第一篇 微生物原生质体融合 3
第一章 原生质体融合的发展简史 3
第一节 基本概念 3
第二节 细胞自发融合现象的发现 4
第三节 原生质体制备阶段 5
第四节 人工诱导原生质体(细胞)融合阶段 6
第五节 原生质体融合技术的发展和应用阶段 8
第六节 基因组重排技术阶段 14
第二章 原生质体融合的意义 17
第一节 原生质体融合在生物工程和现代微生物技术中的地位 17
第二节 原生质体融合、原生质体技术、基因组重排的理论意义 19
第三节 原生质体融合技术、基因组重排的实践意义 26
第三章 原生质体融合的程序和方法 30
第一节 微生物原生质体融合的程序 30
第二节 原生质体融合的关键步骤 40
第四章 细菌的原生质体融合 42
第一节 枯草芽孢杆菌的种内株间融合 43
第二节 巨大芽孢杆菌的种内株间融合 46
第三节 枯草芽孢杆菌与棒杆菌的科间原生质体融合 49
第四节 枯草芽孢杆菌与黑曲霉的原生质体激光融合 52
第五节 大肠杆菌(E.coli)的原生质体融合 55
第六节 光合细菌的种间原生质体融合 59
第七节 双歧杆菌与乳杆菌的原生质体融合 59
第八节 根瘤菌属间的原生质体融合 60
附录 61
第五章 放线菌的原生质体融合 64
第一节 天蓝链霉菌种内株间的融合 64
第二节 小单胞菌种内株间的融合 66
第三节 庆丰链霉菌的原生质体融合 67
第四节 链霉菌的原生质体电融合 68
第五节 链霉菌的原生质体激光融合 69
第六节 弗氏链霉菌的原生质体融合 70
第七节 阿维链霉菌的原生质体融合 71
第八节 诺卡氏菌的原生质体融合 72
附录 74
第六章 丝状真菌的原生质体融合 76
第一节 产紫杉醇的树状多节孢的原生质体融合 76
第二节 几种霉菌的种内株间融合 84
第三节 木霉(Trichoderma)的原生质体融合 94
第四节 红曲霉(Monascus)原生质体制备和再生 95
第五节 被孢霉菌(Mortierella isabellina)的原生质体制备和再生 96
第六节 白僵霉菌(Beauveria)的原生质体制备和再生 97
附录 98
第七章 酵母菌的原生质体融合 100
第一节 酿酒酵母的原生质体融合 100
第二节 酿酒酵母与假丝酵母的原生质体融合 112
第三节 假丝酵母的种内株间原生质体融合 112
第四节 酿酒酵母与克鲁维酵母的属间融合 112
第五节 红发夫酵母的原生质体融合 113
第六节 酿酒酵母与木霉(Trichoderma)属间原生质体融合 114
第七节 酵母菌与光合细菌的界间融合 114
第八章 蕈菌原生质体融合 115
第一节 平菇和双孢菇的原生质体融合 117
第二节 金针菇的原生质体融合 120
第三节 香菇的原生质体融合 123
第四节 灵芝的原生质体融合 126
第五节 侧耳属种间原生质体融合 130
附录 134
第二篇 原生质体融合的诸因子分析 139
第九章 影响原生质体制备的因子 139
第一节 酶的种类与浓度 139
第二节 酶解温度和pH值 144
第三节 酶解时间 149
第四节 菌体的生理状态 153
第五节 菌体的预处理 158
第六节 洗液与原生质体制备液 165
第七节 菌体的浓度与分散程度 177
第八节 菌体的生长形态 179
第九节 其他因素 183
第十节 原生质体制备效果的检验 183
第十一节 原生质体形成规律 185
第十章 影响原生质体再生的因子 201
第一节 影响原生质体自身活性的因素 201
第二节 再生培养基的选择 246
第三节 再生时的培养温度 275
第四节 操作方法与双层培养法 276
第五节 再生效果的检测 282
第六节 原生质体的再生机制 283
第十一章 影响原生质体融合的因素 292
第一节 聚合剂的种类与促进融合的方式 292
第二节 PEG的作用机理及优缺点 296
第三节 PEG诱导融合的过程 297
第四节 影响融合因素 298
第五节 融合子的检出与鉴定 307
第三篇 原生质体技术与基因组重排 319
第十二章 原生质体技术的发展与应用 319
第一节 原生质体融合技术的发展与应用 319
第二节 其他原生质体技术的应用 337
第十三章 基因组重排(DNA shuffling) 350
第一节 基因组重排的概述 350
第二节 细菌的基因组重排 355
第三节 用Genome shuffling技术选育紫杉醇高产菌株 358
第四节 基因组改组的应用实例 367
参考文献 385