第一章 病理常规制片技术 1
第一节 苏木素-伊红(HE)制片技术 1
一、固定、取材 1
二、脱水、透明 6
三、渗蜡、包埋 10
四、切片、裱片 12
五、染色 14
六、HE染色、封片 15
七、HE制片的质量控制 22
八、细胞学涂片制片技术 24
九、眼部肿物临床快速控制切除法 26
十、组织脱钙 29
十一、HE教学片褪色重染方法 30
十二、附录 31
第二节 冷冻切片技术 34
一、基本概念 34
二、仪器设备的配置 34
三、试剂配制 35
四、冷冻切片操作 36
五、染色结果观察 37
六、质量控制 37
七、注意事项 38
八、冷冻切片技术的优点和局限性 39
九、冷冻切片技术的应用 39
第三节 人眼球的固定与制片技术 39
一、固定 40
二、取材 40
三、脱水 43
四、包埋、切片 44
五、染色、封片 45
六、结果 46
第四节 几种动物眼球的固定与制片技术 47
一、兔子眼球标本的制作 48
二、大白鼠眼球标本的制作 50
三、小白鼠眼球标本的制作 52
第五节 火棉胶制片技术 55
一、概述 55
二、方法 55
三、火棉胶制片的优缺点 58
四、注意事项 59
第二章 特殊染色与组织化学染色 61
第一节 概述 61
一、特殊染色和组织化学的概念与机制 61
二、应用范围 62
三、试剂配制 62
四、实验对照 62
第二节 网状纤维染色 62
一、概述 62
二、染色方法 63
三、染色原理 64
四、注意事项 64
五、应用 65
第三节 胶原纤维染色 65
一、概述 65
二、染色方法 66
三、染色原理 68
四、注意事项 68
五、应用 68
第四节 弹力纤维染色 69
一、概述 69
二、染色方法 69
三、染色原理 71
四、注意事项 71
五、应用 71
第五节 肌纤维染色 71
一、概述 71
二、染色方法 72
三、染色原理 73
四、注意事项 73
五、应用 73
第六节 纤维素染色 74
一、概述 74
二、染色方法 74
三、染色原理 76
四、注意事项 76
五、应用 77
第七节 细菌染色 77
一、概述 77
二、染色方法 77
三、染色原理 79
四、注意事项 79
五、应用 79
第八节 抗酸菌染色 80
一、概述 80
二、染色方法 80
三、染色原理 82
四、注意事项 82
五、应用 82
第九节 霉菌染色 83
一、概述 83
二、染色方法 83
三、染色原理 85
四、注意事项 85
五、应用 85
第十节 脂类染色 86
一、概述 86
二、染色方法 86
三、染色原理 87
四、注意事项 88
五、应用 89
第十一节 淀粉样变染色 89
一、概述 89
二、性质 89
三、染色方法 90
四、染色原理 92
五、分类 92
六、注意事项 92
七、应用 92
第十二节 糖类染色 93
一、概述 93
二、染色方法 94
三、染色原理 95
四、注意事项 95
五、应用 96
第十三节 黏液物质染色 96
一、概述 96
二、染色方法 97
三、染色原理 99
四、注意事项 100
五、应用 100
第十四节 黑色素染色 100
一、概述 100
二、染色方法 101
三、染色原理 102
四、注意事项 102
五、应用 103
第十五节 含铁血黄素染色 103
一、概述 103
二、染色方法 104
三、染色原理 105
四、注意事项 105
五、应用 105
第十六节 钙盐染色 106
一、概述 106
二、染色方法 106
三、染色原理 107
四、注意事项 107
五、应用 107
第十七节 核酸染色 108
一、概述 108
二、染色方法 108
三、染色原理 110
四、注意事项 110
五、应用 111
第十八节 酶组织化学染色 111
一、概述 111
二、染色方法 111
三、染色原理 114
四、注意事项 114
五、应用 115
第十九节 玻璃器皿的洗涤 115
一、新玻璃器皿的洗涤 115
二、使用后玻璃器皿的洗涤 115
三、重铬酸钾-硫酸清洁液的配制 116
第三章 免疫组织化学技术 118
第一节 免疫组织化学概论 118
一、抗原 118
二、抗体 119
三、常用免疫组织化学技术及其机制 119
四、免疫组织化学技术的特点与局限 119
第二节 免疫组织化学的基本技术方法 120
一、抗体的制备与使用 120
二、组织材料的处理 122
三、免疫染色 122
四、对照的设定 124
五、免疫组织化学染色结果的判断 125
第三节 免疫酶组织化学技术 126
一、标记抗体所用的酶及其性质 126
二、标记常用的酶 126
三、提高免疫酶组织化学技术敏感性的方法 126
四、提高免疫酶组织化学方法敏感性的技术手段 128
五、免疫酶组织化学染色干扰因素的消除 129
六、免疫组织化学检测试剂盒的合理选用 130
第四节 免疫荧光技术 130
一、免疫荧光染色的原理 131
二、免疫荧光技术染色操作准备 132
第四章 分子生物学技术 134
第一节 原位杂交技术 134
一、原位杂交的基本原理 134
二、原位杂交的探针 134
三、原位杂交技术的操作 136
四、荧光原位杂交技术 138
第二节 PCR技术 141
一、PCR的概念及基本原理 141
二、PCR的基本反应步骤 141
三、PCR反应的各种组分 142
四、PCR反应条件的控制 143
五、PCR技术的基本步骤 144
六、PCR的主要类型 145
七、PCR操作中的污染及对策 147
八、PCR在病理诊断中的应用 149
第五章 人眼部组织细胞培养技术 152
第一节 细胞体外培养的环境与准备工作 152
一、培养实验室的设计和守则 152
二、体外细胞培养的设备与器械 154
三、培养用品的洗涤与消毒灭菌 156
四、组织细胞培养的污染及排除 160
五、培养基及常用的消化液和抗生素 161
第二节 正常人眼组织细胞的体外培养 163
一、角膜上皮细胞的体外培养 164
二、角膜内皮细胞的体外培养 168
三、小梁细胞的体外培养 171
四、虹膜色素上皮细胞的体外培养 177
五、晶状体囊膜上皮细胞的体外培养 180
六、人睫状突无色素上皮细胞培养 184
七、人视网膜胶质细胞的体外培养 187
八、人视网膜血管内皮细胞的体外培养 191
九、视网膜色素上皮细胞的体外培养 196
十、结膜上皮细胞的体外培养 202
十一、人泪腺上皮细胞的体外培养 205
十二、Tenon囊成纤维细胞的体外培养 210
十三、视网膜M u ller细胞的体外培养 213
十四、视神经星形胶质细胞的体外培养 217
第三节 人眼内常见恶性肿瘤细胞的体外培养 220
一、视网膜母细胞瘤细胞的体外培养 220
二、人葡萄膜黑色素瘤细胞的体外培养 228
第四节 Rb细胞克隆及人脐静脉内皮细胞培养 235
一、Rb细胞克隆 235
二、人脐静脉内皮细胞的培养 239
第五节 细胞的冻存与复苏 244
第六节 细胞培养的小常识 246