第一章 绪论 1
第一节 分子生物学技术在中医药研究中的实例 2
第二节 分子生物学技术在中医药研究中的现状 6
第三节 中医药研究中经常使用的分子生物学技术 12
第四节 分子生物学技术在中医药研究中的展望 18
第二章 分子生物学常用基本技术 23
实验1 重组质粒 23
实验2 质粒转化大肠杆菌 26
实验3 阳性单菌落扩增与小量DNA制备 31
实验4 酶切重组质粒,电泳分离所插入的DNA 33
实验5 从凝胶中回收DNA 36
实验6 大量质粒DNA制备 39
实验7 哺乳类动物细胞的培养 41
实验8 植物细胞悬浮培养技术 48
第三章 DNA的研究方法 53
实验9 哺乳类动物基因组DNA的提取 53
实验10 植物基因组DNA的提取 58
实验11 基因组文库的建立与筛选 61
实验12 Southern blot 73
实验13 PCR 78
实验14 DNA双脱氧链终止法测序 83
实验15 动、植物药材的ISSR指纹图谱技术 92
实验16 中药RAPD指纹图谱技术 96
第四章 RNA的研究方法 99
实验17 总RNA提取 100
实验18 mRNA的分离 103
实验19 Northern blot 105
实验20 RT-PCR 110
实验21 ABI荧光实时定量PCR 113
实验22 原位杂交 118
实验23 基因芯片 122
实验24 cDNA Array 132
实验25 DD-PCR 136
实验26 cDNA库建立 141
实验27 基因全序列cDNA库筛选 152
实验28 RACE-PCR 157
第五章 蛋白质的研究方法 161
实验29 哺乳类动物组织蛋白质的提取 162
实验30 植物组织蛋白质的提取 165
实验31 Western blot 167
实验32 ELISA 178
实验33 免疫组织化学 182
实验34 单克隆抗体制备技术 188
实验35 蛋白质双向电泳 196
第六章 基因功能与表达调控的研究方法 212
实验36 RNAi 213
实验37 Small RNA的提取与分析 225
实验38 报道基因与基因调控元件的检测 231
实验39 点突变PCR 236
实验40 基因敲除技术 240
实验41 Footprint 245
实验42 凝胶阻滞分析 252
实验43 植物细胞的基因转化 259
第七章 分子生物学常用网络资源及利用 266
第一节 美国国家生物技术信息中心 266
第二节 GenBank数据库查询与搜索 273
第三节 BLAST 279
第四节 EST的电子延伸 288
第五节 cDNA序列的蛋白阅读框架分析(ORF)、染色体定位及其在机体各组织中的表达预测 293
第六节 PCR引物或序列寡核苷酸探针的在线设计 299
第七节 蛋白质分析 301
附录 306
附一 分子生物学实验常用仪器设备 306
附二 常用生物学数据 307
附三 常用载体 311
附四 分子克隆常用酶 312
附五 常用储存液的配制 318
附六 常用液体培养基 319
附七 常用缓冲液 320
附八 常用酸碱溶液的浓度与分子量 320
附九 不同浓度酸碱液的pH 321
附十 核酸的纯化(用酚-氯仿抽提) 322
附十一 核酸浓缩 322
附十二 分光光度法测定DNA及RNA含量 323
附十三 Sephadex的水化 323
附十四 放射性度量单位和数据 324
附十五 科学单位 324
附十六 离心速度和离心力换算 326
附十七 分子生物学术语英汉对照 326