第1章 一般检查 1
第一节 尿液一般检查 1
一、标本的收集与保存 1
上篇 实验诊断 1
二、理学检查 2
三、化学检查 3
四、显微镜检查 7
五、尿沉渣定量检查 8
第二节 非蛋白氮类化合物检查 9
一、血清(尿)尿素测定 9
二、血清(尿)肌酐测定 10
三、血清(尿)尿酸测定 12
一、皮质醇测定 13
第三节 肾上腺皮质激素测定 13
二、血浆皮质酮测定 16
三、醛固酮测定 16
四、尿17-酮类固醇测定 17
五、尿17-羟皮质类固醇测定 18
六、儿茶酚胺类激素测定 20
第2章 尿液脱落细胞和红细胞形态检查 25
第一节 脱落细胞检查 25
第二节 红细胞形态检查 26
第3章 尿液病原微生物检查 28
一、细菌的定性检查 28
二、细菌的定量检查 29
第一节 肾小球功能检查 30
一、内生肌酐清除率测定 30
第4章 肾功能检查 30
二、菊粉清除率测定 31
三、血肌酐测定 32
四、尿肌酐测定 32
五、指甲肌酐测定 33
六、头发肌酐测定 33
七、血清α1-微球蛋白测定 34
八、血清β2-微球蛋白测定 35
九、肾小球滤过分数 37
第二节 肾血流量测定 37
第三节 肾小管功能检查法 38
一、近端肾小管功能试验 38
二、远端肾小管功能测定 39
二、碳酸氢根重吸收排泄试验 42
第四节 肾小管酸中毒诊断试验 42
一、氯化铵负荷试验 42
第5章 肾脏免疫学检查 44
第一节 血清生化检查 44
一、总蛋白测定 44
二、白蛋白和球蛋白测定 45
三、蛋白电泳测定 46
四、免疫球蛋白测定 47
五、免疫球蛋白D测定 49
六、免疫球蛋白E测定 49
七、循环免疫复合物测定 50
八、抗链球菌溶血素O测定 52
九、C-反应蛋白测定 53
一、血浆纤维蛋白原含量测定 54
第二节 凝血功能检查 54
三、血FDP测定 56
二、血浆D-二聚体测定 56
四、纤溶酶原测定 57
五、纤溶酶测定 58
六、组织型纤溶酶原激活物 59
第三节 血清补体测定 60
一、总补体溶血活性测定 60
二、补体3测定 62
三、补体4测定 64
四、补体Clq定量测定 65
五、补体3肾炎因子测定 67
第四节 内分泌学检查 68
一、血管紧张素Ⅱ活性测定 68
六、血清补体4肾炎因子测定 68
二、血清维生素D3的测定 70
三、红细胞生成素测定 71
第五节 血清抗体测定 72
一、抗核抗体测定 72
二、抗双链DNA抗体测定 73
三、抗可提取抗原抗体测定 74
四、抗心磷脂抗体测定 75
五、抗肾小球基底膜抗体测定 76
六、抗肾小管基底膜(TBM)抗体测定 78
七、抗Tamm-Horsfall蛋白抗体测定 78
八、抗中性粒细胞细胞浆自身抗体测定 79
九、皮肤狼疮带试验 80
一、尿蛋白定性检查 81
第六节 尿蛋白与蛋白组分检查 81
二、尿本周蛋白定性检查 83
三、尿液乳糜试验 84
四、尿蛋白定量检查 85
五、尿蛋白十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 87
六、选择性蛋白尿分析 88
第七节 尿酶学测定 88
一、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定 88
二、乳酸脱氢酶同工酶(LDH)测定 90
三、尿丙氨酸氨肽酶(AAP)测定 91
四、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)测定 92
五、尿液溶菌酶测定 93
一、微量白蛋白测定 94
第八节 肾损伤的早期标志物检测 94
二、α1-微球蛋白测定 96
三、转铁蛋白测定 97
四、尿β2-微球蛋白测定 97
五、尿视黄醇结合蛋白(RBP)测定 98
六、尿蛋白-1(UP-1)测定 99
第九节 尿液特殊蛋白的检测 100
一、Ⅳ型胶原测定 100
二、转化生长因子β测定 101
三、纤维蛋白(原)降解产物检查 102
四、TH蛋白包裹游离细胞检测 104
第十节 尿路感染相关检查 104
二、尿抗体包裹细菌试验 105
一、尿IgA测定 105
三、尿亚硝酸盐测定 106
四、氯化三苯四氮唑还原试验 106
第6章 肾脏病理学检查 109
一、标本的处理 109
二、标本的制备 109
三、光镜染色 110
四、免疫荧光染色 112
五、透射电子显微镜技术 112
第7章 泌尿系结石的分析方法 114
第一节 化学定性分析 114
第二节 化学定量分析 118
第三节 物理分析 119
一、结石晶体基质结构 120
二、结石晶体结构 121
第8章 肾移植的组织配型 124
第一节 概述 124
一、组织配型的意义 124
二、主要组织相容性复合物简介 124
三、HLA特异性 125
四、肾移植HLA配型策略 126
五、抗HLA抗体的筛选意义 128
六、常用试剂的配备 128
第二节 淋巴细胞分离技术 129
一、密度梯度分离法 129
第三节 HLA抗体筛选技术 130
四、从脾脏和淋巴结分离淋巴细胞 130
二、淋巴细胞分离剂方法 130
三、免疫磁珠分离剂法 130
一、淋巴细胞毒交叉配合试验 131
二、莱姆德细胞板方法 132
三、莱姆德混合抗原(LATM)检测方法 132
四、莱姆德抗原板(LAT)检测方法 133
五、酶联STAT方法 134
第四节 HLA血清学分型技术 134
一、标准血清学分型 134
二、单克隆抗体分型 136
二、聚合酶链构象多态性分析 137
三、DNA序列测定 137
一、限制性片段长度多态性分析 137
第五节 HLA的DNA分型技术 137
四、聚合酶链反应寡核苷酸探针杂交 138
五、顺序特异性引物聚合酶链反应技术 139
第六节 HLA细胞学分型技术 140
一、混合淋巴细胞培养 140
二、纯合子细胞分型 140
三、预处理淋巴细胞分型 141
第9章 移植患者血药浓度检测 142
第一节 环孢菌素A测定 142
一、反相高效液相色谱法 142
二、高效毛细管电泳法 143
第二节 FK506测定 144
第10章 血液特殊抗原检测 146
第一节 前列腺特异抗原检测 146
一、ELISA法 147
第二节 甲胎蛋白检测 147
二、RIA法 148
第三节 绒毛膜促性腺激素测定 149
第11章 精液与精子检查 151
一、精液标本的采集和运送 151
二、精液一般检查 151
三、精液显微镜检查 153
四、精子顶体染色及其形态学检查 154
五、非精子细胞检查 155
六、白细胞检查 156
七、凋亡细胞检查 156
八、细胞凋亡的研究方法 158
二、Makler精子计数板 161
一、血细胞计数板 161
第12章 精液参数分析方法 161
三、Microcell计数池 162
四、计算机辅助精液分析 162
第13章 精子功能指标测定 164
第一节 精子膜功能测定 164
一、精子尾部低渗肿胀试验 164
二、伊红Y水试验 164
第二节 精子核功能测定 165
一、精子核DNA荧光染色 165
二、精子核蛋白组分测定 166
第三节 精子-仓鼠卵穿透试验 167
二、精子-宫颈黏液玻片穿透试验 168
一、精子毛细管穿透试验 168
第四节 精子和宫颈黏液相互作用 168
三、性交后试验 169
第五节 精子线粒体功能测定 170
一、NBT法 171
二、精子线粒体DNA检测 171
第14章 不育症相关抗体检查 173
第一节 抗精子抗体 173
一、混合抗球蛋白反应试验 173
二、酶联免疫吸附法 174
三、试管、玻片凝集试验 174
五、免疫珠结合试验 175
六、固相酶染色法 175
四、混合细胞凝集反应 175
七、间接荧光抗体试验 176
八、补体依赖法 176
第二节 抗透明带抗体 176
一、间接荧光法 176
二、ELISA法 177
第三节 其他相关抗体 177
一、子宫内膜抗体 177
二、抗磷脂抗体 178
三、抗卵巢抗体 178
四、抗人绒毛膜促性腺激素抗体 178
五、抗弓形虫抗体 178
六、滋养细胞膜抗体 178
二、单向免疫扩散法 180
一、抗补体法 180
第15章 精液免疫抑制物测定 180
三、ELISA夹心法 181
四、间接免疫荧光定位分析 181
第16章 精液生化功能指标测定 183
第一节 前列腺功能指标检查 183
一、精浆酸性磷酸酶测定 183
二、精浆柠檬酸测定 184
第二节 精液果糖测定 185
第三节 附睾功能指标测定 186
一、PENG法α-葡萄糖苷酶测定 186
二、精浆肉毒碱测定 186
一、电泳分离染色法 187
第四节 精液乳酸脱氢酶-X同工酶活性测定 187
二、比色法 188
第五节 精液顶体酶活力测定 189
一、BAEE水解法 189
二、明胶法 189
三、精氨酸酰胺酶活性测定 190
第17章 生殖系统微生物检查 191
第一节 细菌与真菌检查 191
一、普通细菌 191
二、结核分枝杆菌 191
三、杜克雷嗜血杆菌 191
四、淋病奈瑟菌 191
一、暗视野显微镜检 192
第二节 梅毒螺旋体检测 192
五、白色念珠菌 192
二、血清学检测 193
三、IgM抗体检测 193
四、分子生物学检测 193
第三节 人类免疫缺陷病毒(HIV)检测 193
一、HIV抗体测定 194
二、HIV核酸测定 195
三、病毒载量测定 195
四、p24抗原测定 196
五、HIV细胞培养 196
第四节 人类乳头瘤病毒(HPV)检测 196
二、血清学检查 197
一、刮片检查 197
第五节 衣原体检测 197
三、直接免疫荧光检查 198
四、培养法 198
第六节 支原体检测 198
一、解脲支原体和人型支原体培养分离及药敏试验 199
二、细胞培养支原体感染 200
第七节 其他检查 200
一、单纯疱疹病毒检查 200
二、巨细胞病毒的检查 201
三、风疹病毒检查 201
下篇 研究方法 203
第18章 研究文献的利用 203
第一节 医学文献 203
一、中文医学文献检索工具 204
第二节 医学文献检索工具 204
二、外文医学文献检索工具 205
三、光盘检索工具 206
第三节 互联网的应用 207
一、免费MEDLINE检索 207
二、Medical Matrix(医源) 207
三、Medical World Search(MWS医学世界检索) 207
四、HealthAtoZ 207
五、MedSite 208
六、其他 208
二、确定科研方向的客观依据 212
一、确定科研方向的意义 212
第一节 科研方向的确定 212
第19章 科研选题与研究思路 212
第二节 科研课题的选择 213
第三节 科研课题的设计 214
一、申请科研基金 214
二、课题设计原则 214
三、课题设计的审定 215
第四节 研究的哲学 215
第20章 常用试验方法 217
第一节 电子显微镜技术 217
一、基本原理 217
二、优点及适用范围 218
三、标准化电镜样品固定和包埋程序 218
四、应用进展 219
五、其他新型显微镜技术 221
第二节 免疫组织化学技术 223
一、概述 223
二、过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)技术 224
三、卵白素-生物素复合物(ABC)技术 225
四、S-P法 225
五、质量控制 226
六、临床意义 227
第三节 细胞培养技术 228
一、培养环境 228
二、细胞培养设施和基本条件 229
三、培养细胞的形态 229
四、培养用品的清洗与消毒 230
五、肿瘤细胞的培养 231
第四节 计算机图像分析 232
一、基本原理和系统构成 233
二、图像分析仪工作程序 233
三、主要用途 234
第五节 DNA提取技术 239
一、从组织中提取 239
二、从培养物中提取 240
三、单链质粒DNA的小量制备 241
四、从琼脂糖凝胶上分离DNA片段 241
五、从琼脂糖凝胶上洗脱DNA片段 242
第六节 自由基研究技术 242
一、超氧阴离子自由基(?)测定 242
二、羟自由基测定 243
三、H2O2的酚红氧化测定法 243
五、SOD活性测定 244
四、脂过氧化物荧光测定 244
六、过氧化氢酶(CAT)测定 245
七、谷胱甘肽氧化物酶测定 245
八、黄嘌呤氧化酶测定 246
九、化学发光法简介 246
十、自旋捕捉技术 247
十一、自由基产生系统 247
第七节 RNA提取技术 247
一、从悬浮或贴壁细胞中提取RNA 247
二、从大肠杆菌中分离RNA 248
三、用寡聚(dT)纤维素分多聚(A)+RNA 249
第八节 PCR技术 249
四、底物(脱氧核糖核苷三磷酸,dNTPs)浓度 250
五、PCR反应的酶及其浓度 250
一、PCR反应的成分和作用 250
三、TaqDNA聚合酶的活性 250
二、PCR反应的缓冲液 250
六、引物 251
七、PCR反应条件的选择 251
八、PCR反应的引物设计 251
九、耐热DNA聚合酶 252
第九节 Western blot技术 252
第十节 Southern blot技术 253
一、固相支持物的选择 253
二、印迹方法 254
三、放射性核素探针杂交 258
第十一节 Northern blot技术 259
一、RNA变性电泳 260
二、RNA转印技术 261
第十二节 转基因技术 263
一、基因转染技术 263
二、转基因动物技术 265
第十三节 基因芯片技术 266
一、基本概念 266
二、基因芯片的种类及方阵构建 267
三、样品的制备与标记 269
四、杂交反应 269
五、杂交信号检测 270
六、在医学上的应用 270
七、展望 273
一、原理及技术要点 274
第十四节 酶联免疫吸附技术 274
二、常用方法 275
三、泌尿外科应用举例 276
第十五节 原位杂交技术 277
一、基本技术 277
二、新技术发展 278
三、在研究中的应用 280
第十六节 受体配体结合试验 280
一、受体的概念 280
二、受体研究方法 281
三、受体-配基结合试验技术原则 281
第十七节 流式细胞术 282
二、抗利尿药 290
一、利尿药 290
第21章 药物药理学研究方法 290
三、抗肾炎药 291
四、抗肾病药 292
五、抗急性肾衰药 292
六、抗慢性肾衰药 293
七、抗结石药 293
八、抗前列腺增生药 294
九、抗肿瘤细胞毒药 295
十、抗肿瘤生物反应调节药 296
十一、生殖毒性试验 297
第22章 资料统计与论文撰写 299
第一节 资料的统计整理 299
一、基本概念 300
第二节 常用的统计概念与指标 300
二、常用统计指标 302
第三节 假设检验 303
一、计量资料的假设检验 304
二、计数资料的假设检验 308
三、等级资料的假设检验 311
第四节 关系的确定 312
一、计量资料两指标或两变量间的关系 313
二、列联表资料两种属性的关联 316
三、属等级资料的两有序变量间的相关关系 316
四、秩相关 317
第五节 多元统计分析 317
二、表达方法 320
一、合理处理实验或观察资料 320
第六节 医学论文的撰写 320
三、全文撰写 321
第23章 实验动物与医学研究 325
第一节 遗传学分类与常用实验动物 325
一、遗传学分类 325
二、常用实验动物 325
第二节 实验动物的病原控制和质量监测 328
一、病原控制 328
二、质量监测 329
第三节 动物实验的主要技术 332
一、抓取和固定方法 332
二、编号标记方法 333
三、去被毛方法 334
四、给药途径和方法 335
五、体液、骨髓的采集 338
六、处死方法 341
附录A 实验动物相关指标 343
附录B 常用缓冲液的配制 347
一、磷酸缓冲液 347
二、电泳缓冲液 347
三、凝胶加样缓冲液 348
四、Tris缓冲液 348
五、常用缓冲液 349
六、常用贮存液的配制 349
附录C 精液分析基本指标正常参考值 354
附录D 尿液检查参考值 355
附录E 离心转速与相对离心力(g)的换算 360