性的影响 93
四、反复冻融对抗菌活性的影响 93
五、血淋巴中蛋白质成分的电泳分析 94
六、讨论 95
第四节 白僵菌侵染对油松毛虫幼虫血淋巴中糖代谢的影响 96
一、菌株培养过程中海藻糖酶活性的变化 97
二、染菌后虫体内海藻糖酶活性的变化 97
三、染菌后虫体内海藻糖含量的变化 98
四、染菌后虫体内葡萄糖含量的变化 99
五、讨论 101
第六章 病原真菌代谢毒素及其对松毛虫的作用 102
第一节 布氏白僵菌2382菌株代谢毒素的分离纯化、成分鉴定及其对松毛虫的毒性 102
一、菌株代谢产物的提取及粗提物对油松毛虫的杀虫活性 102
1．菌株代谢产物的提取 102
2．菌株代谢产物粗提液的杀虫活性试验 103
二、菌株代谢粗提物的初步分离及分离组分对油松毛虫的杀虫活性 103
1．菌株代谢粗提物初步分离的流动相选择 103
2．菌株代谢粗提物的硅胶柱层析 103
3．菌株代谢粗提物分离组分的杀虫试验 104
三、菌株毒素化学成分的鉴定及主要毒素组分对油松毛虫的杀虫活性 104
1．菌株毒素化学成分的鉴定 104
2．鉴定出的毒素组分纯品的杀虫试验 106
四、菌株代谢毒素的半制备技术 108
1．毒素粗提物的高速逆流色谱分离纯化 108
2．GC和GC/MS分析鉴定结果 109
五、讨论 113
第二节 病原真菌代谢毒素对油松毛虫解毒酶活性的影响 114
一、2382菌株的孢子感染和次生代谢毒素对油松毛虫体内GST活性的影响 114
1．2382菌株的孢子感染对虫体内GST活性的影响 114
2．菌株代谢产物对油松毛虫幼虫体内GST活性的影响 115
二、2382菌株的孢子感染和次生代谢毒素对油松毛虫体内EST活性的影响 116
1．菌株的孢子感染对虫体内EST活性的影响 116
2．菌株的代谢产物对虫体内EST活性的影响 116
三、讨论 120
第三节 2382菌株代谢产物对油松毛虫幼虫血细胞凋亡的影响 122
一、血细胞凋亡的荧光显微镜观察（FM） 122
二、血细胞凋亡的透射电镜的观察（TEM） 125
三、血细胞凋亡的流式细胞仪检测（FCM） 127
四、讨论 131
第七章 营养型湿菌粉剂的研制与林间应用 133
第一节 液体发酵和固体培养条件的优化研究 133
一、液体发酵条件对菌种孢子产量的影响 133
1．发酵时间对白僵菌产孢量的影响 134
2．pH值对白僵菌产孢量的影响 135
3．不同碳源对白僵菌产孢量的影响 135
4．不同氮源对白僵菌产孢量的影响 136
5．结论 137
二、固体培养基对菌种产孢量的影响 137
1．固体培养基的配方对菌株产孢量的影响 137
2．培养基初始含水率对产孢量的影响 138
3．结论 138
第二节 营养型湿菌粉剂的制备 139
第三节 营养型湿菌粉剂的林间应用 141
一、营养型湿菌粉剂林间防治松毛虫 141
1．冬季应用防治越冬油松毛虫幼虫 141
2．春季应用防治越冬油松毛虫幼虫 142
二、营养型湿菌粉林间防治松叶蜂 143
主要参考文献 145