《蛋白质分析实验技术指南》PDF下载

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  • 作  者:李玉花主编
  • 出 版 社:北京:高等教育出版社
  • 出版年份:2011
  • ISBN:9787040310658
  • 页数:268 页
图书介绍:本书将蛋白质科学的前沿研究技术方法分成8个模块,内容包括蛋白质样品的制备,蛋白质定量、电泳与染色分析,蛋白质原核表达与纯化,蛋白质与蛋白质相互作用的研究,蛋白质与核酸相互作用研究,差异表达蛋白分析,磷酸化蛋白质的检测与分析,蛋白质质谱鉴定等。这些模块涵盖了蛋白质科学最常用的技术方法,模块间有机结合,又独立成章。 本书易学、易操作,详尽介绍实验方法,并总结归纳每步操作的注意事项及整个操作过程如何优化、提高成功率;每一模块都有实验流程图和实验结果图,具有很好的示范作用。本书既可作为本科生、研究生的专业课教材,又可供从事相关科研工作的专业人士参考。

模块一 蛋白质样品的制备 1

1-1 总蛋白质样品的制备 4

1-2 亚细胞器蛋白质样品的制备 11

1-3 修饰蛋白质样品的制备 20

模块二 蛋白质定量、电泳与染色分析 34

2-1 蛋白质浓度测定 37

2-2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 54

2-3 蛋白质凝胶染色分析 66

模块三 蛋白质的原核表达与纯化 73

3-1 蛋白质的原核表达及检测 76

3-2 GST融合蛋白的纯化 82

3-3 多聚组氨酸融合蛋白的表达与纯化 86

3-4 MBP融合蛋白的表达与纯化 89

模块四 蛋白质与蛋白质相互作用的研究 93

4-1 酵母双杂交系统检测蛋白质的相互作用 96

4-2 酵母双杂交系统筛选相互作用的蛋白质 102

4-3 免疫共沉淀检测蛋白质的相互作用 108

4-4 蛋白质亚细胞共定位 112

4-5 融合蛋白沉降技术分析蛋白质的相互作用 117

模块五 蛋白质与核酸相互作用的研究 121

5-1 启动子调控元件分析 124

5-2 电泳迁移率实验分析 134

5-3 染色质免疫沉淀法分析 142

5-4 细胞瞬时相互作用分析 149

5-5 酵母单杂交分析 153

5-6 PCR辅助蛋白质-DNA序列特异性分析 167

模块六 差异表达蛋白质分析 173

6-1 双向电泳法分析差异表达蛋白质 176

6-2 荧光标记差异分析凝胶电泳法分析差异表达蛋白质 188

6-3 同位素标记法分析差异表达蛋白质 199

模块七 磷酸化蛋白质的检测与分析 205

7-1 32P放射性标记检测 208

7-2 PRO-Q Diamond染色法 212

7-3 磷酸化抗体检测法 224

7-4 亲和富集法 230

7-5 固相金属离子亲和色谱法 235

7-6 强阳离子交换色谱(SCX)法 240

7-7 磷酸化肽段和磷酸化位点的质谱鉴定 243

模块八 蛋白质质谱鉴定 247

8-1 凝胶分离样品的质谱鉴定 250

8-2 液相色谱分离样品的质谱鉴定 262