第0章 绪论 1
0.1 植物组织培养的定义和目的 1
0.2 植物组织培养发展简史 1
0.2.1 国外植物组织培养发展简史 1
0.2.2 我国植物组织培养发展简史 3
0.3 植物组织培养的研究动向 4
0.4 植物组织培养的特点 7
0.5 我国规模化、企业化组织培养的现状 7
小结 9
复习思考题 9
参考文献 9
推荐阅读书目 9
第1章 组织培养室的设计与培养基制备 10
1.1 组织培养室的设计 10
1.1.1 组织培养室的设计要求 10
1.1.2 组织培养室的组成与布局 11
1.2 仪器设备和器具 13
1.2.1 基本仪器设备 13
1.2.2 常用器皿与器械 18
1.3 清洗和灭菌 20
1.3.1 清洗 20
1.3.2 消毒和灭菌 22
1.4 培养基的组成和配制 27
1.4.1 培养基的成分 27
1.4.2 培养基的种类 31
1.4.3 培养基母液的配制 33
1.4.4 培养基的配制 35
小结 35
复习思考题 36
参考文献 36
推荐阅读书目 36
第2章 外植体的选择、灭菌、接种与培养 37
2.1 外植体的选择与灭菌 37
2.1.1 外植体的类型 37
2.1.2 选择外植体时应该遵循的原则 38
2.1.3 外植体、接种器具及接种空间的灭菌 38
2.2 外植体的接种与培养 43
2.2.1 外植体的接种 43
2.2.2 外植体的培养和驯化 44
2.2.3 外植体的成苗途径 45
2.2.4 培养条件 46
2.3 外植体培养过程中污染的发生及其防治 48
2.3.1 外植体污染的原因 48
2.3.2 污染的防治 49
小结 51
复习思考题 51
参考文献 51
推荐阅读书目 52
第3章 植物组织培养原理 53
3.1 植物细胞全能性 53
3.1.1 植物细胞全能性 53
3.1.2 决定作用与形态发生感受态 55
3.2 植物试管苗的生根 60
3.2.1 生根机理的研究 60
3.2.2 培养基成分及pH对试管苗生根的影响 62
3.2.3 培养微环境对试管苗生根的影响 68
3.2.4 外植体类型与生根的关系 70
3.3 植物试管苗玻璃化及其防治 71
3.3.1 试管苗玻璃化现象发生的普遍性 72
3.3.2 玻璃化苗的形态解剖学特征 74
3.3.3 玻璃化苗的生理生化特点 74
3.3.4 影响玻璃化苗发生的因素 75
3.3.5 玻璃化苗发生的机理 78
3.3.6 玻璃化苗的综合防治 79
3.4 植物病毒的脱除及鉴定 80
3.4.1 病毒的概念 80
3.4.2 病毒的危害及防治研究 80
3.4.3 脱病毒的方法 81
3.4.4 无病毒植物的鉴定 92
3.5 植物试管苗的移栽 97
3.5.1 试管苗移栽后易于死亡的原因 97
3.5.2 提高试管苗移栽成活率的技术和措施 102
小结 105
复习思考题 105
参考文献 106
推荐阅读书目 107
第4章 离体培养中的遗传与变异 108
4.1 离体培养中的遗传与变异 108
4.1.1 植株在自然生长状态下的染色体变异 108
4.1.2 植物在离体培养条件下的染色体变异 109
4.1.3 影响无性系变异的因素 110
4.1.4 染色体变异与再生植株发生 113
4.2 体细胞变异的细胞学与分子遗传学机制 114
4.2.1 体细胞无性系变异的细胞学机制 114
4.2.2 体细胞无性系变异的分子遗传学机制 115
4.3 体细胞无性系变异的诱导与选择 118
4.3.1 体细胞无性系变异的诱导 118
4.3.2 体细胞无性系变异的筛选 120
4.3.3 体细胞无性系变异的应用 123
小结 125
复习思考题 125
参考文献 126
推荐阅读书目 126
第5章 植物组织器官培养 127
5.1 植物组织器官离体培养的途径与方法 127
5.1.1 植物组织器官离体培养的再生途径 127
5.1.2 植物组织器官离体培养的方法 128
5.1.3 植物组织培养的增殖及计算 130
5.2 愈伤组织培养 131
5.2.1 愈伤组织的形成和增殖 131
5.2.2 影响愈伤组织培养的因子 132
5.2.3 愈伤组织的再分化 134
5.2.4 愈伤组织培养的应用 140
5.2.5 操作实例 141
5.3 植物营养器官培养 143
5.3.1 植物根段培养 143
5.3.2 植物茎段培养 145
5.3.3 植物叶培养 146
5.4 植物繁殖器官培养 147
5.4.1 植物花器官培养 147
5.4.2 植物幼果培养 147
5.4.3 植物种子培养 148
5.5 花药培养 148
5.5.1 花药培养的程序 148
5.5.2 花粉植株的诱导和发育途径 149
5.5.3 游离小孢子(花粉)培养 151
5.5.4 影响花粉培养的因子 153
5.5.5 花粉植株的遗传鉴定与染色体加倍 159
5.5.6 花药培养的应用 161
5.5.7 操作实例 162
5.6 胚乳培养 163
5.6.1 胚乳培养的程序 164
5.6.2 胚乳愈伤组织诱导和建立 164
5.6.3 影响胚乳培养的因素 165
5.6.4 胚乳植株再生方式 166
5.6.5 胚乳培养中的组织学和细胞学观察 167
5.6.6 胚乳培养的应用 168
5.6.7 操作实例 169
5.7 胚培养 169
5.7.1 胚培养的种类 170
5.7.2 胚培养的主要技术 170
5.7.3 影响胚培养的因素 170
5.7.4 早熟萌发 172
5.7.5 胚培养的成苗途径 173
5.7.6 胚培养的应用 175
5.7.7 操作实例 177
5.8 离体无性快繁 177
5.8.1 离体无性快繁的优点 178
5.8.2 离体无性快繁的途径和方法 178
5.8.3 离体无性快繁的操作程序 181
5.8.4 实例操作 185
小结 186
复习思考题 186
参考文献 187
推荐阅读书目 187
第6章 体细胞杂交 188
6.1 体细胞杂交概述 188
6.1.1 植物体细胞杂交的历史与现状 190
6.1.2 植物体细胞杂交的重要性和局限性 193
6.1.3 体细胞杂交的步骤 194
6.2 原生质体分离 196
6.2.1 材料准备 196
6.2.2 细胞壁的解除 199
6.2.3 原生质体纯化 203
6.2.4 原生质体活力检测 204
6.2.5 原生质体培养 205
6.3 原生质体的融合和融合细胞再生 208
6.3.1 原生质体的融合类型 208
6.3.2 原生质体的融合方法 210
6.3.3 影响体细胞杂交的因素 212
6.3.4 融合细胞再生 212
6.4 杂种细胞的选择和体细胞杂种鉴定 213
6.4.1 体细胞融合产物的类型 213
6.4.2 融合产物细胞学 214
6.4.3 杂种细胞的选择系统 216
6.4.4 体细胞杂种的鉴定 217
6.4.5 体细胞杂种的遗传特性 219
6.5 体细胞杂交技术的应用 220
6.5.1 创造新遗传变异 220
6.5.2 用于CMS性状研究 222
6.5.3 用于定向转移胞质基因控制性状及核质互作研究 222
小结 223
复习思考题 223
参考文献 224
推荐阅读书目 226
第7章 植物转基因受体系统建立 227
7.1 植物基因遗传转化概述 227
7.1.1 植物基因工程概述 227
7.1.2 植物基因遗传转化技术 239
7.1.3 农杆菌介导的植物基因转化 241
7.2 植物转基因受体系统的条件 252
7.2.1 高效稳定的再生能力 253
7.2.2 稳定的遗传特性 254
7.2.3 稳定的外植体来源 254
7.2.4 对选择压力的敏感性 255
7.2.5 对农杆菌侵染的敏感性 256
7.3 植物基因转化受体系统的类型及其特性 258
7.3.1 愈伤组织再生系统 258
7.3.2 直接分化再生系统 259
7.3.3 原生质体再生系统 260
7.3.4 胚状体再生系统 260
7.3.5 生殖细胞受体系统 261
7.4 植物基因转化受体系统的建立程序 262
7.4.1 高频再生系统的建立 262
7.4.2 抗生素的敏感性试验 266
7.4.3 农杆菌的敏感性试验及菌种的选择 267
小结 267
复习思考题 267
参考文献 268
推荐阅读书目 269
第8章 植物离体资源的种质保存 270
8.1 种质保存体系与材料类型 270
8.1.1 种质保存体系 270
8.1.2 种质资源保存的材料类型 271
8.2 常温保存技术 272
8.2.1 降低培养基中的营养水平 272
8.2.2 培养基中添加植物生长调节物质 273
8.2.3 提高渗透压 274
8.2.4 降低培养环境中氧气浓度或培养基中氧分压 275
8.2.5 胶囊化或脱水 275
8.3 低温保存技术 275
8.3.1 低温保存的基本原理 275
8.3.2 低温保存的基本程序 275
8.4 超低温保存技术 276
8.4.1 超低温保存的原理 277
8.4.2 植物适应低温与低温伤害 277
8.4.3 超低温保存植物种质的常用方法 279
8.5 种质保存过程中的遗传变异及其检测技术 287
8.5.1 离体保存中变异产生的因素 287
8.5.2 离体保存中遗传变异的检测技术 287
小结 289
复习思考题 289
参考文献 289
推荐阅读书目 291
第9章 植物细胞器官培养与次生代谢产物生产 292
9.1 概述 292
9.1.1 次生代谢产物 292
9.1.2 植物细胞培养 293
9.1.3 利用植物组织培养技术生产次生代谢产物的历史与现状 294
9.2 植物单细胞培养技术 295
9.2.1 单细胞分离 295
9.2.2 单细胞培养技术 296
9.3 植物细胞的大规模培养 298
9.3.1 植物细胞悬浮培养 298
9.3.2 植物细胞固定化培养 301
9.3.3 植物细胞生物反应器 301
9.4 植物细胞培养的次生代谢产物生产 304
9.4.1 植物细胞大规模培养生产次生代谢物的基本程序 304
9.4.2 影响植物组织和细胞培养中次生代谢产物积累的因素 305
9.4.3 提高次生代谢产物产量的途径 307
9.5 植物器官培养的次生代谢产物生产 311
9.5.1 毛状根培养 311
9.5.2 冠瘿组织培养 313
9.6 规模化培养植物细胞的次生代谢产物生产实例 314
9.6.1 人参细胞悬浮培养及工业化生产人参皂苷 314
9.6.2 紫草的细胞培养与工业化生产紫草素 314
小结 317
复习思考题 317
参考文献 317
推荐阅读书目 319
附录 植物组织培养常用培养基配方 320